尼古丁是強正負極的有機化合物,可溶強電解質(zhì)和工業(yè)甲醇,該實(shí)驗選擇不一樣含量的硫酸、氫氧化鈉溶液、氫氧化鈉和工業(yè)甲醇調查不一樣有機溶劑的提取實(shí)際效果(表2)。
由表2得知,不一樣含量的甲醇溶液中尼古丁成分整體高過(guò)氫氧化鈉溶液水溶液,與氫氧化鈉和硫酸提純實(shí)際效果無(wú)顯著(zhù)性差異。依據許燕娟等的分析結果,堿性溶液的硬度對尼古丁提純率要比較大危害,同樣濃度值下氨溶液比氫氧化鈉溶液水溶液檢驗到的黃酮類(lèi)型多。相近地,Li等用不一樣濃度值氫氧化鈉提純煙草中的黃酮,發(fā)覺(jué)6%氫氧化鈉好于其他濃度值,也罷于氫氧化鈉溶液水溶液。綜合性充分考慮甲醇溶液對比氫氧化鈉和鹽酸溶液有益于試品溶劑的存放和液相色譜儀柱及其具備不錯的抗菌性,因而,選用5%工業(yè)甲醇做為事后實(shí)驗的提純有機溶劑。
超聲波、微波加熱等常見(jiàn)于輔助提純實(shí)驗,殊不知他們在提升提純率的與此同時(shí),也會(huì )產(chǎn)生大量殘渣,這針對選用紫外光光度法檢驗十分不好,因而,挑選比較柔和的常溫下波動(dòng)法開(kāi)展提純。由表3中還可以看得出,伴隨著(zhù)提純時(shí)間的增加,提純率上升,而在25、30 min時(shí)無(wú)明顯差別,為保險起見(jiàn)選用30 min做為提純時(shí)間。
原公式計算以236和282 nm為梯狀的中位線(xiàn)法推斷殘渣在259 nm處的影響。由圖1能夠看得出,因為殘渣的影響,提取液的紫外線(xiàn)消化吸收低谷由尼古丁的236 nm紅挪到240~242 nm處,而與之等間距的是276~278 nm。但從圖1中還可以看得出,在光波長(cháng)低于278 nm時(shí),4種種類(lèi)試品溶劑的紫外線(xiàn)OD值與光波長(cháng)產(chǎn)生的切線(xiàn)斜率比較大,為減少偏差而檢驗279~282 nm處OD值。因而,以240、259和282 nm的OD值用以新公式計算的線(xiàn)性擬合。尼古丁成分以HPLC法檢驗結果顯示為標準。
從表4中OD值與尼古丁成分的關(guān)聯(lián)性結果還可以看得出,尼古丁成分與240 nm關(guān)聯(lián)性貼近明顯水準,這是由于尼古丁在240 nm有紫外線(xiàn)消化吸收,但又有殘渣影響導致的;與259 nm處OD值關(guān)聯(lián)性做到明顯水準,這就是選用該方式基本原理所屬。尼古丁與282 nm處的OD值關(guān)聯(lián)性較弱,這是由于尼古丁在該點(diǎn)無(wú)消化吸收(圖1),其OD值是由于殘渣的影響。而試品水溶液在240、259和282 nm處的OD值中間呈極明顯關(guān)聯(lián)性,這正好表明殘渣對這3個(gè)光波長(cháng)處的OD值危害一致,這恰好是原公式計算創(chuàng )建的基本。
以20個(gè)煙葉試品在240、259和282 nm處的OD值為變量,以HPLC檢驗尼古丁成分為自變量用SPSS手機軟件線(xiàn)性擬合重歸獲得線(xiàn)性擬合方程式為:
C=(0.080 7 0.426 9×A259 0.473 9×A240 -0.631 2×A282)V/m
式中,C為尼古丁成分/%,A259,A240和A282分別為試品溶劑的OD值,V為試品水溶液容積/L,m為煙樣品質(zhì)/g。
再各自以?xún)蓚€(gè)公式計算對剩下5七個(gè)煙草試品尼古丁成分開(kāi)展測算,隨后各自將數值除于HPLC檢驗結果,則比率越貼近1表明檢驗越精確。由圖3能夠看得出,所有試品的原計算公式結果與HPLC檢驗結果的比率基本上呈標準正態(tài)分布,且在0.75~1.25的一部分占49.12%;而煙葉試品的比率在0.75~1.25的占55.88%,市場(chǎng)集中度略微提高;針對晾干煙試品,其比率也呈標準正態(tài)分布,但市場(chǎng)集中度較煙葉低,0.75~1.25的僅占39.13%。所有試品的線(xiàn)性擬合計算公式結果與HPLC檢驗效果的比率基本上呈標準正態(tài)分布,0.75~1.25的占61.40%,高過(guò)原公式計算;煙葉試品的比率在0.75~1.25的占76.47%,市場(chǎng)集中度有大幅度提高;針對晾干煙試品其市場(chǎng)集中度較低,比率在0.75~1.25也是僅占39.13%,可是比率在0.5~0.75和1.25~1.60的各自由17.39%、21.74%提高至26.09%、30.43%。能夠看得出,兩個(gè)公式計算的結論均是煙葉市場(chǎng)集中度高過(guò)晾干煙,這是由于:1) 2種辦法的創(chuàng )建基本為煙葉,2) 晾干煙的雜物對OD值的影響有區別。
4種種類(lèi)煙草試品的紫外線(xiàn)掃描儀表明,3種晾干煙的圖型一致而與煙葉有區別,主要表現為峰時(shí)比率前三者比較貼近,及其消化吸收光波長(cháng)超過(guò)276 nm后的趨勢呈遲緩降低而煙葉的紫外線(xiàn)消化吸收基本上不會(huì )改變,表明不一樣香煙種類(lèi)的雜物對吸附的危害有一定的差別。根據對不一樣提純有機溶劑的調查發(fā)覺(jué),工業(yè)甲醇、硫酸和氫氧化鈉提純高效率較高,挑選工業(yè)甲醇做為提純有機溶劑,是由于不錯的抗菌性,而且有益于試品溶劑的儲存及其對離子交換柱友善。
原公式計算創(chuàng )建的根基是朗伯比爾基本定律即尼古丁成分與OD值正相關(guān)??墒窃诰唧w測量全過(guò)程中,因為測試儀器等的偏差,標曲或是擬合曲線(xiàn)一般呈線(xiàn)性相關(guān)并非正比例關(guān)聯(lián)。此外,該實(shí)驗紫外線(xiàn)掃描儀圖和參考文獻中都表明尼古丁在236 nm上有一定的紫外線(xiàn)消化吸收,而不是無(wú)消化吸收,因此無(wú)法將236 nm處的OD值所有做為殘渣。試品水溶液在240、259和282 nm處的OD值中間存有極明顯關(guān)聯(lián)性表明殘渣對這3處的OD值危害比較一致,這恰好是2個(gè)公式計算創(chuàng )建的基本。根據2個(gè)公式計算的數值與HPLC結果的比率遍布能夠發(fā)覺(jué),針對煙葉試品,新線(xiàn)性擬合公式計算的準確度較原公式計算有大幅度提高;而針對晾干煙試品則沒(méi)有顯著(zhù)提高,這是由于2個(gè)公式計算的創(chuàng )建均是以煙葉為基本而創(chuàng )建的,殊不知晾干煙的殘渣與煙葉不一樣,這在紫外線(xiàn)掃描儀圖中也有一定的體現。下一步將整理大量晾干煙試品,以創(chuàng )建更適用他們的計算方法。