2、線(xiàn)形與精度調查

（1）標曲水溶液制取

GC：高精密量取標準品貯備液0.5、1.0、2.0、4.0、5.0mL各自放置10mL量瓶中，用工業(yè)乙醇滴定劑，得標曲水溶液，按離子交換柱：AgilentZORBAXEclipseXDB-C18(4.6x250mm，5μm)，流動(dòng)性相為工業(yè)甲醇(A)-20mmo/L乙酸銨水溶液(B)，梯度方向過(guò)柱(0～8min，10%A；8.1～20min，30%A；20.1～30min，10%A)，流動(dòng)速度為1.0mL/min，氣相量為10uL，柱溫為35℃，檢驗光波長(cháng)為210nm。HPLC：高精密量取標準品貯備液0.04、0.4、1.0、1.5、2.0mL各自放置10mL量瓶中，用50%甲醇溶液滴定劑，得標曲水溶液。

GC-MS：高精密量取標準品貯備液1mL置10mL量瓶中，加工業(yè)乙醇做成濃度值為100μg/mL的標準品應用液，再高精密量取0、0.4、0.2、0.5、1.0、2.0mL各自放置10mL量瓶中，用工業(yè)乙醇滴定劑，得標曲水溶液，按色譜儀標準:離子交換柱為J&WDB-624UI(60mx0.25mmx1.4μm)，提溫程序流程為原始溫度60℃，維持1min，以50℃/min提溫至150℃，維持2min，再用10℃/min提溫至250℃，維持26min；載氣為氮氣，原始總流量1mL/min，維持20min，以2mL/min升到2mL/min，維持20min，氣相口溫度250℃，分離比10:1，進(jìn)樣量1μL。

（2）測量結果

各自以峰總面積為縱軸，濃度值為橫坐標軸，得線(xiàn)形線(xiàn)性回歸方程和相關(guān)系數r，測量結果如表1所顯示。結果顯示，三種辦法的相關(guān)系數r均做到＞0.999，且精度RSD均＜2%，說(shuō)明線(xiàn)形和精度優(yōu)良。

3、方法檢出限和定量限

高精密量取各標準品水溶液，以頻率穩定度S/N=3和S/N=10為根據各自做成方法檢出限水溶液和定量限水溶液，GC、HPLC、GC-MS三種辦法的方法檢出限各自5mgkg、10mg/kg和2mg/kg；定量限各自為17mg/kg、33mg/kg和6.7mg/kg。由此可見(jiàn)，GC-MS的方法檢出限最少，敏感度相對性較高，HPLC的方法檢出限相對性較高，敏感度相對性較低。

4、利用率調查

取己知成分的某原漿、油類(lèi)0.5g各9份，依據曲線(xiàn)圖范疇，按低、中、濃度較高的各自高精密添加分別的標準品貯備液(GC添加1、3、5mL，HPLC添加1、2、3mL，GC-MS添加0.1、0.3、0.5mL)，每一個(gè)濃度值3份，按分別的水溶液制取方式制取利用率水溶液，三種辦法的利用率測量結果如表2所顯示。結果顯示，三種辦法的利用率均在90%～100%中間，方式的精確性?xún)?yōu)良。

5、可靠性調查

取三種方式配制的標曲圓心濃度值水溶液和利用率調查的試品水溶液，在常溫情況下，各自于0、0.5、1、2、4、8、16、24h時(shí)在不同的色譜儀標準下測量，測算各時(shí)間點(diǎn)苯甲醇峰總面積的RSD%。GC為1.1%、1.3%，HPLC為0.8%、0.9%，GC-MS為1.4%、1.3%，均低于2%，說(shuō)明三種方式在常溫下有著(zhù)優(yōu)良的可靠性，能達到平時(shí)檢測的要求。

6、試品前解決辦法的調查

根據GB5009.28-201方式，取含蛋白的試品1.0g，添加適量的苯甲醇國家標準物質(zhì)，再添加92g/L亞鐵氰化鉀和183g/L乙酸鋅水溶液各0.5mL后，高精密稱(chēng)量苯甲醇標準品25mg放置10mL量瓶中，加50%甲醇溶液稀釋液并滴定劑，得標準品貯備液。取試品攪拌，高精密稱(chēng)量1.0g放置25mL量瓶中，加適當50%甲醇溶液超聲波獲取10min，制冷至常溫后滴定劑，0.22μm濾紙濾過(guò)，得試品水溶液高效液相色譜色譜法項下制取試品水溶液并測量成分，并與未添加蛋白混凝劑的加標試品水溶液測量結果開(kāi)展較為。結果顯示，蛋白混凝劑對苯甲醇的測量無(wú)危害。

根據GB5009.139-2014方式，取含苯甲醇的試品1.0g，放置25mL量瓶中，加適當50%甲醇溶液超聲波獲取10min后滴定劑至標尺，再添加0.5g輕質(zhì)氧化鎂攪拌，0.22μm濾紙濾過(guò)后按離子交換柱：AgilentZORBAXEclipseXDB-C18(4.6x250mm，5μm)，流動(dòng)性相為工業(yè)甲醇(A)-20mmo/L乙酸銨水溶液(B)，梯度方向過(guò)柱(0～8min，10%A；8.1～20min，30%A；20.1～30min，10%A)，流動(dòng)速度為1.0mL/min，氣相量為10uL，柱溫為35℃，檢驗光波長(cháng)為210nm色譜儀標準測量成分，并與未添加氧化鎂的試品測量結果開(kāi)展較為。結果顯示，輕質(zhì)氧化鎂對苯甲醇的測量無(wú)危害。

根據GB5009.140-2003方式，取含苯甲醇的試品1.0mL，放置中性化三氧化二鋁(100～200目)柱中，用50%甲醇溶液過(guò)柱至25mL容量瓶中，0.22μm濾紙濾過(guò)后測量成分，并與未過(guò)中性化三氧化二鋁柱的試品測量結果開(kāi)展較為。結果顯示，中性化三氧化二鋁柱對苯甲醇的測量無(wú)危害。

7、試品的測量

搜集市面上的40批液態(tài)型保健品，高精密稱(chēng)量苯甲醇標準品50mg放置50mL量瓶中，加工業(yè)乙醇稀釋液并滴定劑，得標準品貯備液。取試品攪拌，高精密稱(chēng)量1.0g，放置10mL量瓶中，加工業(yè)乙醇融解并超聲波獲取10min，制冷至常溫后滴定劑，0.22μm濾紙濾過(guò)，得試品水溶液。高精密稱(chēng)量苯甲醇標準品25mg放置10mL量瓶中，加50%甲醇溶液稀釋液并滴定劑，得標準品貯備液。取試品攪拌，高精密稱(chēng)量1.0g放置25mL量瓶中，加適當50%甲醇溶液超聲波獲取10min，制冷至常溫后滴定劑，0.22μm濾紙濾過(guò)，得試品水溶液。標準品貯備液同氣相色譜分析項下貯備液。取試品攪拌，高精密稱(chēng)量1.0g，放置10mL量瓶中，加工業(yè)乙醇融解并超聲波獲取10min后滴定劑，0.22μm濾紙濾過(guò)，高精密量取續滲瀝液0.1mL放置10mL量瓶中，加工業(yè)乙醇滴定劑，得試品水溶液。

在離子交換柱:J&WDB-WAX(60mx0.25mmx0.25μm)，提溫程序流程為原始溫度150℃，10℃/min升至180℃，維持3min，20℃/min升至230℃，維持5min；載氣為N2，恒流電源速率1.0mL/min，分離比10:1，探測器溫度250℃，氣相口溫度240℃，進(jìn)樣量1μL。離子交換柱:AgilentZORBAXEclipseXDB-C18(4.6x250mm，5μm)，流動(dòng)性相為工業(yè)甲醇(A)-20mmo/L乙酸銨水溶液(B)，梯度方向過(guò)柱(0～8min，10%A；8.1～20min，30%A；20.1～30min，10%A)，流動(dòng)速度為1.0mL/min，氣相量為10uL，柱溫為35C，檢驗光波長(cháng)為210nm。色譜儀標準:離子交換柱為J&WDB–624UI(60mx0.25mmx1.4μm)，提溫程序流程為原始溫度60℃，維持1min，以50℃/min提溫至150℃，維持2min，再用10℃/min提溫至250℃，維持26min；載氣為氮氣，原始總流量1mL/min，維持20min，以2mL/min升到2mL/min，維持20min，氣相口溫度250℃，分離比10:1，進(jìn)樣量1μL標準下測量，依據苯甲醇標曲范疇調節試品的稀釋液容積，結果顯示，有7批試品驗出含苯甲醇，三種辦法的檢測結果一致(見(jiàn)表3)，相對性相對標準偏差均低于5%。

7、三種方式較為

GC是測量揮發(fā)物或半揮發(fā)物成份的優(yōu)選方式，其敏感度好，進(jìn)樣量小，檢驗高效率較高，檢驗低成本，可是僅選用保存期判定，當試品中有殘渣影響時(shí)，必須調節提溫程序代碼最好分離出來(lái)實(shí)際效果。

HPLC是試驗室最廣泛應用的檢驗方式，在測量苯甲醇成分時(shí)，能夠依據光譜圖開(kāi)展判定判斷，但因為苯甲醇的最高消化吸收光波長(cháng)在210nm周邊，屬尾端消化吸收，沒(méi)有顯著(zhù)的消化吸收特點(diǎn)，當有殘渣影響時(shí)，很有可能會(huì )危害判斷的精確性。但從文中的檢測結果看，本方式與測量光波長(cháng)相仿的10-甲基癸烯酸等作用性指標值的分離度很高，受殘渣影響較少。

GC-MS對比前兩類(lèi)方式 ，其敏感度最大，依據質(zhì)譜圖判定判斷，并可精確定量分析，但儀器設備應用和維護保養費用較高，強烈推薦做為GC和HPLC的輔助判斷方式。

三、結果

文中創(chuàng )建的三種苯甲醇測定法實(shí)際操作簡(jiǎn)易，精確性高，可靠性好，試驗室可依據標準選用合適的檢測方式。三種方式對比，強烈推薦應用HPLC法完成測量，GC-MS法輔助判斷，也可立即選用GC-MS法，提升檢測高效率。

《保健食品備案產(chǎn)品可用輔料及其使用規定(2019年版)》中要求的苯甲醛以及醋酸鹽在液態(tài)中藥制劑中的最高用量為1g/kg；在GB/T2731-2017《日用香精》1161中要求，芐醇(即苯甲醇)在第一類(lèi)加香商品(唇用商品、小玩具)中，最大限定為0.2%(即2g/kg)；依據JECFA明確提出的芐基化學(xué)物質(zhì)的總應用限制值規定0～5mgkg休重(以苯甲醛劑量計)，以成人休重60kg測算，苯甲醛類(lèi)ADI為0～300mg/d這好多個(gè)規范均可做為制訂食品類(lèi)或保健品中苯甲醇限定的參照根據。