2.2.4 線(xiàn)性相關(guān)調查

各自高精密汲取混和標準品水溶液1、5、10、15、20、25、30μL引入高效率液相色譜中，按以上色譜儀標準剖析。以峰總面積（Y）為縱軸，標準品進(jìn)樣量（X）為橫坐標軸，制作標曲，獲得的線(xiàn)性回歸方程及相關(guān)系數r各自為：Y=2×109X-23 374,r=0.999 9;Y=6×108X-18 200,r=0.999 5;Y=4×108X-13 246,r=0.999 3；說(shuō)明原兒茶酸在0.021 95～0.658 5μg，兒茶酸在0.047 2～1.416μg，表兒茶素在0.041 5～1.245μg時(shí)，峰總面積與進(jìn)樣量呈優(yōu)良的線(xiàn)性相關(guān)。

2.2.5精度實(shí)驗

高精密汲取混和標準品水溶液，按“2.2.1”項下色譜儀標準反復氣相6次，結果原兒茶酸、兒茶酸、表兒茶素峰總面積的RSD各自為0.35%、0.45%、1.83%，說(shuō)明儀器設備精度優(yōu)良。

2.2.6 可靠性實(shí)驗

取試品粉末狀1.0 g，高精密稱(chēng)取，按“2.2.3”項下方式制取供試品水溶液，室內溫度置放，各自于0、2、4、6、8、13、24 h氣相測量，結果原兒茶酸、兒茶酸、表兒茶素峰總面積的RSD各自為1.52%、1.76%、1.15%，表明試品在24 h內平穩。

2.2.7 可重復性實(shí)驗

取同一試品粉末狀6份，每一份1.0 g，高精密稱(chēng)取，按“2.2.3”項下方式制取供試品水溶液，氣相測量，數據顯示原兒茶酸、兒茶酸、表兒茶素峰總面積的RSD各自為0.91%、0.61%、0.65%，說(shuō)明可重復性?xún)?yōu)良。

2.2.8 加樣利用率實(shí)驗

取己知成分的試品粉末狀6份，每一份1.0 g，高精密稱(chēng)取，各自高精密添加原兒茶酸、兒茶酸、表兒茶素標準品，按“2.2.3”項下方式制取供試品水溶液并測量，測算加樣利用率。結果見(jiàn)表2。

2.2.9 試品的含量測量

取雞血藤手鐲粉末狀1.0 g，高精密稱(chēng)取，每次中藥材平行面3份，按“2.2.3”項下方式制取供試品水溶液并舉樣測量，并測算成分。結果見(jiàn)表3和圖2。

2.3 芒柄花素、染料木素成分

測量參考梁永樞等[10]方式完成測量。

2.3.1 色譜儀標準

Waters Xselect C18色譜柱（250 mm×4.6 mm,5μm）；流動(dòng)性相：0.1%H3PO4-乙腈（66∶34），等度過(guò)柱；檢驗光波長(cháng)：254 nm；流動(dòng)速度：1 m L·min-1；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：20μL。標準品及供試品水溶液色譜見(jiàn)圖3。

2.3.2 標準品水溶液的制取

各自高精密稱(chēng)取染料木素和芒柄花素標準品1.90、1.19 mg，加工業(yè)甲醇滴定劑至5 m L，做成標準品儲備液。各自高精密汲取染料木素、芒柄花素標準品儲備液1 m L，滴定劑至5 m L做為混和標準品水溶液。

2.3.3 供試品水溶液的制取

取試品粉末狀約1 g，高精密稱(chēng)取，加70%酒精30 m L加溫流回獲取2次，每一次15 min，合拼2次萃取液，緩解壓力回收利用有機溶劑至干，沉渣加工業(yè)甲醇滴定劑于5 m L深棕色量瓶中，混勻，做為供試品水溶液。

2.3.4 標曲的制取

各自汲取“2.3.2”項下各標準品水溶液20μL引入液相色譜中，測量峰總面積積分值。以峰總面積（Y）為縱軸，標準品的進(jìn)樣量（X）為橫坐標軸，制作標曲，得線(xiàn)性回歸方程與相關(guān)系數r各自為：Y=8×109X-192 794,r=0.999 9;Y=6×109X-99 356,r=1；說(shuō)明染料木素在0.076～2.28μg，芒柄花素在0.047 6～1.42μg時(shí)，峰總面積與進(jìn)樣量呈優(yōu)良的線(xiàn)性相關(guān)。

2.3.5 精度試驗

高精密汲取標準品水溶液20μL，按“2.3.1”項下色譜儀標準反復氣相6次，結果染料木素、芒柄花素的RSD各自為1.15%、0.95%，說(shuō)明儀器設備精度優(yōu)良。