在日常生活中,部分商家會(huì )將不合格的產(chǎn)品投入市場(chǎng),而表象上這些產(chǎn)品與合格產(chǎn)品并無(wú)兩樣,但這些不合格的產(chǎn)品會(huì )影響人們的生活和身體健康,例如人們平時(shí)所吃的大米有些含有黃曲霉這種病菌,黃曲霉對蛋白質(zhì)合成氨基酸有抑制作用,干擾細胞的代謝從而對人們的身體健康造成影響。不同的人由于身體素質(zhì)不同對于致病菌有不同的抵抗作用,身體較弱的人對病菌幾乎沒(méi)有抵抗作用。不同的病菌也需要不同的檢測技術(shù),例如肉毒桿菌、沙門(mén)氏菌、黃色葡萄球菌、副溶血性弧菌和大腸桿菌等。這就要求完善市場(chǎng)監管,給食品安全作出保障,對不合格的食品及時(shí)出具報告并予以警告。
目前我國常用的食品樣本的采集方式有以下幾種。
在樣品采集中為了使樣品更具有普遍性,應隨機對樣品進(jìn)行抽檢,有條件時(shí),可適當擴大采集的樣品數量,這樣可讓抽檢的樣品更具有代表性;抽檢的樣品應在無(wú)菌環(huán)境下保存,以免污染,樣品不得摻入其他物質(zhì)或防腐劑等;送檢樣品的復檢過(guò)程中只能使用同一批次的樣品,應為同一單位、同一規格和同一生產(chǎn)日期;采樣用具本著(zhù)適度的原則,拒絕浪費,常用的器具有鑷子、勺子、鏟子、開(kāi)罐器、吸管、量筒、乳膠手套、一次性注射器和消毒紗布等。
將小刀放在酒精噴燈下,進(jìn)行消毒殺菌后,用小刀將樣品表面薄薄地刮下一層,將刮下的樣品表面裝入干燥處理后的滅菌容器中送檢。
將棉拭子消毒滅菌,沾濕滅菌生理鹽水抹擦表面一定面積后,放入滅菌生理鹽水管。
將大腸桿菌做消毒處理。再用生理鹽水浸潤,使其處于濕潤狀態(tài)并貼于樣品表面。一份樣品包含兩片紙片。粘附1min后取出置于無(wú)菌袋中。
取5份為一組樣品,將紙片潤濕后,用毛細吸管吸取紙片,將紙片樣品用約5cm的玻璃棒進(jìn)行潤濕,樣品每份取出兩張進(jìn)行潤濕,洗脫后裝入含有滅菌處理后的50m L濃度為0.9%的生理鹽水試管中。
根據樣品的面積和堆積的形狀采用分區設點(diǎn),或根據樣品的高度采用分層采樣、分區設點(diǎn),每一塊的面積不得超過(guò)50cm2,各區塊中心加上四角共設5點(diǎn);兩個(gè)及以上的區塊在分界線(xiàn)上的兩個(gè)點(diǎn)為共有點(diǎn)。將樣品分為上、中、下三層,取每一層的5個(gè)點(diǎn)的等量樣本進(jìn)行充分混合,再將樣品進(jìn)行檢驗。
對于人們日益增長(cháng)的食品安全需求,傳統的食品檢測技術(shù)耗時(shí)費力,且精確度不高。而微生物檢測技術(shù)應運而生,傳統的食品檢測方法有原子吸收光譜法、氣相色譜法和質(zhì)譜法等,這些檢測技術(shù)有免疫酶技術(shù)、基因探針技術(shù)、聚合酶鏈式反應技術(shù)和生物芯片技術(shù)等精密度能夠滿(mǎn)足食品檢測要求的新型微生物技術(shù)。將新型微生物檢測技術(shù)與前沿的化學(xué)分析法結合,既能提高檢測的效率與精確度,還能簡(jiǎn)化操作過(guò)程,可以及時(shí)出具檢測報告。
光輻射可被特定的氣態(tài)原子吸收能量,是將原子的外層電子從基態(tài)到激發(fā)態(tài)的過(guò)程而建立的。不同原子所含有的能量和能級不同,可以選擇性地通過(guò)共振作用吸收特定波長(cháng)的輻射光。原子激波長(cháng)與共振作用所吸收的波長(cháng)一致。當光源發(fā)射的特定波長(cháng)的光通過(guò)原子蒸氣時(shí),原子由基態(tài)躍升至激發(fā)態(tài)時(shí)所需能量頻率也與入射輻射的頻率一致,這就使得原子中的外層電子將選擇性地吸收其同種元素所發(fā)射的特征譜線(xiàn),使入射光減弱。特征譜線(xiàn)因吸收而減弱的程度稱(chēng)吸光度A,在線(xiàn)性范圍內與被測元素的含量成正比。該原子吸收光譜儀主要有單光束型光譜儀和雙光束型光譜儀,造價(jià)低,易于廣泛使用。但該光譜儀也有一定缺陷,其缺點(diǎn)在于精確度和靈敏度有一定的局限性。
聚合酶鏈式反應是一種流行的技術(shù),即PCR技術(shù),是指DNA在高溫下(95℃以上)變性DNA雙鏈變?yōu)閱捂?,在溫度降低?0℃以下時(shí),在DNA聚合酶(通常是72℃),鎂離子、DNTP和引物等原材料與高溫變性所形成的單鏈以堿基互補配對原則,按照磷酸到五碳糖的方向(5'端至3'端)重新締合為雙鏈。根據聚合酶鏈式反應制造的PCR儀是利用溫度對PCR反應的過(guò)程進(jìn)行控制,對DNA在高溫時(shí)變性成單鏈,在低溫時(shí)重新恢復成雙鏈以及其原材料的溫度把控能做到精確控制,最終實(shí)現食品微生物聚合酶鏈式反應的檢測。
基因探針技術(shù)即DNA探針技術(shù),基因探針雜交技術(shù)可分為相雜交以及意雜交兩種技術(shù)。利用DNA在高溫變性以及低溫復性以及堿基互補配的高度精確性??梢詼蚀_測出DNA的序列,其應用廣泛,且準確率高,在食品安全微生物檢測中,可以提高檢測效率。例如:常見(jiàn)的大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和沙門(mén)氏菌等?;蛱结樇夹g(shù)與傳統的微生物檢測技術(shù)相比,其操作簡(jiǎn)便,應用廣泛,效率高,準確率高,靈敏度高,檢測過(guò)程中的特異性也比較高,實(shí)際操作性強,但技術(shù)部分欠缺,有待完善。
免疫學(xué)檢測技術(shù)是一種常見(jiàn)的食品微生物檢測術(shù),其中最為常見(jiàn)的檢測技術(shù)是酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測技術(shù),利用抗原與抗體的特異性結合,其具有高度的專(zhuān)一性,提高食品微生物檢測效率。其原理是給抗體加上標記,是其特異性的與抗體酶結合。將含有標記的抗體酶制成標本,由于酶的高效的催化作用和高度的專(zhuān)一性,抗原特異性的與抗體上的酶結合發(fā)生特定的反應。據反應產(chǎn)生的底物顏色可對不同的抗原和抗體檢驗,做特定的分析,得出相關(guān)數據。因此酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測法具有高效性、特異性以及穩定性。但由于其高度的特異性,故檢測時(shí)也有一定的局限性。適用于新鮮食品的檢驗以及基因工程食品的檢驗。
生物芯片技術(shù)是利用分子間特異性作用的原理光導原位合成或者微量點(diǎn)樣,可得出已知序列的核酸片段或蛋白質(zhì)片段集成于基片表面的微縮技術(shù)。對表面的核酸和蛋白質(zhì)分析,得出對核酸類(lèi)、蛋白質(zhì)類(lèi)、多肽類(lèi)的組成成分。該種技術(shù)目前較為成熟,可高效地分析組分,具有準確、方便、快捷且節省資費的優(yōu)點(diǎn),更多地表露出基因表達變換的關(guān)系。目前,根據芯片上的材質(zhì)不同,可將常用的生物芯片包括基因芯片、蛋白質(zhì)芯片、多糖芯片和神經(jīng)元芯片等與相匹配的食物做安全檢測。芯片的主要材料包括硅、玻璃、膜(纖維素)等以上材料制成基片?;戏磻l(fā)射的信號可被熒光標記的目標分子反應,根據反應的強度不同進(jìn)行分析。我國生物芯片技術(shù)剛剛起步,有待發(fā)展。清華大學(xué)、東南大學(xué)、北京軍事醫學(xué)科學(xué)院等大學(xué)已開(kāi)始生物芯片研究并取得一定成果,部分生物芯片已經(jīng)問(wèn)世。與傳統的微生物檢測技術(shù)相比,生物芯片技術(shù)可以完成標記、雜交等一系列反應,不再分步進(jìn)行。節省了工序和資金,且少了多余步驟的干擾,提高了檢測結果的準確性。
生物傳感器技術(shù)是利用分子識別作用產(chǎn)生某些物理變化或化學(xué)變化進(jìn)行特異性結合產(chǎn)生生物學(xué)信息最終轉化為光信號或電信號。在檢測時(shí)選擇與樣品匹配的傳感器可以提高效率,節省能源,且進(jìn)行化學(xué)分析的步驟簡(jiǎn)便甚至可實(shí)現自動(dòng)分析。例如:食品中常常測定水果的成熟與腐敗,通過(guò)對葡萄糖的濃度與酒精濃度的分析鑒定水果的品質(zhì)。而用生物傳感器技術(shù)微生物病菌的檢測則速度更快,通常只需要1d,傳統檢測技術(shù)則需要4d,極大地節省了時(shí)間,值得大量運用。
隨著(zhù)市場(chǎng)的食品流通速度加快,食品安全需求同步提高的要求刻不容緩。而在實(shí)際市場(chǎng)中食品安全卻往往得不到保障。食品微生物檢測技術(shù)進(jìn)入革新?tīng)顟B(tài),應提高檢測效率、靈敏度和精確度,進(jìn)一步保障食品安全,加強市場(chǎng)監督管理。目前食品生產(chǎn)仍然使用流水線(xiàn)生產(chǎn)制造,保證流水車(chē)間的無(wú)菌環(huán)境,以及食品流向市場(chǎng)之前的安全檢測結果通常會(huì )因為提高流水線(xiàn)的產(chǎn)量、效率以及降低成本而不被重視,按照標準檢測的力度會(huì )降低甚至懈怠忽略產(chǎn)品安全的最低標準。企業(yè)檢驗設備的優(yōu)良、檢驗的熟練度會(huì )影響到檢測結果的效率以及品質(zhì)。尤其是零散食品,由于沒(méi)有特定的包裝和定量,檢測標準應當更加嚴格。提高食物微生物檢測的效率,可以使食物更加快速地來(lái)到市場(chǎng),增加新鮮度。如果檢驗效率過(guò)慢會(huì )影響食品投入市場(chǎng)的速度,最終導致食品接近保質(zhì)期而造成浪費。因此,提高食物微生物檢測的效率非常有必要。
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