(2)正交實(shí)驗結果
根據單要素實(shí)驗結果,正交實(shí)驗設計方案及結果見(jiàn)表1。
表1偏差數據顯示,水料比(C)對末水壇海菜含糖量獲取率危害較大 ,次之是獲取溫度(A),而獲取時(shí)間(B)對含糖量獲取率危害最少。末水壇海菜含糖量最佳獲取加工工藝為A2B2C1,按此加工工藝獲取含糖量,隨后用2%(mg/mL)的纖維素酶在45℃下水解反應60min除去蛋白質(zhì),含糖量獲取率是8.5%,高過(guò)表1中全部實(shí)驗結果。因而,超音波輔助水提末水壇海菜含糖量最佳加工工藝技術(shù)參數明確如下所示:獲取溫度65℃、獲取時(shí)間3.5min、水料比30:1(mL/g)。
2、番木瓜胰蛋白酶除去蛋白質(zhì)加工工藝提升結果
(1)單要素實(shí)驗結果
加酶量、水解反應溫度、水解反應時(shí)間三個(gè)要素對末水壇海菜含糖量獲取率的危害見(jiàn)圖2。
由圖2得知:①含糖量獲取率隨加酶量的提高而擴大,當加酶量超出2%(mg/mL)后,含糖量獲取率提升遲緩并日趨輕緩。這主要是因為在一定酶濃度值范疇內,底物蛋白質(zhì)水解率隨酶濃度值提高而顯著(zhù)增加,因此測出的含糖量濃度值也持續擴大,但當酶濃度值超出該范疇后,蛋白的水解反應率提升遲緩直到趨向均衡,這時(shí)測出的含糖量濃度值也慢慢平穩。②伴隨著(zhù)水解反應溫度的提升,含糖量獲取首先擴大后減少,在50℃時(shí),含糖量獲取率最大。這表明該溫度處在蛋白酶k的適宜反映溫度范圍內,這時(shí)蛋白質(zhì)水解率最大,因此測得含糖量濃度值最大。③伴隨著(zhù)水解反應時(shí)間的增加,含糖量獲取首先擴大后減少,表明在一定時(shí)間段內,蛋白質(zhì)水解率伴隨著(zhù)水解反應時(shí)間增加而提升,因此測出的含糖量濃度值也持續擴大,但時(shí)間太長(cháng)會(huì )造成蛋白酶k轉性降解,使蛋白質(zhì)水解率降低,此外長(cháng)期也會(huì )造成含糖量的溶解。
(2)正交實(shí)驗結果
根據單要素實(shí)驗結果,正交實(shí)驗設計方案及結果見(jiàn)表2。
表2偏差數據顯示,水解反應溫度(E)對末水壇海菜含糖量獲取率危害較大 ,加酶量(D)的知名度其次,而水解反應時(shí)間(F)對含糖量獲取率危害最少。蛋白酶k除去蛋白質(zhì)最佳加工工藝為D3E2F1。選用超音波輔助水說(shuō)法最佳加工工藝獲取含糖量后,再用D3E2F1加工工藝除去蛋白質(zhì),最后含糖量獲取率是9.6%,與表2中6號實(shí)驗結果9.5%基本上差不多。6號實(shí)驗加工工藝為D3E2F1,即加酶量為3%,從節省實(shí)驗試劑視角采用加酶量為2%的D3E2F1加工工藝更有效。最后明確蛋白酶k除去蛋白質(zhì)最佳加工工藝如下所示:加酶量2%(mg/mL)、水解反應溫度50℃、獲取時(shí)間60min。
三、結果與探討
(1)末水壇海菜做為壇海菜生產(chǎn)制造中的邊角料,經(jīng)濟價(jià)值較低。殊不知末水壇海菜中含糖量成分特別高,如能高效率獲取,則可進(jìn)一步提高末水壇海菜的增加值。充分考慮超音波粉碎體細胞后含糖量可溶出,及其蛋白酶k可高效率水解反應粗多糖中的蛋白,因此本探討選用超音波輔助水提一胰蛋白酶法獲取末水壇海菜含糖量,以求提升含糖量獲取率。
(2)最先根據單要素實(shí)驗考查了獲取溫度、獲取時(shí)間及水料比三個(gè)要素對含糖量獲取率的危害,并根據正交實(shí)驗得到了超音波輔助水提末水壇海菜含糖量的最佳加工工藝主要參數:獲取溫度65℃、獲取時(shí)間3.5min、水料比30:1(mL/g)。隨后,根據單要素實(shí)驗調查了加酶量、水解反應溫度及水解反應時(shí)間對含糖量獲取率的危害,并根據正交實(shí)驗得到了蛋白酶k除去蛋白質(zhì)的最佳加工工藝主要參數:加酶量2%(mg/mL)、水解反應溫度50℃、獲取時(shí)間60min。在以上最佳情況下獲取末水壇海菜含糖量,含糖量獲取率達9.5%?,F階段,參考文獻報導的海菜含糖量獲取率結果區別很大,如王賢等選用微波加熱法獲取末水壇海菜含糖量,獲取率是5.054%;張雙靈和吳瓊英等均選用微波加熱法獲取條斑海菜含糖量,獲取率各自為8.47%和5.358;而馬波等采取超音波輔助偏堿果膠酶獲取條斑海菜含糖量,得率為13.8%。由此可見(jiàn),超音波輔助水提-胰蛋白酶法是一種獲取海菜含糖量的有效的方式。
(3)末水壇海菜獲取含糖量后,邊角余料可再次用以獲取別的活力成份或立即作為化肥或精飼料,進(jìn)而使末水壇海菜獲得最高程度上運用。檢測分析末水壇海菜含糖量的分子質(zhì)量、構造構成以及生物活性,將是大家將來(lái)的分析關(guān)鍵。