②反映物質(zhì)中的電解質(zhì)溶液：電解質(zhì)溶液是抗原和抗體反映系統軟件中不可以缺失的成份，它可使免疫復合物發(fā)生由此可見(jiàn)的沉積或凝結狀況。一般用8.5g／LNaCl水溶液做為抗原和抗體的油漆稀釋劑與反映物質(zhì)，獨特須要時(shí)也可選擇比較繁雜的緩沖溶液。假如反映系統軟件中電解質(zhì)溶液含量低以至于無(wú)，抗原和抗體不容易發(fā)生由此可見(jiàn)反映，特別是在不容易產(chǎn)生沉積反映。假如電解質(zhì)溶液濃度值過(guò)高，則會(huì )發(fā)生非特異性蛋白沉積。

③反映溫度：溫度對免疫反應的危害不言而喻，溫度過(guò)過(guò)高使生物分子轉性，溫度過(guò)低則使生物分子的活力下降或缺失。除開(kāi)以上較極端化的情形之外．抗原和抗體的溫度適應力非常強，一般在15～40℃的范疇內均能夠正常的開(kāi)展。在這個(gè)區域內，溫度的變動(dòng)關(guān)鍵危害反應速率，較少危害化學(xué)反應結果?？乖涂贵w反映的適宜環(huán)境溫度為37℃。

④應時(shí)間：時(shí)問(wèn)自身并不會(huì )對抗原體抗原反映積極環(huán)境要素，但試驗操作過(guò)程中觀(guān)查效果的時(shí)間段不一樣很有可能會(huì )見(jiàn)到不一樣的結果。時(shí)間要素關(guān)鍵由反應速率來(lái)反映，反應速率在于抗原和抗體感染力、化學(xué)反應類(lèi)型、反映物質(zhì)、反映溫度、反映方式等要素。一般免疫力剖析非均相兩相免疫反應做到均衡的時(shí)長(cháng)為1～3h。在提升標準或反映硫化促進(jìn)劑功效下，可減少免疫反應做到均衡的時(shí)間。均相免疫反應比非均相免疫反應做到均衡的速率快得多，一般37℃下反映15rain就可以達均衡。

二、免疫力統計分析方法種類(lèi)

免疫力統計分析方法有多種多樣的歸類(lèi)方法，按抗原和抗體反映是在非均相兩相問(wèn)或是在單一高效液相中開(kāi)展和是不是必須開(kāi)展固液分離設備，分成非均相免疫力剖析和均相免疫力剖析；按抗原和抗體融合反映的方法不一樣，免疫力剖析可劃分為非市場(chǎng)競爭型免疫力剖析和市場(chǎng)競爭型免疫力剖析；按抗原體(或抗原)是不是開(kāi)展標識可分成標識免疫力剖析和非標識免疫力剖析。

(一)非均相免疫力剖析

非均相免疫力剖析一般在非均相兩看中開(kāi)展。以合理的標識物標識抗原或抗原體，將抗原體或抗原固定不動(dòng)于合理的固相媒介(如聚乙烯微孔)表層，抗原和抗體反映系統中一起存有高效液相中分散的標識物和固相上融合的標識物，二相的標識物都具備活力。在反映均衡后將固相和高效液相分離出來(lái)，測量固相上融合模式的標識物的活力或高效液相中分散標識物的活力，測算待測物的成分。酶聯(lián)免疫吸咐測量(enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA)是現在最常見(jiàn)的非均相免疫測定法。這類(lèi)測定法有3種必需的實(shí)驗試劑：①被子固相用抗原體或抗原，即免疫力吸收劑(immunosorbent)；②酶標識的抗原體或抗原，稱(chēng)之為酶結合物(conjugate)。

③酶的底物和鉻黑T。酶聯(lián)免疫吸附測定方法既可用來(lái)測量抗原體，也可用來(lái)測量抗原。因為抗原和抗體反映在兩之間開(kāi)展，反映抵達均衡所需時(shí)間長(cháng)，反映均衡后必須開(kāi)展兩相分離，故檢驗速度比較慢。

(二)均相免疫力剖析

均相免疫力剖析是在勻稱(chēng)管理體系(一般在高效液相)中完成的。如可以用合理的標識物(如酶、瑩光劑等)標識抗原或抗原體，運用抗原和抗體反映生成一氧化氮合酶后標識物的活力(如酶促反應)遭受遏制或別的數據信號的轉變 (如瑩光光的偏振、瑩光提高、瑩光猝滅等)來(lái)檢驗抗原或抗原體，反映后不用分離出來(lái)融合的標識物和分散的標識物，立即測量系統軟件中的標識物的活力或有關(guān)數據信號的轉變，來(lái)明確融合的或分散的標識物的總數，進(jìn)而獲得被測抗原體或抗原成分的信息內容。均相免疫力剖析不但能夠用以蛋白等生物大分子抗原體或抗原的測量，也可用作化肥、藥品、生長(cháng)激素、冰毒、興奮藥等小分子水化學(xué)物質(zhì)的測量。均相免疫反應做到均衡的速度更快，不用開(kāi)展兩相分離，方式簡(jiǎn)單迅速。

(三)非市場(chǎng)競爭型免疫力剖析

非市場(chǎng)競爭型免疫力剖析具體有雙抗原夾心巧克力法、間接性法和捕捉被子法。

1、雙抗原夾心巧克力法檢驗抗原體病毒感染等顆粒物抗原體、蛋白等生物大分子一般具備好幾個(gè)抗原決定簇，對這種抗原體的檢驗多選用抗不一樣抗原決定簇的雙抗原夾心巧克力法。

①將特異性抗體被子于固相媒介。清洗去除分散的抗原及殘渣，封閉式固相上未融合抗原的結構域。

②待檢抗原體，37℃隔熱保溫反映，試品中的抗原體與固相抗原融合，產(chǎn)生固相抗原和抗體合物，清洗去除未融合的分散化學(xué)物質(zhì)。

③加防另一抗原決定簇的酶標識抗原，37℃隔熱保溫反映。固相上的抗原和抗體一氧化氮合酶與酶標抗原融合，產(chǎn)生抗原一抗原體一酶標抗原三元一氧化氮合酶。完全清洗除去未融合的酶標抗原。這時(shí)固相上融合的酶標抗原量與試樣中被測抗原體量在一定區域內呈成正比。

④加酶的底物和鉻黑T，固相三元一氧化氮合酶上的酶催化反應鉻黑T造成有色板塊物質(zhì)，試品中抗原體的量與酶促著(zhù)色抗壓強度呈正比例，根據色度測量可對抗原體開(kāi)展定性研究和定性分析。

在具體運用中，如抗原的主要來(lái)源為抗血清，被子和酶標識用的抗原最好是各自來(lái)自于不一樣屬種的小動(dòng)物。如運用單抗，一般挑選對于抗原體上不一樣決定簇的替尼，各自用以被子固相和制取酶標抗原。那樣的雙抗原夾心巧克力法具備較強的非特異，并且還可以將待檢標本采集和酶標抗原一起隔熱保溫反映，開(kāi)展一步法檢驗。

2、間接性法檢驗抗原間接性法檢驗抗原的基本原理。用抗原體被子固相，添加待檢試品和酶標二抗，被測抗原與固相抗原體融合，酶標二抗與被測抗原融合，根據檢驗酶標二抗的酶促顯色反應來(lái)檢驗被測抗原。

①將非特異抗原體被子于固相。清洗去除未融合的抗原體及殘渣。

②加待測試品，37℃隔熱保溫反映。試品中的被測抗原與固相抗原體融合，產(chǎn)生抗原和抗體一氧化氮合酶。清洗除去樣本中分散的其它成份。

③酶標二抗，固相抗原體上融合的被測抗原與酶標二抗融合。清洗除去分散物。

④加酶的底物和鉻黑T著(zhù)色，固相上融合的酶標二抗量(酶促顯色反應抗壓強度)與試樣中被測抗原量在一定區域內呈成正比。