因而，本試驗選用AtlantisT3離子交換柱，以2.5mmol/L乙酸銨甲醇溶液-2.5mmol/L乙酸銨溶液開(kāi)展梯度方向過(guò)柱。圖3由此可見(jiàn)15種化學(xué)物質(zhì)在12min內所有排出，日標化學(xué)物質(zhì)保存期適度，峰總面積、頻率穩定度較高，雜峰回應較??；在空缺栽培基質(zhì)中加上日標化學(xué)物質(zhì)，在以上檢驗標準下，譜圖無(wú)影響雜峰，13種PFCs回應好。隨碳鏈的提升，PFCs在C₁₈柱上的保存慢慢提高，同一碳鏈數全氟磺酸類(lèi)物質(zhì)保存強過(guò)全氟羧基類(lèi)物質(zhì)。PFBA最開(kāi)始排出，PFDoS最終排出。

2.1.2質(zhì)譜分析標準挑選

PFCs化學(xué)結構中具備羧基或磺酸基，因而選用空氣負離子方式檢驗。本試驗選用流動(dòng)性注入氣相方法，各自對5μg/mL標液開(kāi)展m/z200-1000ESI一級全掃捕，南試驗結果發(fā)覺(jué)，PFCs關(guān)鍵以水解后喪失甲基上氫原子[M-H]^–最強，明確其為標準分子離子，并提升噴霧器工作電壓、蒸汽溫度、正離子傳送管溫度以得到極強的響應值。下面，以其做為母正離子開(kāi)展子離子掃描儀并提升撞擊動(dòng)能，明確判定正離子和定量分析正離子。在研究操作過(guò)程中，PFCAs轉化成[M-H-44]^–子離子，推論是PFCAs產(chǎn)生中性化遺失CO₂造成；PFSAs轉化成m/z99和m/z80子離子，推論是PFSAs破裂轉化成[FSO₃]和[SO₃]^–。此次試驗選是PFSAs破裂轉化成[FSO₃]和[SO₃]。此次試驗選擇進(jìn)化速率較高且影響較少的子離子[M-H-44]-和[SO₃]^–各自做為PFCAs和PFSAs的定量分析正離子。

2.2前解決提升

對于小動(dòng)物原性食品類(lèi)(肝部、腎臟功能、全身肌肉)栽培基質(zhì)繁雜、帶有大量的蛋白及內源化學(xué)物質(zhì)等特性，本探討選用改進(jìn)的QuEChERS試品前解決方式，堿化乙腈獲取，C₁₈、PSA和GCB混和吸收劑分散化固相蒂取凈化處理，降低栽培基質(zhì)巾殘渣影響、提升利用率。

2.2.1獲取有機溶劑提升

已報導的參考文獻中選用乙腈、硫酸-乙腈做為獲取有機溶劑獲取小動(dòng)物原性食品類(lèi)的肌肉組織和肝部栽培基質(zhì)中的PFCs。由于乙腈是較常用的小動(dòng)物原性食品類(lèi)有機化學(xué)獲取有機溶劑，并且PFCs是酸堿性化學(xué)物質(zhì)，在酸堿性條件下呈非離解情況，有益于進(jìn)到有機相，因此本試驗挑選硫酸-乙腈做為獲取有機溶劑。

與此同時(shí)，調查了0.05％、0.1％、0.2％、0.3％網(wǎng)個(gè)不一樣濃度值硫酸-乙腈對各種動(dòng)物原性食品類(lèi)中13種PFCs的獲取同成品率。圖4結果顯示，在0.05％～0.3％范同內，9種PFCAs的利用率基本上是逐步提升發(fā)展趨勢，4種勢，0.1％、0.2％、0.3％硫酸-乙腈的利用率均在有效范疇內，各自為76.3％～114.6％、95.3％～119.4％、85.8％～118.9％。以上三個(gè)濃度值全是適合的獲取濃度值，但0.2％硫酸-乙腈的利用率較集中化，遍布在95％～120％之問(wèn)，最少利用率95.3％均超過(guò)其它2個(gè)濃度值；與此同時(shí)為防止提升硫酸使用量對事后剖析造成十擾，因此 挑選0.2％硫酸-乙腈做為獲取有機溶劑。在提煉全過(guò)程中，0.2％硫酸-乙腈使試品栽培基質(zhì)中很多蛋白質(zhì)水解產(chǎn)生沉積，并利用快速離心式除去。但含脂量較高的試樣開(kāi)展蛋白沉淀時(shí)，易將試樣中的脂質(zhì)和水溶殘渣也獲取出去，導致萃取液渾濁，很有可能對LC-MS/MS剖析造成栽培基質(zhì)影響，因而對萃取液要進(jìn)一步凈化處理。

2.2.2凈化處理方法提升

QuEChERS方式是采用分散化固相葦取技術(shù)性?xún)艋幚?，根據將固相吸收劑立即添加到試品萃取液中做到吸咐影響成分的目地。小?dòng)物原性食品類(lèi)中存有蛋白、糖類(lèi)與碳水化合物、黑色素、人體脂肪、谷甾醇等化學(xué)物質(zhì)，能夠利用使用不一樣種類(lèi)吸收劑做到清潔實(shí)際效果。已經(jīng)有參考文獻采用C₁₈、PSA、GCB三種吸收劑單一或不一樣配制開(kāi)展PFCs凈化處理，但存有試品栽培基質(zhì)類(lèi)型較少或檢驗新項目少等缺陷。本試驗較為了3種吸收劑單一和混和方法對各種動(dòng)物原性食品類(lèi)的肝部、腎臟功能和全身肌肉中多種多樣PFCs的清潔作用及利用率。

2.2.2.1C₁₈提升

C₁₈關(guān)鍵吸咐人體脂肪和脂類(lèi)等非極性共萃物。根據在空缺試品中加上總體目標物，做2μg/kg加上濃度值3個(gè)平行面，較為40～100mg單一吸收劑C₁₈對PFCs利用率的危害，發(fā)覺(jué)伴隨著(zhù)C₁₈使用量由40mg提升到80mg，同成品率亦提升，在80mg做到88.4％～116.3％(見(jiàn)圖5)；由80mg提升到100mg，大部分PFCAs利用率基本上維持不會(huì )改變，4種PFSAs和PFHpA、PFDA利用率有一定的降低，但13種PFCs利用率仍處在85.5％～118.0％的有效范疇(見(jiàn)圖5)。因而選用有效同成品率的最少使用量80mg。但凈化處理后的溶劑有黑色素殘余，會(huì )環(huán)境污染色涪柱及測試儀器，必須進(jìn)一步除去黑色素。

2.2.2.2PSA優(yōu)化

PSA是一種弱陰離子交換劑，能夠吸咐糖類(lèi)與碳水化合物、有機物、小量黑色素等正負極影響化學(xué)物質(zhì)。在空缺試品中加上日標物，做2μg/kg加上濃度值3個(gè)平行面，在80mgC₁₈凈化處理基本上，與此同時(shí)添加80～140mgPSA觀(guān)查PFCs的叫成品率轉變狀況。由圖6能夠 獲知伴隨著(zhù)PSA使用量的提升，PFCAs利用率呈先升高后下降趨勢，并在100、120mg時(shí)利用率做到有效最高值；PFSAs同成品率呈下降趨勢，80、100mg同成品率是83.9％～92.1％。綜合性考慮到，挑選100mgPSA為最好使用量。但凈化處理后的溶劑有黑色素殘余，必須添加GCB除去。