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中藥橘紅抗氧化作用初步研究(二)

來(lái)源:鄭州天順食品添加劑有限公司 發(fā)布時(shí)間:2021-09-19 12:36:59 關(guān)注: 0 次
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實(shí)驗以食品、醫藥工業(yè)常用抗氧化劑Vc做對照,對各提取物部分抗氧化活性進(jìn)行比較,發(fā)現濃度較小或較大時(shí),對照Vc的清除率與各提取物清除率差異較大或不明顯。因樣品數量較多,為了便于比較,濃度最終選為1.00mg/mL,實(shí)驗結果見(jiàn)下圖。

從上圖可以看出,在所測濃度下各提取物均具有一定的抗氧化活性。其中對DPPH自由基清除作用大小順序為:3b>4b>4a>3a>2b>5b>2a>5a>1b>6a>1a>6b,金屬離子螯合能力大小順序為:3b>4a>3a>4b>1b>2a>2b>5a>6a>1a>5b>6b,對黃嘌呤氧化酶的抑制作用大小順序為:3b>3a>4b>4a>2b>5b>6a>6b>1a>1b>2a>5a??梢钥闯鰧θN不同的抗氧化模型,乙酸乙酯提取物部分樣品3a、3b和無(wú)水乙醇提取物部分樣品4a、4b均具有較好的抗氧化作用,但其作用均低于同濃度的Vc。同一個(gè)樣品對三種抗氧化模型的作用大小為:DPPH自由基清除作用>金屬離子螯合能力>對黃嘌呤氧化酶的抑制作用,即清除DPPH自由基結果較顯著(zhù)。

2.2各薄層層析制備樣品抗氧化活性結果與分析

從2.1實(shí)驗結果可以看出3a、3b、4a和4b清除DPPH自由基效果較顯著(zhù),將此四部分進(jìn)一步經(jīng)薄層層析制備分離,3a部分用石油醚/乙酸乙酯=5︰1展開(kāi)得到樣品3a-1.3b部分用石油醚/乙酸乙酯=1︰2展開(kāi)得到樣品3b-2和3b-3.4a部分用氯仿/甲醇=4︰1展開(kāi)得到樣品4a-4和4a-5.4b部分用氯仿/甲醇=1︰7展開(kāi)得到樣品4b-6,共六個(gè)樣品,它們的薄層層析圖及Rf值見(jiàn)圖2。

從上表可以看出,制備薄層層析法所得各樣品對DPPH自由基均有清除作用。在1.00mg/mL濃度時(shí),各樣品對DPPH自由基清除率大小順序為:3b-2>4a-4>3b-3>4b-6>3a-1>4a-5,其中樣品3b-2和4a-4清除率較高。

以Vc做對照,對樣品3b-2和4a-4在不同濃度下清除DPPH活性進(jìn)行比較,發(fā)現濃度較小或較大時(shí),清除率太小或差異變化不明顯。為了便于比較,濃度選為0.125、0.25、0.5、1.00、2.00mg/mL,實(shí)驗結果見(jiàn)圖3。

從上圖可以看出,3b-2和4a-4清除DPPH自由基作用與濃度呈較好的量效關(guān)系,但在同濃度下清除率均低于對照Vc。

2.3活性樣品的結構類(lèi)型鑒定結果與分析


從2.2結果可以看出樣品3b-2和4a-4在測定濃度下對DPPH自由基清除作用較強。通過(guò)觀(guān)察它們的理化性質(zhì)和顏色反應,初步鑒定出樣品的結構類(lèi)型。顏色反應結果見(jiàn)表3。

從表3結果可以看出樣品3b-2和4a-4主要為黃酮類(lèi)化合物。

3結論

本研究以體外抗氧化作為活性篩選模型,先測試相同濃度下橘紅各提取物部分清除2.2-二苯基-1-苦基肼自由基作用、金屬離子螯合能力和對黃嘌呤氧化酶的抑制活性,以期得到抗氧化作用較明顯的提取物部分和實(shí)驗模型;然后將效果較好的提取物部分經(jīng)薄層層析進(jìn)一步分離,測試所得樣品對效果較好的實(shí)驗模型的抗氧化活性。這種篩選活性部位的實(shí)驗方法能縮小活性范圍,實(shí)驗針對性強,目的明確,可以較快得到活性較好部位。實(shí)驗結果表明在所測濃度范圍內,橘紅中的兩個(gè)黃酮類(lèi)成分對DPPH自由基有較明顯的清除作用,并且清除率均隨著(zhù)濃度的增大而增強,具有較好的量效關(guān)系,可以進(jìn)一步進(jìn)行結構及開(kāi)發(fā)應用研究,為其作為天然抗氧化劑在食品和醫藥行業(yè)的應用提供理論依據。

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