在國家標準GB5009.22—2016方式1：放射性核素稀釋液液相色譜儀-串聯(lián)質(zhì)譜法的根基上開(kāi)展了方式提升、改善，創(chuàng )建了制酒原材料及純糧酒中黃曲霉B1（AFTB1）的統計分析方法。試品經(jīng)工業(yè)甲醇∶水（7∶3）獲取后，凈化處理封閉液由TritionX-100的PBS改成超純水系統，粘度縮小、便于根據提純小柱。流動(dòng)性相改成工業(yè)甲醇和0.02%苯甲酸-2mmol／L乙酸銨，提升 了回應抗壓強度。梯度方向過(guò)柱，經(jīng)高效率液相色譜儀分離出來(lái)，在ESI共價(jià)鍵方式下掃描儀，開(kāi)展多反映檢測方式（MRM）檢驗。

結果顯示，儀器設備精度優(yōu)良，不一樣濃度值標高效液相對標準誤差（RSD%）均<6%；所制作校準曲線(xiàn)線(xiàn)性相關(guān)優(yōu)良，0.05～10µg／L范疇內相關(guān)系數r值>0.999；方式定量限為0.05µg／kg，方法檢出限<0.01μg／kg，均小于別的檢查方式。原材料與純糧酒的加標回收率都是在90%～105%，徹底符合規定。此方法檢出限低、精確度高，提升了公司對AFTB1的嚴苛監管。

釀造酒原材料具體有高粱米、麥籽、麥子、扁豆等，因制酒原材料使用量很大，釀酒廠(chǎng)一般對原材料大批量選購，開(kāi)展儲存應用，一旦選購原材料存有事故隱患或儲存不合理導致發(fā)霉，將造成一些對身體危害的霉菌毒素類(lèi)化合物，在其中黃曲霉B1（AFTB1）對身體健康的傷害較大，為強毒副作用、強致癌物質(zhì)化學(xué)物質(zhì)，已被世衛組織癌病組織（IARC）納入一級致癌物。

為了更好地嚴控黃曲霉對身體的損害風(fēng)險性，進(jìn)而保證顧客的安全性，英國、日本、澳大利亞等眾多我國已公布了相關(guān)黃曲霉較大限定量的要求，在我國GB2761—2017《食品安全國家標準食品中真菌毒素限量》規范中也規定了糧食作物中的真菌毒素B1的較大限定，鳳香型制酒原材料（高粱米、麥籽、麥子、扁豆）中的較大限定各自為10µg／kg、5µg／kg、5µg／kg、5µg／kg。即便如此，但依然存有一定的風(fēng)險性，因而創(chuàng )建精確、高效率的檢查方式至關(guān)重要。

現階段針對黃曲霉的檢查辦法具體有液相色譜儀-瑩光測定法、酶聯(lián)免疫吸咐篩選法、高光譜檢測法、薄層色譜法、放射性核素稀釋液液質(zhì)聯(lián)用法等。本科學(xué)研究創(chuàng )建了制酒原材料及純糧酒中AFTB1的液質(zhì)聯(lián)用（HPLC-MS／MS）測定法。該方式試品前解決較簡(jiǎn)易、檢驗高效率、精確度高、檢出限更低，進(jìn)一步達到了顧客對食品衛生安全高些的希望和我國對食品安全檢測更嚴的規定。

1原材料與方式

1.1原材料、實(shí)驗試劑與儀器設備

試品：原材料（高粱米、麥籽、麥子），制成品酒源自于陜西西鳳酒股權有限責任公司。

實(shí)驗試劑：苯甲酸、乙腈、工業(yè)甲醇、乙酸銨（分析純）、超純水系統。

實(shí)驗儀器：高效率液相色譜儀串連質(zhì)譜儀器，十分天平秤，氮吹儀，免疫力親和柱。

標準物質(zhì)：黃曲霉B1（AFTB1純凈度≥98%），放射性核素內標13C17-AFTB1（純凈度≥98%）。

1.2規范溶液的配制

AFTB1規范貯備液：稱(chēng)量AFTB1為1.0mg，用乙腈滴定劑至100mL容量瓶，配置成10µg／mL規范貯備液。

放射性核素內標13C17-AFTB1切削液：精確移取0.5µg／mL的13C17-AFTB10.8mL，用乙腈滴定劑至10mL，配置成40ng／mL的放射性核素內標切削液。

AFTB1系列產(chǎn)品規范切削液：移取AFTB1規范貯備液1.0mL至100mL容量瓶中，用乙腈滴定劑，配置成100ng／mL的AFTB1正中間規范液。再各自移取AFTB1正中間規范液5µL、10µL、50µL、100µL、200µL、500µL、800µL、1000µL至10mL容量瓶中，各自加500µL的40ng／mL放射性核素內標切削液，用原始流動(dòng)性相滴定劑，配置成含量為0.05ng／mL、0.1ng／mL、0.5ng／mL、1.0ng／mL、2.0ng／mL、5.0ng／mL、8.0ng／mL、10.0ng／mL的全系列規范切削液，過(guò)0.22µm濾紙，待上機操作。

1.3儀器設備主要參數標準

高效液相標準：離子交換柱：Shin-packXR-ODSIIIC18（2.0mmI.D*150mmL.，3.0μm）；進(jìn)樣量：10µL；流動(dòng)性相：A：0.02%苯甲酸-2mmol／L乙酸銨，B：工業(yè)甲醇；柱溫：40℃；流動(dòng)速度：0.3mL／min；停留時(shí)間：10ms。過(guò)柱方法：梯度方向過(guò)柱，見(jiàn)表1。

質(zhì)譜分析標準：掃描儀方法：多級別反映檢測（MRM）；離子源：ESI，共價(jià)鍵方式；加溫塊溫度：450℃；DL溫度：250℃；做霧化氣流動(dòng)速度：3.0L／min；干躁氣流動(dòng)速度：15L／min；離子源插口工作電壓 4.5；停留時(shí)間：10ms。

1.4實(shí)驗方式

1.4.1試品獲取

制酒原材料：精確稱(chēng)量制酒原材料5g試品于50mL離心管架中，添加250µL放射性核素內標切削液，漩渦震蕩攪拌，添加20mL工業(yè)甲醇-水（70 30），渦流攪拌，靜放30min完用均質(zhì)器勻質(zhì)3min，過(guò)玻纖過(guò)濾紙。精確移取滲瀝液4mL添加12mL的超純水系統，混和勻稱(chēng)，待凈化處理。

酒樣：稱(chēng)量2g酒樣，添加100µL放射性核素內標切削液，添加4mL水，震蕩攪拌，待凈化處理。

1.4.2凈化處理

原材料：待免疫力親和柱維護流液盡后添加以上水溶液，以1滴／s的水流量根據免疫力親和柱，流完完用2×10mL超純水系統滲濾免疫力親和柱，當然作用力流盡后擠干小柱，精確添加2×0.5mL工業(yè)甲醇過(guò)柱，加上1mL水擠干，搜集于色度試管嬰兒中，過(guò)0.22µm有機濾膜，待上機操作。

酒樣：待免疫力親和柱維護流液盡后添加1.4.1中酒樣水溶液，當然作用力下滴，流完后加10mL雙蒸水滲濾柱頭，擠干；加2×0.5mL工業(yè)甲醇過(guò)柱，加上1mL水擠干，搜集于色度試管嬰兒中，過(guò)0.22µm有機濾膜，待上機操作。