1.2.3前解決

稱(chēng)量試品(肝部、腎臟功能、全身肌肉)2g(精準至0.01g)于50mL聚丙稀離心管架中，添加混和放射性核素內標切削液100μL，冉添加2mL水，渦流混和1min。添加0.2％硫酸-乙腈水溶液10mL，200r/min震蕩10min，添加2g氧化鈉，再震蕩10min，5000r/min離心式5min。將所有上清液遷移至15mL聚丙稀離心管架并40℃氮吹至約5mL，添加100mgPSA、80mgC₁₈、30mgGCB，渦流混和1min，震蕩10min，5000r/min離心式10min。取所有上清液至另一個(gè)15mL聚丙稀離心管架中，40℃氮吹至近干，1mL工業(yè)甲醇滴定劑，15000r/min離心式5min，上清液供上機操作測量。

為降低試驗操作過(guò)程中產(chǎn)生的環(huán)境污染及環(huán)境影響，全過(guò)程盡量減少應用聚四氟乙烯容器而應用聚丙稀材料容器。

1.3方法學(xué)調查

1.3.1基質(zhì)效應

本試驗選用規范工作中溶液的配制：精確移取13種PFCs混和規范切削液、混和放射性核素內標切削液適當，用工業(yè)甲醇配置含量為0.05、0.1、0.5、1.0、2.0、5.0、10ng/mL(放射性核素內標MPFOA濃度值為1.5ng/mL、MPFOS濃度值為3.0ng/mL)的全系列規范工作中水溶液。MPFOA是定量分析9種PFCAs的放射性核素內標，MPFOS是定量分析4種PFSAs的放射性核素內標配置的全系列規范工作中水溶液，依照規范工作中溶液的配制：精確移取13種PFCs混和規范切削液、混和放射性核素內標切削液適當，用工業(yè)甲醇配置含量為0.05、0.1、0.5、1.0、2.0、5.0、10ng/mL(放射性核素內標MPFOA濃度值為1.5ng/mL、MPFOS濃度值為3.0ng/mL)的全系列規范工作中水溶液。MPFOA是定量分析9種PFCAs的放射性核素內標，MPFOS是定量分析4種PFSAs的放射性核素內標標準測量，制作標曲。與此同時(shí)，選擇9種空缺試品栽培基質(zhì)(生豬肉、牛肝、豬腰子、牛羊肉、豬肝、牛腎、牛肉、羊肝、羊腰)不用放射性核素內標依照稱(chēng)量試品(肝部、腎臟功能、全身肌肉)2g(精準至0.01g)于50mL聚丙稀離心管架中，添加混和放射性核素內標切削液100μL，冉添加2mL水，渦流混和1min。添加0.2％硫酸-乙腈水溶液10mL，200r/min震蕩10min，添加2g氧化鈉，再震蕩10min，5000r/min離心式5min。將所有上清液遷移至15mL聚丙稀離心管架并40℃氮吹至約5mL，添加100mgPSA、80mgC₁₈、30mgGCB，渦流混和1min，震蕩10min，5000r/min離心式10min。取所有上清液至另一個(gè)15mL聚丙稀離心管架中，40℃氮吹至近干，1mL工業(yè)甲醇滴定劑，15000r/min離心式5min，上清液供上機操作測量。

選用空缺栽培基質(zhì)水溶液做為有機溶劑配置同樣濃度值標準的系列產(chǎn)品栽培基質(zhì)規范工作中水溶液，依照離子交換柱：AtlantisT3離子交換柱(2.1mmx150mm，3μm)；流動(dòng)速度：0.3mL/min；柱溫：40℃；進(jìn)樣量：10μL；流動(dòng)性相：2.5mmol/L乙酸銨-甲醇溶液(A)(2.5mmol/L乙酸銨水溶液(B)；梯度方向過(guò)柱程序流程：0～3min，90％～40％B；3～12min，40％～10％B；12～14min，10％B；14～14.5min，10％-90％B；14.5～18min，90％B制作標曲。根據較為栽培基質(zhì)標曲與有機溶劑規范曲線(xiàn)方程切線(xiàn)斜率的比率來(lái)分辨基質(zhì)效應的危害。

1.3.2線(xiàn)形范同、方法檢出限、定量限

0.05、0.1、0.5、l、2、5、10ng/mL系列產(chǎn)品規范工作中水溶液依照離子交換柱：AtlantisT3離子交換柱(2.1mmx150mm，3μm)；流動(dòng)速度：0.3mL/min；柱溫：40℃；進(jìn)樣量：10μL；流動(dòng)性相：2.5mmol/L乙酸銨-甲醇溶液(A)(2.5mmol/L乙酸銨水溶液(B)；梯度方向過(guò)柱程序流程：0～3min，90％～40％B；3～12min，40％～10％B；12～14min，10％B；14～14.5min，10％-90％B；14.5～18min，90％B。電噴霧器離子源(ESI)；掃描儀方法：空氣負離子掃描儀；檢驗方法：多反映檢測(MRM)；噴霧器工作電壓：3500V；蒸汽溫度；290℃；正離子傳送管溫度：270℃；鞘氣流動(dòng)速度：30arb；輔助氣流動(dòng)速度：10arb；二級撞擊氣：氬氣；撞擊氣工作壓力：1.5mTorr標準測量，放射性核素內標法定量分析，以每個(gè)總體目標物與相應的放射性核素內標物的峰斷積比率為縱軸、以各總體目標物濃度值與與相應的放射性核素內標物的濃度值比率為橫坐標軸，求線(xiàn)性方程及相關(guān)系數r。依照GB/T27417-2017《合格評定化學(xué)分析方法確認和驗證指南》中5.4條文要求，在豬、牛、羊的肝部、腎臟功能、全身肌肉空缺試品栽培基質(zhì)中加上預計最少可接納濃度值0.15μg/kg，每一個(gè)試品平行測定10次，測算方法檢出限(LOD)=0 3SD、方式定量限(LOQ)=0 10SD。

1.3.3利用率和精度

依照GB/T27404-2008《實(shí)驗室質(zhì)量控制規范食品理化檢驗要求》，針對未制訂MRL限定的化學(xué)物質(zhì)，利用率試驗應在方式測量下限、普遍限定指標值、一個(gè)科學(xué)合理的加上濃度值三個(gè)水準開(kāi)展。本試驗選用在牛肝、豬肝、羊肝、豬腰子、牛腎、羊。腎、生豬肉、牛羊肉、牛肉9個(gè)不一樣栽培基質(zhì)空缺試品中加上0.2、1和2μg/kg三個(gè)濃度值，每一個(gè)濃度值6個(gè)平行面，稱(chēng)量試品(肝部、腎臟功能、全身肌肉)2g(精準至0.01g)于50mL聚丙稀離心管架中，添加混和放射性核素內標切削液100μL，冉添加2mL水，渦流混和1min。添加0.2％硫酸-乙腈水溶液10mL，200r/min震蕩10min，添加2g氧化鈉，再震蕩10min，5000r/min離心式5min。將所有上清液遷移至15mL聚丙稀離心管架并40℃氮吹至約5mL，添加100mgPSA、80mgC18、30mgGCB，渦流混和1min，震蕩10min，5000r/min離心式10min。取所有上清液至另一個(gè)15mL聚丙稀離心管架中，40℃氮吹至近干，1mL工業(yè)甲醇滴定劑，15000r/min離心式5min，上清液供上機操作測量。離子交換柱：AtlantisT3離子交換柱(2.1mmx150mm，3μm)；流動(dòng)速度：0.3mL/min；柱溫：40℃；進(jìn)樣量：10μL；流動(dòng)性相：2.5mmol/L乙酸銨-甲醇溶液(A)(2.5mmol/L乙酸銨水溶液(B)；梯度方向過(guò)柱程序流程：0～3min，90％～40％B；3～12min，40％～10％B；12～14min，10％B；14～14.5min，10％-90％B；14.5～18min，90％B。電噴霧器離子源(ESI)；掃描儀方法：空氣負離子掃描儀；檢驗方法：多反映檢測(MRM)；噴霧器工作電壓：3500V；蒸汽溫度；290℃C；正離子傳送管溫度：270℃；鞘氣流動(dòng)速度：30arb；輔助氣流動(dòng)速度：10arb；二級撞擊氣：氬氣；撞擊氣工作壓力：1.5mTorr；與此同時(shí)做空缺試驗，均扣減本底值后測算同成品率及精度。

1.4數據處理方法

選用英國ThermoFisherScientific公司Xcalibur3.0手機軟件、Origin8.0版本號開(kāi)展數據處理方法。

2.結果與剖析

2.1色譜儀和質(zhì)譜分析標準提升

2.1.1色譜儀標準提升

PFCs具備吸水性和疏水性及其一定的兩性離子和正負極，有關(guān)規范及參考文獻大部分采川較低硅甲基活力填充料的C18液相色譜儀柱分離出來(lái)、乙腈-乙酸銨溶液或工業(yè)甲醇-乙酸銨溶液流動(dòng)性相梯度方向過(guò)柱，來(lái)完成這類(lèi)物質(zhì)的優(yōu)良分離出來(lái)。本試驗關(guān)鍵調查二種流動(dòng)性相管理體系乙腈-乙酸銨溶液、工業(yè)甲醇-乙酸銨溶液對PFCs及放射性核素內標底敏感度差別。根據較為同樣濃度值標液峰而積(見(jiàn)圖1)發(fā)覺(jué)，二種流動(dòng)性相梯度方向過(guò)柱標準下，15種化學(xué)物質(zhì)峰形均銳利對稱(chēng)性。與乙腈-乙酸銨溶液流動(dòng)性相對比，以工業(yè)甲醇-乙酸銨溶液為流動(dòng)性相時(shí)，除PFBA峰總面積降低29％以外，別的14種化學(xué)物質(zhì)的色潛紛紛總面積提高了22％～151％。因此 ，本試驗挑選峰而積比較大、敏感度較高的工業(yè)甲醇-乙酸銨溶液做為流動(dòng)性相管理體系。

13種PFCs及2種放射性核素內標物為羧基或磺酸鹽，在流動(dòng)性看中添加乙酸銨，能使水溶液維持一定的pH及電離度，能夠合理地提高電噴霧器離子化響應值，并降低有機溶劑效用，改進(jìn)峰形。但也是有研究表明，較濃度較高的的乙酸銨對質(zhì)譜檢測有極強的抑制效果。規范及參考文獻中常用的乙酸銨濃度值為1～10mmol/L，本試驗以工業(yè)甲醇和水為有機溶劑，各自配置同樣濃度值的乙酸銨甲醇溶液及乙酸銨溶液。根據較為1、2.5、5、10mmol/L四個(gè)不一樣濃度值情況下的檢測結果(見(jiàn)圖2)能夠 看得出，PFOS和PFDoA在1、2.5mmol/L濃度值的峰總面積較高且基本上相同，其他13種化學(xué)物質(zhì)均在乙酸銨濃度值為2.5mmol/L時(shí)，色譜儀峰總面積做到最高值。