4、opo結構脂肽成分的鋅鰲合工作能力
分離出來(lái)獲得4組opo結構脂肽成分的鋅鰲合工作能力如圖所示3所顯示。Fl和F2成分主要表現出較高的鋅鰲合工作能力,各自為39.27%和25.90%,彼此之間具備明顯的差別(P<0.05)。F3和F4成分鰲合鋅的水平相對性較低,各自為18.97%和16.77%(P>0.05)。這一結果進(jìn)一步表明肽成分中酸堿性碳水化合物的成分對其鰲合鋅的水平有關(guān)鍵危害。劉華等從牡蠣肉中剝離獲得的包含較多酸性氨基酸的牡蠣肽具備較高的鋅鰲合工作能力。
因為靜電感應相互影響,ζ電勢差在肽與鋅鰲合全過(guò)程中起著(zhù)非常重要的功效。肽成分的ζ電勢差與其說(shuō)鋅鰲合工作能力展現極強的成反比關(guān)聯(lián),ζ電勢差越低越易于將鋅離子集聚在其帶負電的表層。
5、肽-鋅螯合物的腸胃可靠性及鋅的離解率
將肽一鋅螯合物在pH 2.0,37℃標準下經(jīng)胃蛋白酶消化吸收2h,結果發(fā)覺(jué)鋅離子在消化過(guò)程中會(huì )不一樣水平的從螯合物中釋放出(表2)。從表格中還可以看得出,在胃消化吸收環(huán)節,F1成分中鋅離子的離解率最少為5.35%;次之為F2成分,為8.77%;F3和F4成分中鋅離子離解率相對性較高,各自為10.58%和12.33%。有研究表明,金屬離子螯合物在弱酸性情況下較非常容易離解。除此之外,胃蛋白酶的水解作用也會(huì )造成鋅離子的釋放出來(lái)。在腸消化吸收環(huán)節,鋅離子很多從螯合物中釋放出。F1-F4成分中鋅正離子的離解率各自為:29.21%、32.09%、36.74%和37.71%。盡管胰酶的水解作用推動(dòng)了鋅離子的離解,可是依然能夠看到伴隨著(zhù)肽成分ζ電勢差的提升,鋅的離解水平逐步提升。
肽-鋅螯合物在腸胃環(huán)節的消化吸收可靠性對其消化吸收特別是在關(guān)鍵。在胃消化吸收環(huán)節,螯合物的穩定好,則鋅離子不容易被植酸融合;在腸環(huán)節鋅離子的離解則有利于其消化吸收。本分析中ζ電勢差較低的F1和F2成分在腸胃消化過(guò)程中鋅離子離解率比ζ電勢差較高的F3和F4成分低,表明肽的表層負電有益于肽-鋅螯合物在腸胃消化過(guò)程中的可靠性。
6、肽-鋅螯合物中鋅的微生物使用率
歷經(jīng)腸胃消化吸收后的肽-鋅螯合物在Caco-2細胞模型上仿真模擬腸消化吸收,4組肽-鋅螯合物中鋅離子的微生物使用率如圖4所顯示。F2組螯合物中鋅離子的微生物使用率最大,為37.1%,次之為F3組螯合物,為29.5%,F1和F4組螯合物中鋅離子的微生物使用率最少,在16%上下,且彼此之間并沒(méi)有顯著(zhù)性差別(P>0.05)。仿真模擬腸消化吸收后肽-鋅螯合物中鋅的微生物使用率由兩部份構成:一是以化合態(tài)消化吸收的鋅,二是以螯合物方式消化吸收的鋅。從圖4能夠看得出,4組螯合物經(jīng)消化吸收后,分散鋅的成分中間并沒(méi)有顯著(zhù)性差別,均在6%~8%中間,因而,F2和F3成分中以螯合物方式消化吸收的鋅成分數最多,各自為29.8%和21.4%;F1和F4成分較少,各自為8.5%和9.4%。這一結果表明有相當于一部分鋅離子是根據肽-鋅螯合物的方式開(kāi)展消化吸收,且消化率不一樣,進(jìn)而造成4組螯合物中鋅的微生物使用率不一樣。
Caco-2細胞模型會(huì )生成與結腸鱗狀上皮細胞類(lèi)似的刷狀緣酶系,肽-鋅鰲合在細胞模型上實(shí)現消化吸收時(shí),最先會(huì )遭受細胞模型表層刷狀緣酶的水解作用,造成螯合物的離解。除此之外,有研究表明,金屬離子與肽產(chǎn)生的一氧化氮合酶能夠當作一個(gè)總體共享資源肽的消化吸收裝運途徑進(jìn)到體細胞和血液循環(huán)系統。本實(shí)驗中,F1成分的善電勢差最少,F4成分孝電勢差最大,可是兩成分中鋅的微生物使用率反倒較低,表明過(guò)高或過(guò)低的毒電勢差都不利肽-鋅螯合物中鋅的微生物使用率。
四、結果
以歷經(jīng)Sephadex C 25疑膠柱層析分離出來(lái)得到的opo結構脂肽成分制取肽-鋅螯合物,選用身體之外胃酸-腸液-Caco-2體細胞的三段式消化實(shí)體模型,科學(xué)研究肽的外表正電荷特性對肽-鋅螯合物的腸胃消化吸收可靠性和微生物使用率的危害。本科學(xué)研究結果是:opo結構脂肽成分的ζ電勢差與其說(shuō)鰲合鋅離子的工作能力反比,ζ電勢差越低,鰲合鋅離子的水平越強,在腸胃消化過(guò)程中,由較低ζ電勢差的肽產(chǎn)生的肽-鋅螯合物具備更好的消化吸收可靠性,鋅離子的離解率較低;而在之后的Caco-2體細胞消化吸收操作過(guò)程中,過(guò)高和過(guò)低的ζ電勢差都是會(huì )危害肽-鋅螯合物的消化吸收。本分析的效果能夠為開(kāi)發(fā)設計高效率補鐵劑給予理論來(lái)源,具備一定的實(shí)際意義。