2.4.4 線(xiàn)性相關(guān)調查

用70%工業(yè)甲醇對儲備液開(kāi)展逐步稀釋液，獲得2.024、20.240、50.600、101.200、151.800μg/m L的系列產(chǎn)品標準品水溶液，各自高精密汲取水溶液各10μL，引入色譜分析儀開(kāi)展測量，以標準品的氣相濃度值為橫坐標軸（X），峰總面積為縱軸（Y），開(kāi)展回歸分析，得規范曲線(xiàn)方程為Y=35.919 X-4.386 4,r=1.000 0，結果顯示，MMQ在2.024～151.800μg/m L線(xiàn)性相關(guān)優(yōu)良。

2.4.5 定量限和檢出限

取標準品儲備水溶液，逐漸稀釋液，按“2.4.1”項下色譜儀標準氣相，氣相量為10μL，頻率穩定度（S/N）為10∶1，測出MMQ的定量限約為2.024μg/m L。頻率穩定度（S/N）為3∶1時(shí)，MMQ的檢出限約為0.607μg/m L。

2.4.6 精度實(shí)驗

選擇高、中、低（101.200、50.600、20.240μg/m L)3個(gè)濃度值的標準品水溶液，按“2.4.1”項下色譜儀標準相同1 d內持續氣相6次，測出MMQ峰總面積的RSD各自為0.73%、0.95%、1.37%。持續測量3 d，每日氣相1次，紀錄MMQ峰總面積，測出MMQ峰總面積的RSD各自為2.06%、1.61%、1.88%。數據顯示日內、日間精度均低于3%。說(shuō)明日內、日間精度優(yōu)良，儀器設備平穩。

2.4.7 可重復性實(shí)驗

取試品粉末狀0.25 g(S5），按“2.4.2”項下方式 制取供試品水溶液，平行面6份，按“2.4.1”項下色譜儀標準氣相，氣相量為10μL，紀錄MMQ的峰總面積。選用外標一點(diǎn)法測算MMQ的成分，試品中MMQ的物質(zhì)的量為5.28 mg/g,RSD為1.37%，說(shuō)明此方式 可重復性好。

2.4.8 可靠性實(shí)驗

取試品粉末狀0.25 g(S5），按“2.4.2”項下方式 制取供試品水溶液，按“2.4.1”項下色譜儀標準各自于0、1、2、4、8、12、24 h氣相，氣相量為10μL，數據顯示MMQ峰總面積的RSD為1.81%，說(shuō)明供試品水溶液在24 h內平穩。

2.4.9 加樣利用率實(shí)驗

高精密稱(chēng)量已經(jīng)知道成分的EGT粉末狀0.125 g(S5）高精密稱(chēng)取，按已檢測的50%、100%、150%高精密添加標準品水溶液，按“2.4.2”項下方式 制取供試品水溶液，按“2.4.1”項下色譜儀標準氣相，紀錄峰總面積，選用外標一點(diǎn)法測算加樣利用率。結果MMQ的均值加樣利用率為101.5%,RSD為1.46%。

2.4.1 0 定量分析測量

取7批EGT試品，按“2.4.2”項下方式 制取供試品水溶液，按“2.4.1”項下色譜儀標準氣相，經(jīng)HPLC測量后，數據顯示7批EGT(S8、S9因數據采集時(shí)間較長(cháng)時(shí)間，未測量）的質(zhì)量濃度范疇在0.13%～0.53%，見(jiàn)表1。

3 探討

3.1 指標值成份的挑選

EGT為蒙古習用中藥材，現階段無(wú)相應的質(zhì)量控制規范及其專(zhuān)屬性成份的科學(xué)研究，本分析根據MCI色譜儀、硅橡膠色譜儀、高效率液相色譜儀等分離出來(lái)方式，獲得專(zhuān)屬性成份，經(jīng)核磁共振評定為一種喹啉大環(huán)內酯黃酮（MMQ）。本試驗將EGT與其他4種近源試品：大藍刺頭、硬葉藍刺頭、全緣藍刺頭和藍刺頭，開(kāi)展薄層色譜和HPLC檢驗較為，數據顯示大藍刺頭、硬葉藍刺頭、全緣藍刺頭不帶有MMQ，在藍刺頭試品中雖帶有小量MMQ，但遠小于其檢測站。因而MMQ做為砂藍刺頭中成分較高且專(zhuān)屬性極強的成份，創(chuàng )建因其為指標值成份判定定量分析方式 ，有一定的合理性與應用性，能夠能夠更好地點(diǎn)評EGT中藥材的品質(zhì)。

3.2 薄層色譜辨別

在層析辨別展開(kāi)劑的調查中，發(fā)覺(jué)酸針對層析進(jìn)行管理體系的干擾比較大，非酸管理體系下，色斑較少、分離度較弱。挑選了多種多樣鉻黑T，包含磷鉬酸、碘化鉍鉀、碘、10%鹽酸酒精等，著(zhù)色實(shí)際效果均不佳，不著(zhù)色或是著(zhù)色失靈，最后列入以三氯甲烷-醋酸乙酯-工業(yè)甲醇-苯甲酸（6∶1∶1∶0.8）為展開(kāi)劑，254 nm紫外線(xiàn)殺菌燈下檢查瑩光色斑就可以。較為了不一樣生產(chǎn)廠(chǎng)家的層析板：銀龍-HSGF254板、江海-HSGF254板、法國MNSGF板和法國MNHSGF板，所確立的層析方式 在以上幾類(lèi)板中均能得到 有效的進(jìn)行實(shí)際效果，在其中以法國MNHSGF板分離出來(lái)實(shí)際效果最好是。

3.3 指紋圖譜創(chuàng )建

中藥材色譜儀指紋圖譜可以比較全方位地體現中藥材的總體品質(zhì)。本研究創(chuàng )建指紋圖譜統計分析方法能非常好地將EGT與同為別的綠色植物相差別。相似性剖析點(diǎn)評中，S9（生產(chǎn)批號20120815）相似性?xún)H為0.679，別的EGT試品相似性均高過(guò)0.9，這提醒EGT試品陳置過(guò)久也許會(huì )干擾其中藥材品質(zhì)。這一發(fā)覺(jué)為中藥批發(fā)市場(chǎng)中EGT中藥材期限操縱給出的數據參照。不一樣來(lái)源的9批試品指紋圖譜中的一共有峰在數量及其相對性保存期上保持一致，但各一共有峰相對性峰總面積有一定的差別，表明各批號中藥材中間的品質(zhì)存有差別，推斷有可能與藥材產(chǎn)地、生長(cháng)發(fā)育期限、收獲期等原因相關(guān)。將EGT和別的種藍刺頭的指紋識別數據信息開(kāi)展數據分析，主成分分析法和聚類(lèi)結果一致，均能完成EGT與同為別的綠色植物（藍刺頭、全緣葉藍刺、硬葉藍刺頭和大藍刺頭）的差別。在PCA中，16批試品聚為2類(lèi)別，S1～S9號試品為不一樣批號EGT,S10～16號試品為藍刺頭屬別的種試品，在其中S8和S9號試品為2012年搜集的試品，雖經(jīng)置放很多年，成份有一定的降低，但仍歸到EGT中。在聚類(lèi)中，S8和S9號試品處在同一組中；S14和S15號試品為全緣藍刺頭也在同一組中，該結論與OPLS-DA結果一致。

3.4 成分測量

在創(chuàng )建MMQ的定性分析方式 試驗中，開(kāi)展了獲取方式 （超聲波、加溫流回）、獲取有機溶劑（純工業(yè)甲醇、70%工業(yè)甲醇、50%工業(yè)甲醇）、獲取時(shí)間和獲取頻次的調查。最后確認的獲取便捷使用簡(jiǎn)易、省時(shí)，對砂藍刺頭中MMQ獲取率高。調查了乙腈-水、乙腈-冰醋酸銨緩存鹽溶液、工業(yè)甲醇-0.1%苯甲酸溶液、乙腈-0.1%苯甲酸溶液等流動(dòng)性相管理體系對液相色譜儀分離出來(lái)實(shí)際效果的危害。最后確認的含測方式 可重復性好，MMQ的分離度和成分測量RSD均合乎檢驗規定。此外，因為S8和S9中藥材收集時(shí)間太久，為了更好地不危害成分程度制訂的精確性，未對這2批中藥材開(kāi)展成分測量。