測定值代入SCFAs標準曲線(xiàn)方程進(jìn)行含量計算。結果顯示，灌胃黑木耳胞外多糖后小鼠糞便中丙酸和丁酸含量顯著(zhù)升高，其中丙酸含量為對照組的3.3倍（P＜0.01），丁酸是對照組的1.4倍（P＜0.05）（圖4）。
 

2.6黑木耳胞外多糖對小鼠腸道GPR43表達的影響

GPR43是一種特異性短鏈脂肪酸受體，它可以通過(guò)介導短鏈脂肪酸，在調控脂類(lèi)代謝和免疫反應等生物學(xué)過(guò)程以及在動(dòng)物腸道對營(yíng)養物質(zhì)的吸收中發(fā)揮重要作用。本試驗對小鼠結腸石蠟切片進(jìn)行GPR43免疫熒光檢測，結果顯示胞外多糖組小鼠結腸GPR43的表達明顯高于對照組。

2.7黑木耳胞外多糖對小鼠血清細胞因子含量的影響

細胞免疫因子參與了炎癥的發(fā)生、維持和消退，在機體免疫中起到重要作用。為了探索黑木耳胞外多糖對小鼠免疫調節作用的影響，利用ELISA試驗分析了小鼠血清中的相關(guān)細胞因子水平。結果如圖6所示，胞外多糖組小鼠血清中白介素-10（IL-10）的含量顯著(zhù)升高，是對照組的1.3倍（P＜0.05），而其對腫瘤壞死因子（ＴNF-α）和白介素-6（IL-6）的水平?jīng)]有明顯影響（P＞0.05）。

3討論

黑木耳中的多種生物活性成分對人體健康具有重要調節作用。本研究利用紅外光譜和高效液相定性分析了黑木耳胞外多糖的組分；通過(guò)小鼠灌胃試驗發(fā)現黑木耳胞外多糖可以提高小鼠腸道內益生菌擬桿菌屬和羅氏菌屬水平，增加丙酸和丁酸含量，提升血清免疫因子IL-10水平。腸道微生物不僅參與人體能量代謝，還與眾多疾病相關(guān)，使其成為當前研究熱點(diǎn)。隨著(zhù)研究的深入，人們更能清楚地認識到維持腸道菌群平衡對人體健康的重要性。近年，抗生素濫用逐漸引起人們的重視，其破壞腸道正常微生物組成，導致腸道菌群失調，致使耐藥性細菌產(chǎn)生和傳播。研究發(fā)現，多糖具有改善機體腸道微生態(tài)的作用，具有益生元作用，是理想的微生態(tài)調節劑。本研究結果表明，黑木耳胞外多糖具有促進(jìn)小鼠腸道內擬桿菌屬和羅氏菌屬菌群增殖的功能。擬桿菌屬能對宿主飲食、宿主腸黏膜層和其它微生物表面的復合多糖進(jìn)行轉運和分解；羅氏菌屬能夠產(chǎn)生短鏈脂肪酸，尤其是丁酸，不僅具有影響結腸代謝、調節免疫和抗炎等作用，還可用作癥狀病理學(xué)（如膽結石形成）生物標志物或恢復有益菌群的益生菌。因此，作為一種微生態(tài)調節劑，黑木耳胞外多糖可以在調控腸道菌群結構方面發(fā)揮作用，具有取代抗生素治療的潛在應用價(jià)值。

腸道微生物菌群產(chǎn)生的SCFAs作為膳食纖維的發(fā)酵產(chǎn)物，參與宿主免疫調節。在淋巴B細胞中，SCFAs增加乙酰輔酶A并調節代謝傳感器以增加氧化磷酸化、糖酵解和脂肪酸合成，從而產(chǎn)生能量和物質(zhì)促進(jìn)抗體產(chǎn)生。此外，SCFAs可以通過(guò)調節相關(guān)基因的表達來(lái)調控血漿中B細胞的分化。有研究表明，多糖類(lèi)物質(zhì)不被消化道的胃酸和酶類(lèi)消化，進(jìn)入腸道后為微生物提供營(yíng)養源，使其迅速增殖并產(chǎn)生大量SCFAs和一些抗菌物質(zhì)，降低腸道內pH值，抑制腸道內氨和吲哚等有害物質(zhì)生成，抑制有害菌生長(cháng)，從而改善腸道微生態(tài)。本研究發(fā)現黑木耳胞外多糖能提高小鼠腸道內丙酸和丁酸含量，具有調節腸道物質(zhì)能量代謝的作用。

Kang等研究了枸杞多糖對自發(fā)性結腸炎的有益作用及其在IL-10缺失小鼠中的益生作用，發(fā)現枸杞多糖可以提高丁酸鹽產(chǎn)生菌羅氏菌屬的豐度。IL-10是一種抗炎細胞因子，在控制免疫反應中起關(guān)鍵作用。在缺失IL-10的結腸炎和炎性腸病小鼠模型中，巨噬細胞中受損線(xiàn)粒體積累，導致NLRP3炎性小體激活和IL-1β產(chǎn)生，引發(fā)炎性反應。本研究顯示，黑木耳胞外多糖能夠提升小鼠血清中免疫因子IL-10水平，具有抗炎作用。然而，黑木耳胞外多糖對IL-10的調控機制還不清楚，需要進(jìn)一步研究闡明。

綜上所述，黑木耳胞外多糖能夠促進(jìn)小鼠腸道內有益菌增殖，提高菌群代謝產(chǎn)物SCFAs含量，增加機體抗炎因子水平，在調節腸道微生態(tài)平衡及免疫反應方面具有重要作用。本研究為黑木耳胞外多糖益生菌微生態(tài)制劑和新型健康食品的開(kāi)發(fā)提供了理論基礎。

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