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酶底物法快速測定地表水中糞大腸菌群實(shí)驗研究

來(lái)源:鄭州天順食品添加劑有限公司 發(fā)布時(shí)間:2021-09-17 16:30:43 關(guān)注: 0 次
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沙門(mén)氏菌群是總大腸桿菌中的一部分。 關(guān)鍵來(lái)源于排泄物遙在 44.5益溫度下會(huì )生長(cháng)發(fā)育并發(fā)醇乳清蛋白產(chǎn)酸脹氣的大腸桿菌稱(chēng)之為糞大腸菌群。用提升塑造溫度的辦法將地理環(huán)境中的大腸桿菌與排泄物中的大腸桿菌區別開(kāi), 使培育出的菌具體為來(lái)源于排泄物中的大腸桿菌, 進(jìn)而更確切地體現出水體受排泄物嚴重污染的狀況 目前袁糞大腸菌群檢驗最常見(jiàn)的辦法是多管發(fā)酵和濾膜法。 可是這2種方式測量的時(shí)間段都較長(cháng)袁最少必須 48 h,流程繁雜必須 認證實(shí)驗,與此同時(shí)無(wú)菌操作原則對試驗室硬件設施的規定 十分高。 而固定不動(dòng)底物酶底物分析法 1 個(gè)試品在試驗室內實(shí)際操作的時(shí)間僅必須 1 min塑造時(shí)間也減少為 24 h在一般試驗室內就能開(kāi)展, 酶底物法可抑 制 200 萬(wàn)只異常病菌精準檢驗到每 100 mL 試品中的 1 個(gè)糞大腸菌群。

1 試驗一部分

1.1 儀器設備與實(shí)驗試劑

關(guān)鍵儀器設備與實(shí)驗試劑詳細表 1。

1.2 實(shí)驗原理

在塑造溫度為 44.5依1益標準下袁糞大腸菌群細 菌 能 特 異 性 產(chǎn) 生 茁 一 半 乳 糖 苷 ,該生物菌能夠溶解色原底物釋放出來(lái)色 衣原體陽(yáng)性使細胞培養液呈淡黃色袁 使細胞培養液呈淡黃色轉變的原 理來(lái)測量水里糞大腸菌群。

1.3 實(shí)驗步驟

1 選用 100mL 無(wú)菌檢測取樣瓶取 100mL 攪拌水 樣 (假如水質(zhì)采樣糞大腸菌群數超過(guò)2005 個(gè)/L則酌情考慮少 取并且用新配制的超純水系統稀釋液至 100mL 標尺線(xiàn))。 

2 在配有水質(zhì)采樣的取樣瓶中添加科即得 TM(Colilert余)實(shí)驗試劑袁充足混勻袁使實(shí)驗試劑徹底融解。 

3 把融解徹底水質(zhì)采樣倒進(jìn)無(wú)菌檢測塑造定量分析盤(pán)(97孔)。

4 選用帶 97 孔定量分析盤(pán)硫化橡膠托墊在全自動(dòng)封口機上 開(kāi)展封裝。

5 把封裝好的 97 孔定量分析盤(pán)裝人 44.5 1oC 恒 溫恒溫箱中塑造 24h。

6 塑造 24h 后從恒溫箱中取下與 97 孔呈陽(yáng)性規范色度盤(pán)開(kāi)展較為淡黃色孔色調比 97 孔呈陽(yáng)性 規范色度盤(pán)深的說(shuō)明為陽(yáng)性反應依據 97 孔定量分析盤(pán)里的呈陽(yáng)性孔眼 對比 IDEXX 企業(yè)供應的 MPN表報出結果。

1.3 試品來(lái)源于

水質(zhì)采樣來(lái)自慶陽(yáng)市蒲河地下水及巴家咀地面生活用水源水體袁 依照 葉地下水和污水監測技術(shù)性規 HJ/T91-2002的要求收集并于 0耀4益超低溫避 光儲存6h 內開(kāi)展材料分析測試。

 2 結果與探討

2.1 實(shí)驗結果
此次試驗各取慶陽(yáng)市蒲河地下水和巴家咀飲 用水資源水 30 份試品各自用酶底物法和多管發(fā)醇 法開(kāi)展檢測數據分析袁結果見(jiàn)表 2。

2.2 數據統計分析

應用手機軟件 Excel2007, 對 2 種方式檢測的糞大腸菌群結果開(kāi)展匹配 t 檢測袁為了更好地使 2 組數據信息呈正 態(tài)遍布 現對信息開(kāi)展多數解決后再開(kāi)展 t 檢測結果見(jiàn)表 3。

由表 3 由此可見(jiàn)泊松相關(guān)系數r為 0.98堯0.994屬 強有關(guān)淵指數越趨向 1袁關(guān)聯(lián)性直越好袁表明2組 數據信息的關(guān)聯(lián)性非常好曰 P=0.426 和 0.725袁躍0.05袁表明 2組數據信息無(wú)統計學(xué)意義上的顯著(zhù)性差異可覺(jué)得多管發(fā)酵與酶底物法試驗結論具備對比性與 有關(guān)參考文獻相符合具備不錯的一致性。

2.3 探討

1 酶底物法與多管發(fā)酵各自測量以慶陽(yáng) 市地區的蒲河為象征的水質(zhì)采樣中的糞大腸菌群兩 者沒(méi)有統計學(xué)意義上的差別遙 原文中的解析結論與 有關(guān)文獻的結果有不錯的一致性 。

2 酶底物測定方法地下水中的糞大腸菌群袁操 作簡(jiǎn)單檢測的及時(shí)性好于傳統式的統計分析方法袁檢測周期時(shí)間短早期準備工作少袁對試驗標準和工作人員規定 低袁可以更快的檢測水體微生物菌種環(huán)境污染程序流程袁達到環(huán)保監測技術(shù)標準。

3 酶底物法在國外堯歐洲地區及一部分東南亞國家被普遍使用于水里堯 糞大腸菌群及腸子埃希氏菌的檢驗并根據英國 EPA 驗證遙 我國也納入了葉日常生活 飲 用 水 標 準 檢 驗 方 法 微 生 物 指 標 曳 (GB 轅 T 5750援12要2006)袁能夠測量生活用水中總大腸桿菌和腸子埃希氏菌 廣東質(zhì)量監督局于 2013 年準許公布了行業(yè)標準葉水里菌落總數 復合型 酶底物檢驗方式曳(DB44 轅 T 1163要2013)遙 酶底物法在我國正逐漸逐漸營(yíng)銷(xiāo)推廣 可是鑒于該辦法的費用較高袁現階段都還沒(méi)被普遍應用 假如未來(lái)實(shí)驗試劑堯耗 材價(jià)錢(qián)能有些降低 水質(zhì)采樣的測量范疇能進(jìn)一步提 高一定會(huì )獲得更快的營(yíng)銷(xiāo)推廣。 

3 結果

固定不動(dòng)底物酶底物測定方法水質(zhì)采樣中的糞大腸菌群具備較高的準確度和精確性袁與多管發(fā)酵進(jìn) 行較為在統計學(xué)意義上無(wú)顯著(zhù)性差異 能達到環(huán) 境監測系統規定遙 該辦法使用簡(jiǎn)單堯便捷袁工作中效 率獲得了明顯增強袁合適大批量剖析水體類(lèi)試品建 議國家相關(guān)單位頒布水里糞大腸菌群酶底物統計分析方法。

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