氣相色譜法廣泛應用于食品中脂肪酸、農藥殘留、毒害物質(zhì)、香精香料、食品添加劑、食品包裝材料中的揮發(fā)物等成分的分析中。

一、食品中脂肪酸含量的測定

(一)分析原理

樣品中脂肪酸一般以甘油三酯形式存在，經(jīng)氫氧化鉀甲醇液甲酯化，生成相應的脂肪酸甲酯，經(jīng)氣相色譜分離并定量測定。

(二)儀器與試劑

(1)儀器：Sigma 300氣相色譜儀，LCI-100積分儀，SQF-200B型氫氣發(fā)生器。

(2)試劑：AOCS混合油對照品RM₃SuPelcs 50mg、RM₆SuPelcs 50mg(MATREYA公司提供)；棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸、亞麻酸均為氣相色譜標準；乙醚、正己烷、甲醇、氫氧化鉀均為分析純。

(三)測定方法

(1)色譜條件：色譜柱：2.1m×2mm不銹鋼柱，填充15％CP-SIL 84白色高效擔體100-120目。載氣：N₂?？諝猓?0kPa。氫氣：20kPa。檢測器：FID。進(jìn)樣口溫度：240^°C。檢測器溫度：220^°C。程序升溫：175℃、180^°C、210^°C保持時(shí)間分別為7.0min、8.0min、5.0min。升溫速度：30^°C/min。

(2)回歸曲線(xiàn)制作：精密吸取AOCS混合油對照品RM₃ SuPelcs、RM₆ SuPelcs，用乙醚-正己烷(2:1)溶解并稀釋至適當濃度，定體積進(jìn)樣，制作標準曲線(xiàn)。

(3)樣品制備：取油樣100mg(其他樣品稱(chēng)樣適當增加)，置10mL容量瓶中，加入乙醚-正己烷(2:1)lmL、甲醇1mL及0.8mol/L氫氧化鉀甲醇溶液1mL，搖勻，靜置5min，加水至刻度，取上層液進(jìn)樣。

(四)結果計算

以保留時(shí)間定性鑒定各種脂肪酸，以峰面積查標準曲線(xiàn)并計算出各種脂肪酸的含量，以上數據由積分儀或計算機處理。

二、食品中有機氯農藥殘留量的測定

(一)分析原理

樣品中的有機氯農藥經(jīng)提取、凈化與濃縮后，進(jìn)樣汽化并由氮氣載入色譜柱中進(jìn)行分離，再進(jìn)入對電負性強的組分具有較高檢測靈敏度的電子捕獲檢測器中檢出，與標準有機氯農藥比較定量。

(二)儀器及試劑

(1)儀器

色譜條件：檢測器為氖源電子捕獲檢測器。色譜柱：玻璃柱，長(cháng)2m，內徑3～4mm，內涂以1.5％OV-17和2％QF-1混合固定液的80—100目白色硅藻土擔體(或Chromosorb W)。溫度：進(jìn)樣器190⁰C，柱溫160℃，檢測器165℃。載氣流速：60mL/min。

(2)試劑

六六六、滴滴涕標準溶液：準確稱(chēng)取α-666、β-666、γ-666、δ-666、p，p’-DDT；|p，p’-DDD、p，p’-DDE、0，p’-DDT各10.0mg，溶于苯，分別移入100mL容量瓶中，加苯至刻度，混勻，每1mL含農藥100.0μg，作為儲備液存于冰箱中。將上述標準儲備液以己烷稀釋至O.01μg／mL作為六六六、滴滴涕標準溶液。

(三)測定方法

1、提取

(1)糧食：稱(chēng)取20g粉碎并通過(guò)20目篩的樣品，置于250mL具塞錐形瓶中，加100mL石油醚，于電動(dòng)振蕩器上振蕩30min，濾入150mL分液漏斗中，以20—30mL石油醚分數次洗滌殘渣，洗液并入分液漏斗中，以石油醚稀釋至100mL。

(2)蔬菜、水果：稱(chēng)取200g樣品置于搗碎機中搗碎1～2min(若樣品含水分少，可加一定量的水)，稱(chēng)取相當于原樣50g的勻漿，加100mL丙酮，振蕩1min，浸泡lh，過(guò)濾。殘渣用丙酮洗滌三次，每次10mL，洗液并入濾液中，置于500mL分液漏斗中，加80mL石油醚，振搖1min，加200mL2％硫酸鈉溶液，振搖1min，靜置分層，棄去下層，將上層石油醚經(jīng)盛有15g無(wú)水硫酸鈉的漏斗，濾入另一分液漏斗中，再以石油醚少量數次洗滌漏斗及其內容物，洗液并入濾液中，并以石油醚稀釋至100mL。

(3)乳與乳制品：稱(chēng)取100g鮮乳(乳制品取樣量按鮮乳折算)，移入500mL分液漏斗中，加100mL乙醇，1g草酸鉀劇烈振搖1min，加100mL乙醚，搖勻，加100mL石油醚，劇烈振搖2min，靜置10min，棄去下層。將有機溶劑層經(jīng)盛有20g無(wú)水硫酸鈉的漏斗，小心緩慢地濾入250mL錐形瓶中，再用石油醚少量多次洗滌漏斗及其內容物，洗液并入濾液中。以脂肪提取器或K-D濃縮器蒸除有機溶劑，殘渣為黃色透明油狀物。再以石油醚溶解，移入150mL分液漏斗中，以石油醚稀釋至100mL。

(4)各種肉類(lèi)及其他動(dòng)物組織：稱(chēng)取絞碎均勻的20g樣品置于乳缽中，加約80g無(wú)水硫酸鈉研磨，無(wú)水硫酸鈉用量以樣品研磨后呈干粉狀為度，將研磨后的樣品和硫酸鈉一并移入250mL具塞錐形瓶中，加100mL石油醚，于電動(dòng)振蕩器上振蕩30min，抽濾，殘渣用約100mL石油醚分數次洗滌，洗液并入濾液中，將全部濾液用脂肪抽提器或K-D濃縮器蒸除石油醚，殘渣為油狀物。以石油醚溶解殘渣，移入150mL分液漏斗中，加石油醚稀釋至100mL。

2、凈化

(1)于100mL樣品石油醚提取液(富含脂肪的動(dòng)、植物樣品除外)中加10mL硫酸，振搖數下后，倒置分液漏斗、打開(kāi)活塞放氣，然后振搖0.5min，靜置分層，棄去下層溶液，上層溶液由分液漏斗上口倒入另一個(gè)250mL分液漏斗中，用少許石油醚洗滌原分液漏斗后，并入250mL分液漏斗中，加100mL2％硫酸鈉溶液，振搖后靜置分層，棄去下層水溶液，用濾紙吸除分液漏斗頸內外的水，然后將石油醚經(jīng)盛有約15g無(wú)水硫酸鈉的漏斗過(guò)濾，并以石油醚洗滌盛有無(wú)水硫酸鈉的漏斗數次，洗液并入濾液中，并以石油醚稀釋至100mL。

(2)于25mL富含脂肪的動(dòng)、植物油樣品的石油醚提取液中加25mL硫酸，振搖數下后，倒置分液漏斗，打開(kāi)活塞放氣，再振搖0.5min，靜置分層，棄去下層溶液，上層溶液由分液漏斗上口倒于另一500mL分液漏斗中，用少許石油醚洗滌原分液漏斗，洗液并入分液漏斗中，加250m12％硫酸鈉溶液，搖勻，靜置分層，以下按(1)自“棄去下層水溶液”起依法操作。

3、濃縮

將分液漏斗中已凈化的石油醚溶液經(jīng)過(guò)盛有15g無(wú)水Na₂SO₄的小漏斗，緩慢濾入K-D濃縮器中，并以少量石油醚洗盛有無(wú)水Na₂S0₄的漏斗3～5次，合并洗液與濾液，然后于水浴上將濾液用K-D濃縮器濃縮至約O.3mL(不要蒸干，否則結果偏低)，停止蒸餾濃縮，用少許石油醚淋洗導管尖端，最后定容至0.5～1.0mL，搖勻，塞緊，供測定用。

4、測定

(1)標準晦線(xiàn)的繪制：吸取BHC與DDT標準混合溶液l，2，3，4，5μL分別進(jìn)樣，根據各農藥組分含量(ng)與其相對應的峰面積(或峰高)，繪制各農藥組分的標準曲線(xiàn)。

(2)樣品測定吸取樣品處理液1.0～5.0μL進(jìn)樣，記錄色譜峰，據其峰面積(或峰高)于六六六與滴滴涕各異構體的標準曲線(xiàn)上查出相應的組分含量(ng)。

(四)定性定量分析

根據標準六六六與滴滴涕的各個(gè)異構體的保留時(shí)問(wèn)進(jìn)行定性。六六六與滴滴涕的各個(gè)異構體出峰順序為：α-BHC，β-BHC，γ-BHC，δ-六六六，p，p’一DDE，o，p’-DDT，p，p’-DDD，p，p’-DDT。

從標準曲線(xiàn)上查出相應含量；計算樣品中BHT、DDT的不同異構體或衍生物的單一含量，最后，將六六六、滴滴涕的不同異構體或衍生物單一含量相加，即得出樣品有機氯農藥六六六、滴滴涕的總量。

參考資料：現代食品檢測技術(shù)

相關(guān)鏈接：氣相色譜儀，六六六，滴滴涕