草魚(yú)是在我國具體的淡水魚(yú)類(lèi)之一，被普遍作為很多魚(yú)種產(chǎn)品的原材料。殊不知，魚(yú)種帶有充足的蛋白，易腐壞霉變，因而科學(xué)研究草魚(yú)冷藏方式有著(zhù)關(guān)鍵的實(shí)際意義。傳統式的冷藏方式有冷藏、超低溫、輻照度、高壓、有機化學(xué)及微生物冷藏法。在其中可食膜因具備低碳環(huán)保、無(wú)毒性沒(méi)害，可以提升 食物的產(chǎn)品質(zhì)量和增加食品保質(zhì)期等優(yōu)勢，促使大家對其愈來(lái)愈有興趣。近些年科學(xué)研究較多的可食膜原材料有含糖量、蛋白、脂類(lèi)或一些中性化生物大分子原材料的組成物，且大家更加偏向于從魚(yú)身自身得到冷藏原材料。近幾年來(lái)，很多專(zhuān)家對魚(yú)皮膜愈來(lái)愈有興趣，Gimenez等證實(shí)，根據在大魷魚(yú)果膠中添加一種堿性蛋白酶開(kāi)展水解反應后，制取獲得的大魷魚(yú)明膠紙的抗氧化明顯增強。也有專(zhuān)家學(xué)者在冷藏儲存削皮三文魚(yú)時(shí)，用帶有2％殼聚糖鍍層對其開(kāi)展冷藏，實(shí)際效果要顯著(zhù)好于三文魚(yú)或比目魚(yú)蛋白質(zhì)粉鍍層。而魚(yú)鱗片做為草魚(yú)生產(chǎn)制造生產(chǎn)過(guò)程的邊角料，帶有充足的膠原，其酶解物質(zhì)具備抑止細菌生長(cháng)發(fā)育和液汁外流的功效，根據魚(yú)鱗片果膠制取可食膜遮蓋魚(yú)身，既能夠變廢為寶，又可以增加魚(yú)種的保存期，維持魚(yú)種原有的口味。

一直以來(lái)，大家較多應用生成抗氧劑開(kāi)展食物的冷藏，但傳統式生成的還原劑如叔丁基對甲基小茴香醚(BHA)、二丁基甲基二甲苯(BHT)等自身很有可能具備潛在的毒副作用，對身體造成不良影響。而近些年，具備抗氧化性活力的自然多酚類(lèi)物質(zhì)馬郁蘭提取液，愈來(lái)愈多的被使用到食物中，馬郁蘭提取液的抗氧化和抗菌性已被普遍確認?？墒?，針對馬郁蘭提取液運用于魚(yú)鱗片膜是不是會(huì )產(chǎn)生機械設備隔絕，并根據花青素一蛋白的相互影響而降低活性物質(zhì)的釋放出來(lái)，有關(guān)科學(xué)研究仍較少。植酸作為一種金屬材料抗氧化劑，在色調維護和抗氧化性層面充分發(fā)揮著(zhù)關(guān)鍵功效，在魚(yú)鱗片膜中添加植酸，也想要能夠提升 魚(yú)鱗片膜的抗氧化和感觀(guān)特點(diǎn)。

目前為止，大家對魚(yú)鱗片可食膜的分析還較少，對添加馬郁蘭提取液和植酸是不是能明顯提升 魚(yú)鱗片可食膜的抗氧化還不太清晰。根據以上緣故，本試驗致力于討論魚(yú)鱗片果膠、馬郁蘭提取液及植酸對增加草魚(yú)貨架期的功效，以求為工業(yè)生產(chǎn)魚(yú)鱗片果膠可食膜給予理論基礎。

一、原材料與方式

1、關(guān)鍵實(shí)驗試劑原材料

草魚(yú)、馬郁蘭葉：當地銷(xiāo)售市場(chǎng)選購；胃蛋白酶：北京市德國拜耳迪生物科技有限責任公司；植酸：北京醫藥臨床實(shí)驗核心；沒(méi)食子酸、NaOH、酒石酸鉀鈉、KCL、硫代硫酸鈉、工業(yè)乙醇、考馬斯亮藍、吡啶、正丁醇、丙二醛、1，1，3，3-四乙氧基丙烷氣、凡士林、巰基乙醇、溴酚藍、正丁酸、SDS、平板電腦記數瓊脂粉：國藥控股化學(xué)藥品有限責任公司給予；硫酸銨、冰乙酸：西隴科學(xué)股權有限責任公司給予；三磷酸腺苷(ATP)、β-硫代巴比妥酸(TBA)：天津北辰華康試劑廠(chǎng)；牛血清蛋白：杭州市吳天生物科技服務(wù)項目有限責任公司給予。

2、要實(shí)驗儀器

紫外線(xiàn)光度計(UV-2600)：尤尼柯(上海市)儀器設備有限責任公司，旋轉蒸發(fā)器(SHB-3)：上海市申生高新科技有限責任公司；離心脫水機(SC-3612)：安徽省中科中佳儀器設備有限責任公司；組織搗碎機(PT-2100)：法國Kinematica企業(yè)；渦流切換閥(S025)：法國IKA企業(yè)；pH計(UB-7)、PL602-L電子分析天平：法國Sartorius企業(yè)；半少量蒸餾裝置(KDY-9820)：北京市瑞邦興業(yè)科技有限責任公司；電泳儀(MiniProtean11unit)：英國B(niǎo)IO-RAD企業(yè)；液相色譜(LC-10AT)配紫外線(xiàn)探測器：Et本安捷倫儀器企業(yè)；離子交換柱：VP-CDSC18(4.6mm×250mm×5μm)。

3、方式

（1）魚(yú)鱗片果膠的制取

應用冷藏的新鮮草魚(yú)魚(yú)鱗片，在-18℃下儲存不超過(guò)兩個(gè)月，將清洗并干躁的魚(yú)鱗片與雙蒸水(1:10，w／v)混和，用1mol／LHCL調整pH至2.0，添加5％的胃蛋白酶(1:3000)后，放置60℃恒溫水浴鍋中反映6h，接著(zhù)將水溶液放置開(kāi)水浴中10min滅酶。用1mol／LNaOH將水溶液pH調至至7.0，用醫用紗布過(guò)慮果膠水溶液并攪拌，將勻漿于3600r／min下離心式3min，將所得的上清液用旋轉蒸發(fā)器于60℃轉動(dòng)揮發(fā)30min，將濃縮果膠水溶液(蛋白質(zhì)成分：28.56mg／mL)于4℃下儲藏，蛋白質(zhì)成分選用雙縮脲測定方法心，結果為三次測量的均值。

（2）馬郁蘭提取液的制取

關(guān)鍵選用Gomez等的辦法制取馬郁蘭水提物，并對辦法開(kāi)展小量改善。精確稱(chēng)量10g馬郁蘭葉，碾磨碎后，在65℃下獲取10min，將提取液放置旋轉蒸發(fā)器中于60℃下水蒸氣蒸餾30min，其花青素成分達2448.56μg／mL?；ㄇ嗨爻煞诌x用F01in-酚測定方法，以沒(méi)食子酸為標準物質(zhì)，用紫外線(xiàn)光度計于750nm下測量，結果為三次測量均值，總酚濃度值(μg／mL)以沒(méi)食子酸計。

（3）鍍層水溶液的配制及解決

在草魚(yú)試品表層各自涂有四種含有12mg／mL凡士林的水溶液，全部膜水溶液的成份按以下占比開(kāi)展配置。

F0組：對照實(shí)驗，草魚(yú)表層不涂層；Fl組：草魚(yú)表層涂有魚(yú)鱗片果膠液(25mg／mL)；F2組：

草魚(yú)表層涂有含200μg／mL馬郁蘭提取液的魚(yú)鱗片果膠液(25mg／mL)；F3組：草魚(yú)表層涂有含200μg／mL植酸的魚(yú)鱗片果膠液(25mg／mL)；F4組：草魚(yú)表層涂有含20099／mL馬郁蘭提取液及200μg／mL植酸的魚(yú)鱗片果膠液(25mg／mL)。

試品為在本地銷(xiāo)售市場(chǎng)選購的新鮮去內臟器官草魚(yú)，并清理整潔，F1～F4組試品各自泡浸在對應的4℃水溶液中1.5min，并與對照實(shí)驗F0一起晾曬。接著(zhù)將5組草魚(yú)試品F0～F四分別放置聚丙稀拖盤(pán)中，并且用高壓聚乙烯保鮮袋嚴實(shí)遮蓋，包裝好后于4℃電冰箱內儲存。每2天隨機抽取草魚(yú)試品開(kāi)展微生物菌種、有機化學(xué)和感觀(guān)剖析，每一個(gè)試品平行測定三次。

（4）SDS-聚合硫酸鐵凝膠電泳測量

根據SDS-PAGE譜圖剖析馬郁蘭提取液、植酸與黃原膠的相互影響。將果膠水溶液與雙蒸水混和，隨后與上樣緩沖溶液(100mmol／LTris-HCL、1.6％SDS、8％凡士林、8mmol／L巰基乙醇和0.02％溴酚藍)按1:1的比率混和，蛋白終濃度值1mg／mL。試品于100℃下熱轉性4min，并在添加4％濃縮膠和10％分離出來(lái)膠的電泳槽中開(kāi)展剖析，操縱電流量在25mA，先后在各加樣孔加樣9μL。待溴酚藍顯色劑抵達疑膠底端邊沿時(shí)可終止電泳原理，取下并砸開(kāi)玻璃，取下疑膠，上色、褪色，直至蛋白質(zhì)區帶清楚，開(kāi)展圖象掃描儀，直至尋找光密度值有差別的雜帶。

（5）試品儲藏實(shí)驗

①抗菌實(shí)驗為了更好地調查膜的抗菌特性，將5g魚(yú)類(lèi)在滅菌室內環(huán)境中添加45mL無(wú)菌檢測鹽水并勻漿1min，勻漿后的試品用9mL無(wú)菌檢測鹽水逐步稀釋液至適宜的濃度值，并且于36℃下塑造2天，用平板電腦計數法測量菌落總數。在數據分析以前，將病菌數轉換為log10菌落形成企業(yè)／克(CFU／g)，每一個(gè)試品重3次，測算均值。

②揮發(fā)物鹽基氮(TVB-N)成分的測量

TVB-N按半少量定氮法開(kāi)展測量。每一個(gè)試品在貯藏期內反復測量三次。精確稱(chēng)量10.00g碾磨后的試品，并添加100mL雙蒸水，勻稱(chēng)拌和并波動(dòng)30min，在離心脫水機5000r／min離心式10min，獲得上清液，過(guò)慮，滴定劑，選用半少量定氮法測出，每過(guò)2天測量一次。

③β-硫代巴比妥酸(TBA)值的測量

TBA值的測量選用Krik和Sawyer所運用的方式 。