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菊粉酶

產(chǎn)品名稱(chēng):菊粉酶 食品級   又名:菊粉酶、β一果聚糖酶、2,l-d一果聚糖水解酶(ec3.2.l)、β-2,l-d一果聚糖酶 CAS號:9025-67-6 EINECS NO:232-802-3 分子式:C4H8CaN25
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菊粉酶

產(chǎn)品名稱(chēng):菊粉酶 食品級

 

又名:菊粉酶、β一果聚糖酶、2,l-d一果聚糖水解酶(ec3.2.l)、β-2,l-d一果聚糖酶

CAS號:9025-67-6

EINECS NO:232-802-3

分子式:C4H8CaN25O4

分子量:188.20

理化性質(zhì): 菊粉酶(inulinase)是能夠水解β-2,l-d一果聚糖果糖苷鍵的一類(lèi)水解酶,分泌菊粉酶的微生物在自然界中分布很廣,土壤、水和動(dòng)物消化道中的多種微生物都能分泌。菊粉酶可以在一定的溫度條件下水解菊粉成果糖或低聚果糖。
菊粉最早是從菊科植物中分離出來(lái)而得名。菊粉(inulin)是一種有呋喃構形的d一果糖經(jīng)β-2,l糖苷鍵脫水聚合而成,且在果糖殘基(f)末端連有一個(gè)葡萄糖殘基(g)的直鏈結構多糖,是最簡(jiǎn)單的一類(lèi)果聚糖,簡(jiǎn)寫(xiě)為gfn(edelman等,1968)。此外,emst等(1995)報道,菊粉還含有少量另一類(lèi)果聚糖(inulonose)即末端無(wú)連有g(shù)的果聚糖。
菊粉又稱(chēng)菊糖,來(lái)源于菊芋、菊苣等植物,是一種功能性果聚糖,也是最易溶解的水溶性膳食纖維。菊粉作為一種純天然的功能性配料,已被世界20多個(gè)國家批準為營(yíng)養增補劑,廣泛運用于乳制品、飲料、低脂低熱量食品、烘培食品、保健食品中

包裝:凈重25kg/桶。

存儲:成品存放陰涼、干燥、清潔、通風(fēng)避光的倉庫中,地面有墊板,墊板

作用:酶制劑

用途:

菊粉酶有不同的分類(lèi)方法。
根據菊粉酶在微生物體內主要分布于細胞內、細胞壁和細胞外,分別稱(chēng)為胞內酶、胞壁結合酶和胞外酶,它們的比例主要受菌種、碳源、溫度和ph的影響(ettalibi等,1990):l)隨著(zhù)溫度的升高胞外酶比例下降,而其他兩種酶比例上升;2)以菊粉或蔗糖為碳源培養微生物時(shí),前者胞外酶比例高于后者,其他兩種酶則相反;3)胞外酶主要由真菌合成,細胞壁結合酶主要產(chǎn)自酵母;4)適當的ph使細胞壁通透性增大,提高了胸外酶比例,其他兩種酶比例下降。
根據作用底物方式的不同,或者說(shuō)根據菊粉酶酶切果聚糖鏈方式分為內切酶(ec3.2.1.7)和外切酶(ec3.2.1.80)。通常用i/s的大小來(lái)區分內切型菊粉酶和外切型菊粉酶,i是以菊粉作底物時(shí)的酶活,s是以蔗糖作底物時(shí)的酶活。一般認為外切菊粉酶的i/s值比內切菊粉酶的us低。內切菊粉酶水解菊粉可以得到高純度低聚果糖,常由真菌分離出來(lái)。外切菊粉酶在胞內、胞壁、胞外都有分布,它水解菊粉可以得到高純度果糖。
根據來(lái)源菊粉酶可以分為微生物菊粉酶和植物菊粉酶。
2.l熱穩定性絕大多數報道中,菊粉酶的最適溫度為52~64℃之間,55~58℃最適宜。
2.2ph值對活力的影響菊粉酶最適ph為弱酸性,這一性質(zhì)不僅操作安全,而且使用過(guò)程中可以防止微生物污染,也是果糖最穩定的ph值。
2.3底物專(zhuān)一性李俊剛等(1999)認為,提高菊粉酶酶解效率的關(guān)鍵在于提高酶活和增加底物對酶作用的敏感性。據研究報道,菊粉酶不僅可以對菊粉作用,也可以對蔗糖及棉子糖作用,并表現出更高的活力和水解能力。使用菊芋提取液或菊粉做碳源,都能誘導產(chǎn)生菊粉酶,但菊芋提取液作底物效果更好。這可能是因為提取液除含菊粉外,還含有較多的短鏈的多聚果糖,更有利于菌體的生長(cháng)以及被酶水解(pramod等,1991)。也就是說(shuō),一定的底物可以誘導生成菊粉酶,但用不同的碳源作底物對酶的活性影響很大。研究發(fā)現一定濃度的菊粉、麥芽糖和低濃度的果糖能夠誘導生成菊粉酶,淀粉對菊粉酶的影響不大,葡萄糖卻能明顯地抑制菊粉酶活性。表明菊粉酶有底物專(zhuān)一性。
菊粉酶的來(lái)源很廣,自然界中的植物以及土壤、水和動(dòng)物消化道中的多種微生物都可以分泌菊粉酶。微生物來(lái)源的菊粉酶種類(lèi)多,熱穩定性好,適于發(fā)酵生產(chǎn)。據不完全統計,產(chǎn)菊粉酶的有絲狀真菌17個(gè)屬物余種,酵母菌10個(gè)屬20余種,細菌12個(gè)屬10余種。目前有不少研究人員仍在致力于篩選新的產(chǎn)酶菌種,并對現有菌種進(jìn)行改造,以得到高酶活、熱穩定性好的生產(chǎn)菌株。大多數微生物菊粉酶均為外切型菊粉酶,并且常常呈現出轉化酶活力,轉化酶是一種水解蔗糖為葡萄糖和果糖的酶,對葡粉沒(méi)有作用。
菊粉酶的純化步驟一般分為:(nh4)2so4沉淀、離子交換層析及凝膠過(guò)濾色譜等。離子交換層析可用來(lái)選擇性地分離外切型菊粉酶和內切型菊粉酶,通常用naci進(jìn)行線(xiàn)性梯度洗脫,隨著(zhù)na-ci濃度增加,內切菊粉酶先洗出,外切酶后洗出(azhall等,1989)。菊粉酶的提純過(guò)程:在0℃條件下,用40%飽和硫酸銨除雜蛋白,用90%飽和硫酸鉸析出菊粉酶,用sephadexg25脫鹽,聚乙二醇透析濃縮;再進(jìn)行sophadexg200層析,操作溫度10℃;然后進(jìn)行deae一纖維素de52離子交換層析;最后4℃、120v恒壓電泳分離(賈英民等,1998)。
常見(jiàn)的酵母和真菌中分離的酶多同時(shí)具有菊粉酶和轉化酶活性,為區分兩者,人們常采用“e=菊粉酶總酶活+轉化酶總酶活”的公式,當e>0.02為菊粉酶,e<0.02則為轉化酶。菊粉酶酶活定義為在一定的反應條件下每分鐘釋放lμmol果糖所需酶量;轉化酶酶活定義為每分鐘水解1μmol蔗糖所需的酶量。由于測定菊粉酶酶活的定義沒(méi)有統一標準,因此酶活的單位也有不同。
6.l酶液的制備胞外菊粉酶粗酶液的制備:將發(fā)酵液過(guò)濾或離心即可得粗酶液。胞內菊粉酶粗酶液的制備:取一定量的發(fā)酵液離心后得菌體,將菌體用0.lmol/lph值為5.6的醋酸緩沖液洗滌2~3次后,加緩沖液至原體積,然后用超聲波處理(10khz,100w,5min)菌懸液,處理液即為胞內菊粉酶粗酶液(肖春玲,1999)。
6.2酶活測定黎明蘭等(1995)用菊芋提取液做培養基。發(fā)酵后取0.05ml發(fā)酵液加4.5ml5%菊粉液,55℃反應30min,沸水浴煮10min終止酶活,在同樣的反應系統和條件下加入沸水浴煮10min的酶作空白對照。取一定量反應液用費林試劑熱滴定法測糖(北京大學(xué)生物系生物生化教研室,1986)。酶活單位定義為:在上述反應條件下生成lμmol/min還原糖所需酶量為1個(gè)酶活單位。
uhm等(1987)報道的方法是,取50μl適當稀釋的酶液,加入450μl5%的菊粉(0.lmol、ph4.5的醋酸緩沖液配制),60℃保溫10min,沸水浴5min,滅活終止反應(在完全相同的條件下滅活酶底物作對照),快速冷卻后,用somogi-nelson法(derycke等,1984)測定還原糖。陳曉明等(2000)測定酶活時(shí)與uhm的方法不同的是,用3、5-二硝基水楊酸比色法測定還原糖數量,酶活單位定義為:在上述反應條件下,每分鐘催化菊糖水解生成lμmol還原糖的酶量。
7.l利用菊粉酶生產(chǎn)高果糖漿由于高果糖漿價(jià)格低廉,味甜,爽口,滲透壓高,保藏效果好,熱值低,不易造成齲齒,而且糖尿病患者可利用,所以在美、日等發(fā)達國家被廣泛用于食品和醫藥工業(yè)。20世紀70年代以后,各國開(kāi)始關(guān)注以菊粉為原料,以酸法和酶法水解制備果糖。酸法雖然產(chǎn)量高,但副產(chǎn)物多,色素重,分離精制難。80年代,美國、法國人b利時(shí)、加拿大等國的研究人員開(kāi)始研究利用菊粉酶制果糖,其工藝簡(jiǎn)單,轉化率高,產(chǎn)物純,果糖產(chǎn)量高,可直接生產(chǎn)超高果葡糖漿(uhfgs),果糖含量90%以上。為此美國、英國、丹麥、法國、加拿大等發(fā)達國家都在進(jìn)行研究。由此可見(jiàn)菊粉酶在果糖及果葡糖漿的生產(chǎn)上具有巨大的開(kāi)發(fā)應用潛力。外切菊粉酶降解產(chǎn)物以果糖為主且果糖比例高。菊粉酶生產(chǎn)高果糖漿的研究國內外都較多,我國對其研究還處于起步狀態(tài)。
7.2利用菊粉酶生產(chǎn)低聚果糖低聚果糖是一種良好的雙歧因子和水溶性膳食纖維,有防治便秘、抑制腸內腐敗物質(zhì)形成、提高機體免疫力、改善脂質(zhì)代謝、降低膽固醇等作用,同時(shí)適于糖尿病人食用。比利時(shí)orafti公司投資20億比利時(shí)法郎,歷時(shí)數十年種植菊藝開(kāi)發(fā)生產(chǎn)低聚果糖和菊粉,分別作為食糖和油脂代用品(胡學(xué)智,1997)。日本明治制果也在大規模生產(chǎn)。中國食品發(fā)酵研究所、上海醫藥工業(yè)研究所等已經(jīng)試制成功,正在擴大試驗中。工業(yè)上生產(chǎn)利用菊粉酶生產(chǎn)低聚果糖的方法是由內切型菊粉酶水解菊粉而成,產(chǎn)物以低聚果糖為主,純度高,原料便宜,低聚果糖已被視為食品原料,而非食品添加劑。
7.3利用菊粉酶生產(chǎn)酒精利用菊粉酶生產(chǎn)酒精,國外相關(guān)研究較多。國外有報道指出,用aa-pergillusniger(schorr-garlindo等,1995)、k.fragilis(ohta等,1993)或k.margaritis(margantis等,1982)發(fā)酵菊粉生產(chǎn)酒精,aspergll。niger轉化率為明%以上(v/v),后兩者幾乎能完全將菊粉發(fā)酵成酒精。發(fā)酵粗菊芋提取液,不需加其他營(yíng)養物質(zhì),25h內酒精產(chǎn)量87.8%。
7.4其他方面的應用菊粉酶還可直接發(fā)酵菊粉制備各種產(chǎn)品,如可制備丙酮丁醇,用于診斷腎臟疾病,控制血糖升高。另外,嚴奉偉等(1999)已經(jīng)開(kāi)始進(jìn)行菊粉軟糖的試制。利用菊粉酶直接發(fā)酵菊粉,制作功能性食品和飼料添加劑將有巨大的生產(chǎn)開(kāi)發(fā)潛力。
我國在菊粉酶的研究和應用中遇到的主要困難是:l)產(chǎn)酶成本高,導致應用成本高。主要表現在產(chǎn)酶菌株的菊粉酶產(chǎn)量低,提高了應用成本,制約了低聚果糖在食品工業(yè)和飼料工業(yè)中的應用。2)菊粉酶酶活測定及酶活力單位在定義上不統一,不利于研究者之間的交流和溝通。酶活力的測定方法對確定菊粉酶活力水平、特異性及歸類(lèi)有重要意義。但在菊粉酶活力測定方法及酶活力單位定義上尚未統一。多數菊粉酶活力測定報道,是以不同聚合度、純度和濃度的菊粉或蔗糖做底物,測定反應混合物在一定時(shí)間內還原糖的增加量。另外,內切型菊粉酶的酶解產(chǎn)物多為低聚果糖和少量果糖,所以按現有的酶活測定法及酶活定義,其酶活水平將普遍比外切型菊粉酶低。因此測定和活力單位定義標準的統一是急需解決的問(wèn)題

河南菊粉酶生產(chǎn)廠(chǎng)家提醒您請嚴格按照食品安全國家標準進(jìn)行使用

執行標準:根據《食品添加劑使用衛生標準》(GB 2760-2000)規定本品可在各類(lèi)食品中按正常生產(chǎn)需要適量使用。

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