為科學(xué)研究“兩燉一停”烤制加工工藝煙葉胰蛋白酶活力和蛋白質(zhì)含量變化規律與基本烤制轉變的差別，設定基本烤制（對比）和“兩燉一停”烤制2種烤制方法，科學(xué)研究烤制全過(guò)程煙草的胰蛋白酶活力和蛋白質(zhì)含量變化規律。2種烤制方法烤制全過(guò)程中胰蛋白酶活力均呈升-降-升-降的“雙鋒曲線(xiàn)圖”變化趨勢，第一個(gè)最高值出現在變黃期，第二個(gè)最高值出現在定色期，以第一個(gè)最高值的酶促反應高些；蛋白質(zhì)含量呈下降趨勢，在變黃期迅速降低，定色期遲緩降低，干筋期轉變并不大，均以變黃期為蛋白的關(guān)鍵溶解階段，溶解力度均在80%之上。

2種烤制方法中“兩燉一停”烤制2個(gè)最高值的酶促反應各自為208.5、199.26 U/mg，較對比高于19.46、30.63 U/mg，且最高值區段的酶促反應均值高些，延遲時(shí)間更長(cháng)，最高值發(fā)生也較對比晚；蛋白溶解以“兩燉一停”烤制的溶解力度更高，變黃期的溶解力度占總溶解力度的89.3%，較對比多8.5個(gè)點(diǎn)，烤后煙草蛋白質(zhì)含量也更低。由此可見(jiàn)，選用“兩燉一停”烤制的形式可提升煙草蛋白質(zhì)酶的活性及延遲時(shí)間，進(jìn)而更有利于蛋白溶解，降低烤后煙草的蛋白質(zhì)含量。

前言

煙草烤制全過(guò)程是在酶參加下的身理生物化學(xué)轉變全過(guò)程，而酶促反應的多少可以直接危害煙草含有物的溶解和轉換，進(jìn)而危害烤后煙草的成分成分。酶促反應除受鮮煙草素養危害，還遭受烤制全過(guò)程中溫度濕度的危害。蛋白是煙草中主要的成分之一，對煙草品質(zhì)有著(zhù)關(guān)鍵的危害?，F階段基本烤制中相關(guān)烤制全過(guò)程中酶促反應或成分的探討已經(jīng)有一些報導，但在烤制全過(guò)程中蛋白質(zhì)含量及胰蛋白酶活力科學(xué)研究的報導卻很少，對基本烤制和“兩燉一停”烤制方法的體系科學(xué)研究末見(jiàn)報導。小編較為基本烤制和“兩燉一停”烤制在烤制全過(guò)程中蛋白質(zhì)含量及胰蛋白酶活力的轉變，致力于為“兩燉一停”烤制加工工藝給予實(shí)驗根據，為煙葉烤制技術(shù)性的改善給予參照。

1 原材料與方式

1.1 實(shí)驗時(shí)間、地址

科學(xué)研究農業(yè)試驗于2017年4—9月在黔南州龍里縣灣灘河鎮開(kāi)展，房間內實(shí)驗在貴州大學(xué)作物科學(xué)試驗室開(kāi)展。黔南州龍里縣灣灘河鎮屬北亞熱帶季風(fēng)濕潤氣候，海拔高度1480 m，土壤質(zhì)地為黃壤、肥效中等水平，土壤層p H6.35，前茬空余。

1.2 實(shí)驗原材料

煙葉種類(lèi)為‘云霧87’，位置為中間葉。選用飄浮預苗，4月20日栽種，相對密度為16500株/hm2，施氮量為105 kg/hm2,N:P2O5:K2O為1:1:2.5，留葉數20片。完善采摘，中間葉主脈所有白，余脈1/3～2/3泛白，葉片5～6成黃。別的種植對策按本地高品質(zhì)煙種植技術(shù)規定開(kāi)展。

1.3 實(shí)驗方式

實(shí)驗設定2個(gè)解決，以基本聚集烤制為對比、“兩燉一停”聚集烤制（變黃后半期不除濕）為解決，實(shí)際設定見(jiàn)表1。在烤制全過(guò)程中每過(guò)6 h抽樣一次，測量煙草的蛋白質(zhì)含量（抽樣至168 h）和胰蛋白酶活力（抽樣至120 h）。

1.4 測定法

挑選一切正常完善煙草衣桿烤制，每一次任意從對比和解決烘干房抽樣15片（各層5片，即3次反復）。抽樣后馬上切掉葉子、葉基和主脈后按半葉法分成2份，一份放進(jìn)包裝袋放置-20℃自然環(huán)境中儲存，用以測量胰蛋白酶活力；另一份放置烘干箱中在105℃結束15 min后，80℃烘干處理后儲存，用以測量蛋白成分。抽樣進(jìn)行后統一送到貴州大學(xué)作物科學(xué)試驗室開(kāi)展測量，高錳酸鹽指數選用凱氏定氮法測量[25]，蛋白質(zhì)含量選用間接性法測算；胰蛋白酶活力選用紫外線(xiàn)酶活性測定[26]測量，常用胰蛋白酶測定試劑盒由南京建成生物技術(shù)研究室給予。

1.5 數據分析

數據信息選用Microsoft Excel 2019、SPSS 22數據信息統計分析軟件開(kāi)展剖析。

2 結果與剖析

2.1 烤制全過(guò)程中胰蛋白酶活力變化趨勢

由圖1由此可見(jiàn)，解決和對比烤制全過(guò)程中胰蛋白酶活力整體上的趨勢分析一致，均展現出上升—減少—上升—減少的“雙鋒曲線(xiàn)圖”，第一個(gè)最高值在變黃期(0～66 h)發(fā)生，第二個(gè)最高值在定色期(66～120 h)發(fā)生。對比第一個(gè)最高值酶促反應從18 h逐漸升高，在30 h做到極值后逐漸降低，42 h降至底點(diǎn)，這段時(shí)間酶促反應的平均數為81.47 U/mg；解決的酶促反應從18 h逐漸升高，在36 h做到極值后逐漸降低，48 h降至底點(diǎn)，這段時(shí)間酶促反應的平均數為99.17 U/mg。第二個(gè)最高值對比的酶促反應從60 h逐漸升高，在72 h做到極值后逐漸降低，78 h降至底點(diǎn)，這段時(shí)間酶促反應的平均數為98.22 U/mg；解決的酶促反應從66 h逐漸升高，在78 h做到極值后逐漸降低，90 h降至底點(diǎn)，這段時(shí)間酶促反應的平均數為114.27 U/mg。

從胰蛋白酶活力最高值較為，兩個(gè)最高值均以解決的酶促反應高些，各自為208.5、199.26 U/mg，各自較對比高19.46、30.63 U/mg，但發(fā)生較對比晚；從兩個(gè)環(huán)節均值看，也以解決的酶促反應高些，延遲時(shí)間更長(cháng)，全部全過(guò)程解決的酶促反應均值為74.66 U/mg，高于對比20.26 U/mg。綜上所述，2種烤制方法的酶促反應以“兩燉一停”烤制的酶促反應高些。