2.7.3 偏最小二乘法-判別分析（PLS-DA）

為了更好地進(jìn)一步剖析導致不一樣批號試品中間差距的成分，在PCA的根基上開(kāi)展PLS-DA解決。實(shí)體模型區別主要參數R2Y=0.966，模型預測主要參數Q2=0.91，說(shuō)明創(chuàng )建的實(shí)體模型合理平穩。一樣可將16批試品分成3類(lèi)，進(jìn)一步認證了HCA和PCA的結果；以PLS-DA實(shí)體模型中必要性投射（VIP）值>1.0挑選不一樣批號試品間的差異成份，VIP值的尺寸說(shuō)明了對試品歸類(lèi)的貢獻的水平。據圖5得知，共尋找八個(gè)成份，各自為：13號峰（黃芩異黃烷苷）、11號峰（人參皂甙Rg1）、花了7天時(shí)間峰（毛蕊大豆異黃酮葡萄糖水苷）、24號峰（7,2'-二甲基-3',4'-二叔丁基異黃烷）、六號峰（松香醇二紅提苷）、16號峰（毛蕊大豆異黃酮）、20號峰（芒柄花黃素）、11號峰（綠原酸），說(shuō)明這8種成份對黃蛭益腎膠襄品質(zhì)差別危害很大。8種成份各自來(lái)自于黃芩、三七、益母草顆粒、墨旱蓮、菟絲子，在其中五個(gè)成份屬于君藥黃芪藥材，進(jìn)一步表明黃芪藥材對黃蛭益腎膠襄的品質(zhì)危害很大。

3 探討

本試驗各自調研了超聲波獲取方式的差異獲取有機溶劑（50%工業(yè)甲醇、70%工業(yè)甲醇和工業(yè)甲醇）、獲取時(shí)間（30、45、60 min）和獲取料液比（1∶5、1∶10、1∶15）等影響因素，從獲取的色譜儀信息內容整體性、色譜儀峰的回應、實(shí)際操作方便性等層面考慮到，明確供試品水溶液最好制取方式為加10倍量工業(yè)甲醇超聲波獲取30 min。較為了4種不一樣流動(dòng)性相系統軟件（工業(yè)甲醇-水、乙腈-水、乙腈-0.05%硫酸銨水、乙腈-0.1%硫酸銨水），乙腈-0.05%硫酸銨水做為流動(dòng)性相所得的色譜儀峰形、回應及分離度均不錯；選用DAD探測器對檢驗光波長(cháng)開(kāi)展調查，發(fā)覺(jué)在210 nm處的圖普信息內容較多，峰回應較高；因為試品中正負極大的成份較多，優(yōu)先選擇考慮到吸水性型離子交換柱，各自挑選Waters Atlantis T3(250 mm×4.6 mm,5μm）、Inter Sustain AQ-C18(250 mm×4.6 mm,5μm）、Waters Symmetry Shield RP18(250 mm×4.6 mm,5μm）、Waters XBridge®Shield RP18(250 mm×4.6 mm,5μm），同一色譜儀標準下氣相，結果顯示W(wǎng)aters XBridge®Shield RP18(250 mm×4.6 mm,5μm）離子交換柱的分離出來(lái)實(shí)際效果不錯，峰總數較多且分離度不錯，故選用這款離子交換柱。

本科學(xué)研究創(chuàng )建了黃蛭益腎膠襄的指紋圖譜，16批試品中明確24個(gè)一共有峰，根據HPLC-Q-TOF-MS/MS評定了化學(xué)物質(zhì)，并根據呈陽(yáng)性中藥材和呈陰性中藥制劑試品核對所屬到7味中藥材。相似性點(diǎn)評結果顯示16批黃蛭益腎膠襄相似性在0.925～0.995，整體上品質(zhì)比較均一。但根據HCA、PCA和PLS-DA有機化學(xué)運作模式，16批黃蛭益腎膠襄一共有紛紛總面積出現差別，進(jìn)而導致試品兩者之間的品質(zhì)差別。根據聚類(lèi)算法圖得知，16批試品被分成3類(lèi)，融合試品生產(chǎn)批號信息內容，3類(lèi)間的不同很有可能與制造時(shí)間、藥物存儲、原中藥材品質(zhì)相關(guān)。以PLS-DA實(shí)體模型中的VIP值挑選出8種差異成份，可當作操縱黃蛭益腎膠襄品質(zhì)的重要，這幾類(lèi)成份各自來(lái)源于黃芩、三七、菟絲子、益母草顆粒、墨旱蓮，提醒制造業(yè)企業(yè)之后在藥物制造中應當主要關(guān)心之上成份的轉變及其這幾劑原中藥材的品質(zhì)。

本實(shí)驗過(guò)程簡(jiǎn)易，可行性分析高，應用性強，根據指紋圖譜的根基上基本解析了藥物物質(zhì)條件，為黃蛭益腎膠襄所含化學(xué)成分的進(jìn)一步剖析打下基礎，為更為科學(xué)研究、高效率地操縱藥品安全給予參照根據。黃蛭益腎膠襄所含藥味諸多，本試驗指紋圖譜所屬到的中藥材僅7味，也有枸杞子、薏米仁、淮山藥等中藥材成份未在這里指紋圖譜結果中反映，主要是因為這類(lèi)中藥材所包括成份多見(jiàn)水溶等大正負極成份，色譜儀分離出來(lái)難度系數很大，對于該類(lèi)化學(xué)物質(zhì)的剖析事后擬選用HILIC方式開(kāi)展剖析。黃蛭益腎膠襄中的黃芩、川牛膝、三七等中藥材一樣包括很多人參皂甙類(lèi)成份，該類(lèi)成份在紫外線(xiàn)中沒(méi)有消化吸收，日后可融合揮發(fā)光透射（ELSD）或電噴霧器（CAD）探測器進(jìn)行其化學(xué)成分分析，以求健全其化學(xué)成分分析。