卷心菜別名赤洋白菜、紅洋白菜，歸屬于十字花科，蕓薹屬洋白菜種的一個(gè)變異。十字花科綠色植物之中帶有比較充足的多酚類(lèi)物質(zhì)，卷心菜中的多酚類(lèi)主要是原花青素，原花青素在綠色植物身體關(guān)鍵以糖苷的方式存有，卷心菜中的花色苷類(lèi)物質(zhì)關(guān)鍵為矢車(chē)菊黑色素的糖苷。原花青素有著(zhù)抗氧化性、防癌和降血脂等人體生理活力，與此同時(shí)卷心菜原花青素在酸堿性到中性化范疇內能夠 保持色調由紅到紫的變化，能夠普遍使用于糖塊、飲品等食品生產(chǎn)之中，因而將卷心菜原花青素開(kāi)發(fā)設計變成食用添加劑具備很高的社會(huì )價(jià)值和經(jīng)濟收益。

雙水相提純是一種新式的成分分離出來(lái)技術(shù)性，與傳統式分離出來(lái)方式對比，具備標準柔和、商品活力損害小、分離出來(lái)流程少、無(wú)有機溶液殘余、實(shí)際操作簡(jiǎn)便等優(yōu)勢，世界各國廣泛運用于蛋白的提純和抗菌素的獲取，近幾年來(lái)慢慢運用于天然色素的分離純化科學(xué)研究，中國針對應用雙水相提純提純卷心菜黑色素的分析相比較少，海外有相應的報導，但尚未對其提純標準開(kāi)展提升。

卷心菜黑色素生產(chǎn)制造時(shí)，粗提液中包含大量的的糖原殘渣，巨大地危害了色素沉著(zhù)的質(zhì)量和可靠性。傳統式工業(yè)生產(chǎn)針對綠色植物原花青素的獲取關(guān)鍵選用酸浸水說(shuō)法、有機溶劑法，也有超音波法?；ㄉ账芤褐邪罅康牡膯翁?、二元糖、低聚木糖和含糖量等殘渣?，F階段，柱色譜儀、快速倒流色譜儀和孔眼吸附樹(shù)脂廣泛運用于原花青素的分離出來(lái)、提純，能夠完成黑色素與其說(shuō)糖原成分的分離出來(lái)，但與雙水相提純對比，成本費較高、時(shí)間較長(cháng)、對操控規定嚴苛。因而應用雙水相提純的辦法完成綠色植物原花青素與其說(shuō)糖原殘渣的分離出來(lái)歸屬于一種新式、迅速、成本低的操控方法。本科學(xué)研究試著(zhù)應用雙水相提純技術(shù)性，將卷心菜黑色素與糖原化學(xué)物質(zhì)分離出來(lái)，根據可選擇性指數表現此辦法的實(shí)效性。

一、原材料和方式

1、實(shí)驗室儀器

pH211酸度計；TDL-60B低速檔大空間離心脫水機；HY-6兩層震蕩器；752S紫外線(xiàn)由此可見(jiàn)光度計；AR1530分析天平秤。

2、試驗原材料

卷心菜；PEG6000配置成400g／L；甲酸為優(yōu)級純；別的實(shí)驗試劑均為分析純。

3、統計分析方法

（1）卷心菜黑色素歸屬于花色苷類(lèi)，依照英國化學(xué)工程師研究會(huì )（AOAC）對原花青素類(lèi)天然色素中花色苷總產(chǎn)量的辦法完成測量，以矢車(chē)菊-3-葡萄糖水苷計。

式中：

OD值A=（A₅₂₀-A₇₀₀）_pH1.0-（A₅₂₀-A₇₀₀）_pH4.5

M：矢車(chē)菊-3-葡萄糖水苷的摩爾質(zhì)量，449.2g／mol；

D：試品貯備液的稀釋倍數；

1：激光光路長(cháng)，cm，檢測中選用1cm激光光路長(cháng)的比色皿；

ε：26900，矢車(chē)菊-3-葡萄糖水苷的克分子消光系數，L·mol^-1·cm^-1；

1000：由g計算成mg的變換指數。

（2）應用甲酸-鹽酸法對左右看中總糖成分開(kāi)展測量。

（3）可選擇性指數k的測算。

式中：

K_花：原花青素的擴散系數；

K_糖：含糖量的擴散系數；

C_里花：上看中原花青素的濃度值，mg／L；

C_下花：下看中原花青素的濃度值，mg／L；

C_上糖：上看中糖原成分的濃度值，mg／mL；

C_下糖：下看中糖原成分的濃度值，mg／mL。

4、實(shí)驗方式

（1）卷心菜黑色素粗提液制取

加入適量卷心菜清洗、剁碎，應用果汁機壓榨原汁，100目壓濾機濾布過(guò)慮，3000r／min離心式15min，取頂層清夜冷凍儲存，應用前調pH。

（2）雙水相管理體系創(chuàng )建

固定不動(dòng)管理體系品質(zhì)為30.0g。在50mL離心管架中分別添加一定品質(zhì)的硫酸銨和PEG6000源液，添加一定品質(zhì)事先調過(guò)pH的黑色素粗提液，放水補至管理體系品質(zhì)為30.0g，放置震蕩器上300r／min于常溫下波動(dòng)10min后取出，載入左右相容積，用容量瓶各自移取左右相水溶液于30mL比色管中。

（3）花色苷成分的測量

高精密汲取左右相水溶液，各自用pH=1.0的氯化鉀緩沖液和pH=4.5乙酸鈉緩沖液稀釋液適度倍率，以純凈水做空缺，各自在520nm和700nm下測吸光度值。測算左右看中花色苷成分，而測算出K_花。在700nm光波長(cháng)下測量OD值值是為了更好地校準渾濁對檢測效果的影響。

（4）含糖量成分的測量

以葡萄糖水為對比，選用甲酸-鹽酸測定方法含糖量的成分。線(xiàn)性回歸方程為：y=8.1114x-0.0069，R²=0.9983。各自高精密汲取左右相試品封閉液1.0mL于試管嬰兒中，添加5%的甲酸水溶液1.0mL，快速添加硫酸水溶液5.0mL，混勻，置放10min后于40℃水浴加熱10min，取下后冷水澡5min，以相對應實(shí)驗試劑為空缺，在490nm處測量OD值，測算獲得K_糖。

（5）正交試驗設計方案

因為各要素（即硫酸銨質(zhì)量濃度、PEG的質(zhì)量濃度、管理體系pH、粗提液質(zhì)量濃度）中間有互相協(xié)同效應，如表1所顯示，開(kāi)展正交試驗并剖析，圖1中硫酸銨的含量在最大值18%時(shí)，可選擇性指數較大，因而正交試驗設計方案硫酸銨濃度值再次提高，為18%、19%、20%三個(gè)水準。

二、結果與探討

1、單要素試驗

（1）硫酸銨的質(zhì)量濃度對可選擇性指數k的危害在50mL離心管架中添加15.0gPEG6000源液，4.2g黑色素粗提液，各自添加3.0g、3.6g、4.2g、4.8g、5.4g硫酸銨，調整管理體系pH為5，雙水相提純結果如圖所示1所顯示。

由圖1得知，伴隨著(zhù)硫酸銨質(zhì)量濃度的提升，可選擇性指數k呈持續上升發(fā)展趨勢，可選擇性指數在硫酸銨質(zhì)量濃度為18%時(shí)到達最大。伴隨著(zhù)硫酸銨質(zhì)量濃度的提升，提高了左右兩相化學(xué)物質(zhì)的分相，提升了上看中原花青素的濃度值，與此同時(shí)增強了糖原殘渣在下相的成分，提升了對黑色素的提純水平。