目地：創(chuàng )建HPLC法一起測量引陽(yáng)索中五味子醇甲、五味子乙素的成分。方式：選用AgilentExtendC18(250mm×4.6mm，5μm)離子交換柱；以工業(yè)甲醇-乙腈-0.1%硫酸銨水溶液為流動(dòng)性相，流動(dòng)速度為1.1mL·min^-1；梯度方向過(guò)柱；氣相量為10μL；檢驗光波長(cháng)為250nm；柱溫為32℃。結果：五味子醇甲、五味子乙素的線(xiàn)形范疇各自為7.013～175.3mg·L^-1(r=0.9998，n=7)和7.040-176.0mg·L^-1(r=0.9998，n=7)；獲取利用率：五味子醇甲96.05%(RSD=0.7%，n=6)，五味子乙素96.48%(RSD=0.9%，n=6)。結果：此方法實(shí)際操作專(zhuān)屬性強、迅速、簡(jiǎn)單、結果精確，可用以引陽(yáng)索的質(zhì)量管理。
引陽(yáng)索載于于《中華人民共和國衛生部藥品標準》中藥材成方中藥制劑第三冊，由霪羊霍中藥浸膏與五味子中藥浸膏按2∶1混和做成片劑，具備壯陽(yáng)補腎，生津止渴作用，用以陽(yáng)萎早泄，腰酸腿軟，津虧自汗，頭暈眼花等癥。執行標準中缺乏對藥方中五味子中藥浸膏質(zhì)量管理的方式 ，譚文明行為和孟淑智依次報導了引陽(yáng)索中五味子中藥浸膏指標值成份五味子甲素和五味子醇甲的TLC識別方法，現階段暫未有引陽(yáng)索中五味子中藥浸膏指標值成份五味子醇甲和五味子乙素成分檢測的報導，文中構建了與此同時(shí)測量引陽(yáng)索中五味子醇甲和五味子乙素的成分方式，本科學(xué)研究專(zhuān)屬性強，可用以引陽(yáng)索中五味子中藥浸膏的質(zhì)量管理。

1儀器設備

Waters2695高效率液相色譜(包含工作平臺、自動(dòng)進(jìn)樣、柱溫箱、2998型二極管列陣探測器英國Waters企業(yè))，XPE205電子分析天平(METTLERTOLEDO企業(yè))，超聲波清洗機(HT300輸出功率：40KHZ濟寧市盛通超聲電子機器設備)，超純水機(Milli-QAdvantageA10默克密理博企業(yè))。

2原材料

五味子醇甲標準品(生產(chǎn)批號110857-201010成分99.4%)、五味子甲素標準品(生產(chǎn)批號110764-201010成分99.6%)、五味子乙素標準品(生產(chǎn)批號110765-200710)均購自中國藥品生物制藥檢定所，引陽(yáng)索藥物3批(生產(chǎn)批號：20170704，20180604，20191103，市面上)，霪羊霍(生產(chǎn)批號：1910001，安國市聚藥堂醫藥有限責任公司)，超純水系統(自做)，別的實(shí)驗試劑(色譜純，市面上)。

3方式和結果

3.1色譜儀標準與系統軟件適用范圍實(shí)驗

離子交換柱：AgilentExtendC18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流動(dòng)性相：工業(yè)甲醇(A)-乙腈(B)-0.1%硫酸銨水溶液(C)，梯度方向過(guò)柱：0～24min為35%～55%A，30%～30%B；24～27min為55%～35%A，30%～30%B；27～30min為35%～35%A，30%～30%B；檢驗光波長(cháng)：250nm；流動(dòng)速度：1.1mL·min^-1；進(jìn)樣量：10μL；柱溫：32℃。五味子醇甲、五味子乙素與鄰近色譜儀峰的分離度均超過(guò)1.5，基礎理論板數均不少于5000。

3.2水溶液的制取

3.2.1對比貯備液

取P2O5干躁13h的五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素標準品，各自高精密稱(chēng)量14.11mg、16.62mg、14.08mg置20mL量瓶中，加工業(yè)甲醇適當，超聲波使融解，用工業(yè)甲醇稀釋液至標尺，做為標準品貯備液(五味子醇甲701.3mg·L^-1，五味子甲素827.7mg·L^-1，五味子乙素704.0mg·L^-1)。各自高精密量取1mL，置同一10mL量瓶中，用工業(yè)甲醇稀釋液至標尺，得混和標準品水溶液。

3.2.2供試品水溶液

取供樣品5袋，高精密秤重，研細，高精密稱(chēng)量5g(等同于1袋)，置100mL具塞錐形瓶中，加摩爾分數75%甲醇溶液50mL，密塞，秤重，超聲波獲取30min；置放至室內溫度，稱(chēng)取凈重，用以上甲醇溶液補充減失凈重，用0.45μm微孔濾膜過(guò)慮，預留。

3.2.3陰性對照水溶液
按引陽(yáng)索藥方，不用五味子中藥浸膏，按“3.2.2”條方式制取陰性對照水溶液。按“3.1”條色譜儀標準氣相，紀錄色譜見(jiàn)圖1。

3.3線(xiàn)性相關(guān)調查

先后高精密量取五味子醇甲、五味子乙素標準品貯備液各0.1、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL，各自置10mL量瓶中，用工業(yè)甲醇稀釋液至標尺，混勻，得不一樣濃度值系列產(chǎn)品混和對比水溶液。按“3.1”條色譜儀標準，氣相10μL，以峰總面積(Y)對濃度值X(mg·L^-1)開(kāi)展多元回歸分析，得：五味子醇甲線(xiàn)性回歸方程Y=2.062×104X-7.829×104(r=0.9998，n=7)，在7.013～175.3mg·L-1內，五味子醇甲線(xiàn)形優(yōu)良；五味子乙素線(xiàn)性回歸方程Y=1.543×104X-6.039×104(r=0.9998，n=7)，在7.040～176.0mg·L-1內，五味子乙素線(xiàn)形優(yōu)良。

3.4精度實(shí)驗

取五味子醇甲、五味子乙素混和標準品貯備液，用0.45μm微孔濾膜濾過(guò)，按“3.1”條色譜儀標準，持續氣相5次，每一次10μL，測得五味子醇甲峰總面積各自為1386130、1413230、1416601、1409903、1398858，RSD為0.9%(n=5)；五味子乙素峰總面積各自為1039735、1068231、1064348、1059376、1053065，RSD為1.1%(n=5)，結果顯示儀器設備有優(yōu)良的精度。

3.5可靠性實(shí)驗

取引陽(yáng)索顆粒物適當，按“3.2.2”條方式制取供試水溶液，先后在0、2、6、10、18、24、48h，反復氣相，每一次10μL，測得五味子醇甲峰總面積各自為1439032、1428035、1419366、1418367、1421035、1416534、1403982，RSD為0.8%(n=7)；五味子乙素峰總面積各自為505762、504927、506354、498756、492769、503262、491965，RSD為1.2%(n=7)，結果顯示試品在48h內平穩。

3.6可重復性實(shí)驗

各自高精密稱(chēng)量同一批引陽(yáng)索(生產(chǎn)批號20180604)5份，按“3.2.2”條方式制取供試水溶液，精確測量五味子醇甲成分各自為3.63、3.68、3.67、3.69、3.64mg/袋，RSD為0.7%(n=5)，五味子乙素成分各自為1.82、1.81、1.79、1.83、1.84mg/袋，RSD為1.0%(n=5)，結果顯示方式可重復性?xún)?yōu)良。

3.7利用率實(shí)驗

各自高精密稱(chēng)量已經(jīng)知道成分的引陽(yáng)索(生產(chǎn)批號20180604)約2.5g，6份，各自置100mL錐形瓶中，各自高精密添加對比水溶液：五味子醇甲對比水溶液(0.9165mg·mL^-1)、五味子乙素(0.9118mg·mL^-1)、各2.0、1.0mL，按“3.2.2”條方式制取供試水溶液，氣相10μL，結果測得五味子醇甲、五味子乙素均值利用率各自為96.05%(RSD=0.7%，n=6)、96.48%(RSD=0.9%，n=6)，結果見(jiàn)表1。

3.8試品的含量測量
取引陽(yáng)索10袋，按“3.2.2”條方式制取供試水溶液，平行面3份。按“3.2.1”條方式制取標準品水溶液，按“3.1”條色譜儀標準，氣相10μL，用外標法測量3批引陽(yáng)索試品中五味子醇甲和五味子乙素的成分，結果見(jiàn)表2。

4探討

4.1測量光波長(cháng)的挑選

宣東公平報導了五味子醇甲和五味子乙素與此同時(shí)監測的光波長(cháng)為254nm，《中國藥典》2015版五味子成分檢測項下測量五味子醇甲的光波長(cháng)為250nm，綜合性考慮到被測化學(xué)物質(zhì)較大消化吸收光波長(cháng)、消化吸收抗壓強度，最后選中250nm做為檢驗光波長(cháng)。

4.2流動(dòng)性相的挑選

流動(dòng)性相較為了工業(yè)甲醇-0.1%硫酸銨水溶液(35：65)、乙腈-0.1%硫酸銨水溶液(30：70)，發(fā)覺(jué)被測成份能夠 做到基準線(xiàn)分離出來(lái)，但五味子乙素保存期超出60min，與楊志向等科學(xué)研究結果同樣，最后挑選工業(yè)甲醇-乙腈-0.1%硫酸銨水溶液三元系統軟件為流動(dòng)性相，梯度方向過(guò)柱，流動(dòng)性相根據引進(jìn)乙腈減少被測化學(xué)物質(zhì)保存期，線(xiàn)形調節工業(yè)甲醇和0.1%硫酸銨水溶液占比使3種木脂素與其它化學(xué)物質(zhì)合理分離出來(lái)，結果試品中五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素分離出來(lái)效果非常的好，沒(méi)有雜質(zhì)影響，且出峰快，保存期各自為五味子醇甲5.18min、五味子甲素16.88min、五味子乙素20.35min。

4.3成分測量指標值挑選

任偉光等報導了五味子醇甲、甲素、乙素是五味子中關(guān)鍵木脂素類(lèi)物質(zhì)，有保護肝臟、神經(jīng)中樞抑止、降血糖、抗感染等藥用價(jià)值。馬瑩慧等報導了五味子醇甲、醇乙、酯甲、甲素、乙素為指標值的成分統計分析方法，李寶等報導了五味子中藥浸膏中五味子醇甲、甲素、乙素的含水量測定法，本研究發(fā)現引陽(yáng)索試品色譜中五味子甲素色譜儀紛紛總面積較小，因而本篇文章僅挑選了五味子醇甲和五味子乙素兩個(gè)指標值開(kāi)展成分測量。五味子甲素色譜儀峰可做為特點(diǎn)峰之一，用以引陽(yáng)索中五味子中藥浸膏的判定辨別。