目地 選用超高效率液相色譜儀-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)性，創(chuàng )建二類(lèi)醫療器械中8類(lèi)13種抗菌素的檢查方式。方式 試品經(jīng)工業(yè)甲醇或乙腈獲取后，經(jīng)Waters HSS T3離子交換柱(100 mm×2.1 mm， 1.8μm)分離出來(lái)，三重四級桿串連質(zhì)譜儀器檢驗。結果 13種選中的抗菌素在4～100μg/L范疇內線(xiàn)性相關(guān)優(yōu)良，相關(guān)系數r均超過(guò)0.991，方法檢出限為2～25μg/kg。在3種不一樣制劑的二類(lèi)醫療器械中，低、中、高3個(gè)濃度值加標水準的利用率為71.2%～130.4%，相對性相對標準偏差均低于11.3%，達到二類(lèi)醫療器械中抗菌素違反規定加上的檢查規定。應用創(chuàng )建的方式 ，在一份膏霜制劑的二類(lèi)醫療器械中檢查出氧氟沙星，成分為21.1 mg/kg，其他試品中都未驗出有關(guān)化學(xué)物質(zhì)。結果 該辦法簡(jiǎn)易、靠譜、再現性好，遮蓋的抗生素種類(lèi)多。

抗菌素做為一種農藥殺菌劑，被普遍使用于臨床醫學(xué)、養殖業(yè)、水產(chǎn)品養殖等領(lǐng)域。但因為抗菌素的很多應用，其抗藥性遭受很多的關(guān)心。大家都知道，二類(lèi)醫療器械也具備消滅病菌的功效。有別于歐美國家等資本主義國家，在我國未將二類(lèi)醫療器械列入藥品開(kāi)展管理方法，原國家衛生部《消毒產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)衛生規范》(2009年版)第五章第三十條明確提出“二類(lèi)醫療器械嚴禁采用抗菌素、抗真菌藥、生長(cháng)激素等原材料”。殊不知，一部分制造業(yè)企業(yè)依然違反規定加上抗菌素類(lèi)藥，以提升消毒殺菌或抗抗菌實(shí)際效果，用以假冒二類(lèi)醫療器械和抗抗菌商品，這不但加深了抗生素類(lèi)的過(guò)度使用狀況，與此同時(shí)也給消毒殺菌和抗抗菌商品的可靠運用導致安全隱患。

現階段世界各國對抗菌素的檢驗具體涉及自然環(huán)境樣版、微生物樣版、肉食品、奶制品、護膚品等，而有關(guān)二類(lèi)醫療器械中抗菌素檢驗的探究非常少，很少有的消息也只包含了一兩大類(lèi)抗菌素的檢驗，未有多類(lèi)型抗菌素檢驗的報導。原國家衛生部數次機構集中整治行動(dòng)，嚴厲打擊違反規定加上個(gè)人行為，因為沒(méi)有健全的辦法和相對應的國家行業(yè)標準，現階段依然沒(méi)法對相關(guān)產(chǎn)品開(kāi)展合理管控?，F階段抗菌素的檢查辦法有酶聯(lián)免疫法、毛細管電泳法、氣象色譜儀-質(zhì)譜分析聯(lián)使用方法、液相色譜儀法及液相色譜儀-質(zhì)譜分析聯(lián)使用方法等。本方式根據超高效率液相色譜儀-串聯(lián)質(zhì)譜(ulta high perfomance chromatography tandem mass spectrometry，UPLC-MS/MS)，創(chuàng )建了對不一樣制劑的二類(lèi)醫療器械中四環(huán)素類(lèi)(四環(huán)素、土霉素、金霉素、米諾環(huán)素、強力霉素)、大環(huán)內酯(羅紅霉素)、β-內酰胺類(lèi)(頭孢拉定)、磺胺類(lèi)(磺胺嘧啶)、氟喹諾酮(氧氟沙星、環(huán)丙沙星)、林可氟苯類(lèi)(克林霉素)、氟苯咪唑類(lèi)(奧硝挫)、氯霉素類(lèi)(氯霉素)8類(lèi)13種抗菌素的檢查方式。

1 原材料與方式

1.1 儀器設備和實(shí)驗試劑

30 A超高效率液相色譜(日本安捷倫儀器企業(yè))，QTRAP 5500三重四級桿串連質(zhì)譜儀器(英國AB SCIEX企業(yè))，Waters HSS T3離子交換柱(100 mm×2.1 mm， 1.8 μm，英國Waters企業(yè))。

抗菌素國家標準物質(zhì)包含四環(huán)素、土霉素、金霉素、米諾環(huán)素、強力霉素、羅紅霉素、頭孢拉定、磺胺嘧啶、氧氟沙星、環(huán)丙沙星、克林霉素、奧硝挫、氯霉素，同位素標記物包含四環(huán)素-D6、土霉素-13C22-15N2、米諾環(huán)素-D6、強力霉素-D3、磺胺嘧啶-D6、頭孢氨芐-D5、左氧-D8、環(huán)丙沙星-D5、羅紅霉素13C-D3、克林霉素-D3、奧硝挫-D4、氯霉素-D5，均購自法國Dr. Ehrenstorfer GmbH及其德國Romerlabs倆家企業(yè)。色譜儀級的工業(yè)甲醇、乙腈購自Merck企業(yè)。色譜儀級的苯甲酸購自阿拉丁。分析純的氧化鈉購自國藥控股。MS級水購自飛世爾企業(yè)。0.22 μm滌綸膜購自津滕企業(yè)。試品來(lái)自于生產(chǎn)廠(chǎng)家復檢試品(非抗菌素新項目檢驗試品)，儲存在4 ℃冰柜中。

1.2 標液配置

各自精確稱(chēng)量各標準物質(zhì)及放射性核素內標10 mg，用工業(yè)甲醇融解并滴定劑于10 mL容量瓶中，配出濃度值為約1.0 mg/mL的規范貯備液，-20 ℃冷藏遮光儲存。各自精確汲取適當各單一規范貯備液于25 mL容量瓶中，用工業(yè)甲醇稀釋液至標尺，配置成含量為10 μg/mL的混和規范正中間液，4 ℃冷凍遮光儲存；各自汲取適當單一內標貯備液于10 mL容量瓶中，用工業(yè)甲醇稀釋液至標尺，配置成5 μg/mL的混和內標正中間液，4 ℃冷凍遮光儲存。

1.3 試品前解決

液態(tài)制劑：稱(chēng)量0.2 g(精準至1 mg)混和均衡的試品，放置15 mL離心管架中，先添加10.0 μL混和內標正中間液，加上3.0 mL工業(yè)甲醇，渦流1 min使試品分散化，超聲波獲取10 min，添加0.15 g氧化鈉，渦流攪拌，9000 r/min離心式5 min，汲取上清液，濾紙過(guò)慮，取0.8 mL滲瀝液至氣相瓶中，添加0.2 mL水，混和勻稱(chēng)，供超高效率液相色譜儀-串聯(lián)質(zhì)譜測量。

疑膠制劑：稱(chēng)量0.2 g(精準至1 mg)混和均衡的試品，放置15 mL離心管架中，先添加10.0 μL混和內標正中間液，加上3.0 mL乙腈，渦流1 min使試品分散化，超聲波獲取10 min，9000 r/min離心式5 min，汲取上清液，濾紙過(guò)慮，取0.8 mL滲瀝液至氣相瓶中，再添加0.2 mL水，混和勻稱(chēng)，供超高效率液相色譜儀-串聯(lián)質(zhì)譜測量。

膏霜制劑：稱(chēng)量0.2 g(精準至1 mg)混和均衡的試品，放置15 mL離心管架中，先添加10.0 μL混和內標正中間液，加上3.0 mL工業(yè)甲醇，渦流1 min使試品分散化，超聲波獲取10 min，9000 r/min離心式5 min，汲取上清液，濾紙過(guò)慮，取0.8 mL滲瀝液至氣相瓶中，添加0.2 mL水，混和勻稱(chēng)，供超高效率液相色譜儀-串聯(lián)質(zhì)譜測量。

1.4 儀器設備標準

1.4.1 色譜儀標準

離子交換柱：Waters HSS T3離子交換柱(100 mm×2.1 mm，1.8 μm)；流動(dòng)性相：A相為0.1%苯甲酸溶液，B相為乙腈；流動(dòng)速度0.3 mL/min；柱溫40 ℃；氣相容積5 μL；梯度方向過(guò)柱程序流程見(jiàn)表1。

1.4.2 質(zhì)譜分析標準

水解方法：ESI 和ESI-與此同時(shí)掃描儀；離子源溫度：550 ℃；毛細血管工作電壓： 5.5 kV(ESI )和 -4.5 kV(ESI-)；氣簾氣：30 psi；做霧化氣：65 psi；輔助氣：65 psi；檢測方式：多反映檢測(MRM)方式，各總體目標化學(xué)物質(zhì)的質(zhì)譜分析主要參數見(jiàn)表2。

1.5 校正曲線(xiàn)制作

在以上色譜儀標準和質(zhì)譜分析標準下制作校正曲線(xiàn)，該線(xiàn)條的縱軸為被測成分i定量分析正離子峰總面積Ai與內標物定量分析正離子峰總面積Ais比例Ai/Ais，橫坐標軸為試品中被測成分i的成分Ci。

1.6 方法檢出限和定量限的明確

選擇沒(méi)有總體目標化學(xué)物質(zhì)的試品，添加較低濃度的混和規范正中間液，依照1.3節解決后上機操作檢驗，得到各總體目標剖析物的頻率穩定度數據信息，依據加標量，依照3倍頻率穩定度(S/N=3)做為方法檢出限、10倍頻率穩定度(S/N=10)做為定量限的標準測算方法檢出限和定量限。