2.3 流動(dòng)相比例和梯度洗脫

實(shí)驗考查了流動(dòng)相比例和梯度洗脫對五種添加劑分離效果的影響。實(shí)驗選取了四種流動(dòng)相方式，分別是甲醇 – 乙酸銨溶液比例為：（1）15∶85（ 圖 6）；（2）10∶90（ 圖 7）；（3）5∶95（ 圖 9、10）；（4）梯度洗脫：0 ～ 3min：20∶80；3 ～5min ：50∶50 ；5 ～ 15min ：80∶20 ；15 ～20min：5∶95（圖 8）

實(shí)驗結果表明：在流動(dòng)相甲醇 – 乙酸銨比例為 15∶85 和 10∶90時(shí)，五種添加劑組分出峰只有四個(gè)（見(jiàn)圖 6 ～ 7），糖精鈉和脫氫乙酸峰混在一起無(wú)法分離；選擇梯度洗脫體系時(shí)五種添加劑可以完全出峰，但是苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸的保留時(shí)間間隔太短，不能完全分離開(kāi)來(lái)（圖8）；而在選擇流動(dòng)相甲醇 – 乙酸銨比例為 5∶95時(shí)，五種添加劑組分可以完全完整的分開(kāi)（見(jiàn)圖9 ～ 10）

2.4 流動(dòng)相流速的選擇

流動(dòng)相的流速主要影響溶質(zhì)與固定相和流動(dòng)相的相互作用，從而改變待測組分的保留時(shí)間及各組分之間的分離度。流速過(guò)快，可能導致色譜柱壓升高，系統壓力過(guò)高導致漏液；流速過(guò)慢則會(huì )延長(cháng)待測物的保留時(shí)間，引起色譜峰拖尾，所以在實(shí)驗過(guò)程中要選擇合適的流速。實(shí)驗結果表明：當流動(dòng)相流速為 1.0mL/min 時(shí)，五種添加劑雖然出峰良好，但山梨酸和糖精鈉的保留時(shí)間比較接近，可能導致積分誤差；而當流速為 0.9mL/min時(shí)，五種添加劑可以完全分離，各組分出峰效果較好，出峰順序分別為：安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、脫氫乙酸（見(jiàn)圖 9 ～ 10）；綜上所述，實(shí)驗選擇檢測波長(cháng)為 230nm，流動(dòng)相體系為甲醇 – 乙酸銨，流動(dòng)相比例為 5∶95，流速為 0.9mL/min，進(jìn)行下一步實(shí)驗。

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