2結果與分析

2.1前處理過(guò)程的確定

根據GB/T 18246—2019中的前處理過(guò)程，對部分操作進(jìn)行適當優(yōu)化，經(jīng)過(guò)試驗驗證，水解管不需在冷凍環(huán)境下進(jìn)行充氮操作，只需用氮氣趕盡管中的空氣，因此直接將水解管置于氮氣下充氮3 min即可；水解后分取的樣液僅為0.1 m L，可直接在氮氣下吹干，對實(shí)驗室內環(huán)境不會(huì )造成太大污染，樣液在氮氣下吹干后，使用適合質(zhì)譜儀的0.1%甲酸水溶液進(jìn)行復溶，能夠減小溶劑效應對試驗結果的干擾。

2.2 16種氨基酸的線(xiàn)性方程和檢出限（見(jiàn)表3)

將1.2中的16種氨基酸標準溶液稀釋成濃度在0.01～50.00μmol/L的標準系列溶液，上機進(jìn)行測定，以標準溶液濃度作為橫坐標x（μmol/L），以峰面積作為縱坐標y建立標準曲線(xiàn)。由表3可知，16種氨基酸在0.01～50.00μmol/L范圍內線(xiàn)性良好，相關(guān)系數均大于0.990 0。

以3倍的性噪比（S/N）所對應的質(zhì)量作為檢出限，結果顯示16種氨基酸所能達到的檢測低限為1～10 ng/g。

2.3 16種氨基酸的重復性測試（見(jiàn)表4)

稱(chēng)取同一樣品共6份，按照1.3.4前處理方法制備樣液，在試驗條件下進(jìn)行測定，以出峰時(shí)間計算定性重復性，以氨基酸含量計算定量重復性。由表4可知，16種氨基酸的定性重復性在0.02%～0.12%之間，定量重復性在0.11%～0.94%之間，表明方法具有較好的精密度。

2.4 16種氨基酸的回收率測試（見(jiàn)表5)

選用采購自美正公司的魚(yú)粉質(zhì)控樣品，樣品中16種氨基酸的量值及其擴展不確定度均為已知，按前處理過(guò)程處理試樣，上機測定后計算回收率。由表5可知，16種氨基酸的回收率在97.3%～104.0%之間，實(shí)測結果與質(zhì)控樣標示量值的相對偏差均在2.0%以下，表明方法回收率良好。

2.5實(shí)際樣品測定結果

選用配合飼料、濃縮飼料、魚(yú)粉、肉粉等不同種類(lèi)的樣品共8份，采用GB/T 18246—2019與本方法同時(shí)對8份樣品中16種氨基酸進(jìn)行測定，結果表明，16種氨基酸的相對偏差均在5%以?xún)?，證明本方法測得結果準確可靠。

3結論

研究基于液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀定性準確、檢測效率高等特點(diǎn)，通過(guò)優(yōu)化樣品前處理過(guò)程和液相色譜-質(zhì)譜條件，建立能夠同時(shí)測定飼料中16種氨基酸的檢測方法。本方法處理過(guò)程簡(jiǎn)單、易操作，經(jīng)試驗證實(shí)檢出限低、靈敏度高、精密度良好、回收率、準確度高。與檢測用時(shí)較長(cháng)的氨基酸分析儀相比，能夠縮短分析時(shí)間、提高檢測效率。研究為飼料中16種常規氨基酸含量的檢測提供參考。

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