精密吸取1.2中的混合對照品溶液1、2、5、10、15、20μL,按1.4色譜條件分別進(jìn)樣測定,以待測化合物的質(zhì)量濃度(x)為橫坐標,色譜峰面積(y)為縱坐標進(jìn)行線(xiàn)性回歸,計算線(xiàn)性方程和相關(guān)系數。
將1.2中的混合對照品溶液用50%甲醇溶液逐級稀釋?zhuān)?.4色譜條件下測定,以3倍信噪比對應的質(zhì)量濃度作為檢出限,以10倍信噪比對應的質(zhì)量濃度作為定量限。7種待測成分的線(xiàn)性范圍、線(xiàn)性方程、相關(guān)系數、檢出限及定量限見(jiàn)表1。
由表1可知,7種待測化合物在各自的質(zhì)量濃度范圍內與色譜峰面積線(xiàn)性關(guān)系良好,相關(guān)系數均大于0.999,方法的檢出限和定量限均滿(mǎn)足魚(yú)腥草芩藍合劑中7種化合物的檢測需要。
取魚(yú)腥草芩藍合劑樣品,按照1.3樣品處理方法制備樣品溶液,分別在配制完成后第1、2、4、8、12、24h進(jìn)樣,測定各待測化合物的色譜峰面積。綠原酸、連翹酯苷A、黃芩苷、槲皮苷、漢黃芩苷、槲皮素和漢黃芩素色譜峰面積測定結果的相對標準偏差分別為1.78%、0.81%、0.74%、0.93%、1.21%、1.01%、1.22%,表明樣品溶液在24h內穩定性良好。
取魚(yú)腥草芩藍合劑樣品,按1.3方法平行制備6份樣品溶液,在1.4色譜條件下分別進(jìn)樣測定,計算綠原酸、連翹酯苷A、黃芩苷、槲皮苷、漢黃芩苷、槲皮素和漢黃芩素的質(zhì)量濃度,結果見(jiàn)表2。
由表2可知,綠原酸、連翹酯苷A、黃芩苷、槲皮苷、漢黃芩苷、槲皮素和漢黃芩素測定結果的相對標準偏差為1.23%~1.76%,表明該方法精密度較好,滿(mǎn)足測定要求。
精密量取6份魚(yú)腥草芩藍合劑樣品各1mL,分別精密加入綠原酸、連翹酯苷A、黃芩苷、槲皮苷、漢黃芩苷、槲皮素和漢黃芩素單標儲備液各1.0、1.0、2.0、0.2、5.0、0.2、0.5mL,按照1.3樣品處理方法制備加標樣品溶液,在1.4色譜條件下分別進(jìn)樣測定,計算樣品加樣回收率,結果見(jiàn)表3。
由表3可知,樣品加標平均回收率為在98.17%~101.48%,表明該方法準確性良好。
建立了高效液相色譜法同時(shí)測定魚(yú)腥草芩藍合劑中綠原酸、連翹酯苷A、黃芩苷、槲皮苷、漢黃芩苷、槲皮素和漢黃芩素含量的方法。所測7種成分涉及4種藥材中的活性成分,涵蓋了多類(lèi)指標成分,包括2種苯丙素和5種黃酮,為魚(yú)腥草芩藍合劑的質(zhì)量控制提供了參考方法。
相關(guān)鏈接:綠原酸,連翹酯苷A,漢黃芩苷,漢黃芩素
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