③含乳的飲品

精確取2～5g（精準至0.0001g）試品，添加1.0mL亞鐵氰化鉀水溶液和1.0mL乙酸鋅水溶液，混勻，放水滴定劑至10mL，渦流攪拌，5000r/min離心式5min，取上清液經(jīng)0.22μm微孔濾膜過(guò)慮，預留。

（2）標曲的制做

將規范系列產(chǎn)品水溶液經(jīng)0.22μm微孔濾膜過(guò)慮，各自引入液相色譜儀-串連質(zhì)譜儀器中，測量對應的峰總面積，以規范切削液的含量為橫坐標軸，以峰總面積為縱軸，制作標曲。

③試件水溶液的測量

將試件水溶液引入液相色譜儀-串連質(zhì)譜儀器中，以保存期判定，與此同時(shí)紀錄峰總面積，依據標曲獲得待測液中3種添加物的濃度值。

判定分辨：試件中總體目標化學(xué)物質(zhì)色譜儀峰的保存期與規范色譜儀峰的保存期一致，轉變范疇應在（±2.5%）以?xún)?。被測化學(xué)物質(zhì)的判定正離子的重新構建離子色譜儀峰的頻率穩定度應≥3（S/N≥3），定量分析正離子的重新構建離子色譜儀峰的頻率穩定度應≥10（S/N≥10）。

總體目標化學(xué)物質(zhì)的質(zhì)譜分析判定正離子務(wù)必發(fā)生，最少應包含一個(gè)母正離子和2個(gè)子離子（甜蜜素為一個(gè)母正離子和一個(gè)子離子），且同一檢驗批號，對同一化學(xué)物質(zhì)，試品中總體目標化學(xué)物質(zhì)的2個(gè)子離子的相對豐度比與濃度值非常的標液對比，其準許誤差不超過(guò)要求的范疇。

式中：x——試品中被測成分的成分（μg/kg）；

C——測量液中被測成分的濃度值（μg/L）；

C₀——空缺中被測成分的濃度值（μg/L）；

V——滴定劑容積（mL）；

M——試品稱(chēng)樣量（g）。

二、結果與探討

1、流動(dòng)性相挑選

試驗中調查采用0.05%氫氧化鈉-工業(yè)甲醇、5mmol/L乙酸銨-工業(yè)甲醇、10mmol/L乙酸銨-工業(yè)甲醇作流動(dòng)性相，試驗說(shuō)明0.05%氫氧化鈉-工業(yè)甲醇做為流動(dòng)性相三種總體目標物回應最大，10mmol/L乙酸銨-工業(yè)甲醇作流動(dòng)性相三種總體目標物回應最少。圖2為1.0mg/L混和標液在不一樣流動(dòng)性看中的響應值。參考文獻報導中流動(dòng)性相采用溶液，如10mmol/L乙酸銨、甲酸銨-乙腈，文中常用設備為WatersAcquityUPLC-XEVOTQD，若應用10mmol/L乙酸銨-工業(yè)甲醇做為流動(dòng)性相，在儀器設備Intellistart作用中并無(wú)法尋找總體目標化學(xué)物質(zhì)的MRM，手動(dòng)式提升發(fā)覺(jué)總體目標化學(xué)物質(zhì)MRM回應很低。若應用5mmol/L乙酸銨-工業(yè)甲醇做為流動(dòng)性相Intellistart作用中并能夠 尋找總體目標化學(xué)物質(zhì)的MRM，但與應用0.05%氫氧化鈉-工業(yè)甲醇做為流動(dòng)性相對比，正離子回應較低，XEVOTQD在空氣負離子方式下，偏堿自然環(huán)境更有益于化學(xué)物質(zhì)去氫轉化成空氣負離子，因此原文中采用0.05%氫氧化鈉-工業(yè)甲醇做為流動(dòng)性相。

2、含乳飲料試品前解決的提升

試品不經(jīng)過(guò)凈化處理解決，栽培基質(zhì)抑制效應顯著(zhù)，因而試驗中調查用三氯乙酸水溶液（1g/L）、PSA分散化固相萃取、乙酸鋅-亞鐵氰化鉀凈化處理試品。三氯乙酸水溶液是有效的蛋白質(zhì)混凝劑，但三氯乙酸吸電子效應顯著(zhù)，不利三種總體目標化學(xué)物質(zhì)脫氫水解。PSA固相吸收劑，與NH2類(lèi)似的吸收劑，有兩個(gè)羥基，比羥基柱更強的離子交換法工作能力，弱陽(yáng)離子互換（水溶栽培基質(zhì)），用以除去有機物、黑色素和金屬離子。用PSA分散化固相萃取能夠 有效的除去飲品中的除去有機物、黑色素和金屬離子，但它一起也會(huì )吸咐一部分糖精鈉和安賽蜜（見(jiàn)圖3），因此一般試品經(jīng)過(guò)濾系統后立即測量糖精鈉與安賽蜜成分，經(jīng)PSA分散化固相萃取后過(guò)慮測量甜蜜素成分，0.3～0.5gPSA使用量能夠 獲得不錯的利用率。

2Zn² ［Fe（CN）6］⁴ =Zn₂［Fe（CN）6］↓（乳白色），乙酸鋅與亞鐵氰化鉀反映產(chǎn)生的氰亞鐵酸鋅沉積來(lái)挾走或吸咐影響化學(xué)物質(zhì)，這類(lèi)回應劑除蛋白工作能力強，但褪色能力較差。試驗中調查混凝劑的使用量：各自用乙酸鋅-亞鐵氰化鉀0.5～0.5mL、0.75～0.75mL、1.0～1.0mL、2.0～2.0mL、1.0～2.0mL（質(zhì)量摩爾濃度比例1∶2）和2.0～1.0mL（質(zhì)量摩爾濃度比例4∶1）解決5.0g試品，試驗說(shuō)明僅有當氰亞鐵酸鋅成分做到0.00075moL時(shí)，且依照有機化學(xué)計量檢定反映占比添加混凝劑，三種化學(xué)物質(zhì)的利用率才不錯（見(jiàn)圖4），但太多的溶液進(jìn)到UPLC/MS/MS系統軟件會(huì )在錐空上堆積，危害水解高效率，因此本試驗采用混凝劑使用量為：乙酸鋅0.0002moL，亞鐵氰化鉀0.0001moL。對別的含乳試品能夠 參照本試驗挑選適宜的混凝劑使用量。

3、方式線(xiàn)性方程、方法檢出限和定量限

3種化學(xué)物質(zhì)工作中標曲見(jiàn)表3，安賽蜜和甜蜜素在5～200μg/L范疇內，人造糖在20～200μg/L范疇內，線(xiàn)形相關(guān)系數r＞0.995，20μg/L和200μg/L標液持續氣相6次，精度為8.6%和5.4%，方法檢出限（S/N=3）為0.2～10μg/kg，方式定量限（S/N=10）為0.6～30μg/kg，見(jiàn)表3。

4、試品加標回收試驗

3種化學(xué)物質(zhì)在自制奶茶中三個(gè)等級加上量的利用率為78.9%～95.7%，在某知名品牌水果茶中三個(gè)等級加上量的利用率為80%～102%，回收利用優(yōu)良。見(jiàn)表4。

5、試品檢驗結果

測量5份定形包裝飲品與5份自制奶茶均未驗出3種添加物。

三、結果

文中創(chuàng )建UPLC/MS/MS測定方法飲品品中的甜蜜素、糖精鈉和安賽蜜的檢查方式 ，即一般試品經(jīng)過(guò)慮解決，檢驗試樣中的人造糖和安賽蜜的成分；經(jīng)PSA分散型固相萃取后，檢驗試樣中甜蜜素成分；含乳試品經(jīng)乙酸鋅-亞鐵氰化鉀去蛋白質(zhì)解決；用0.05%氫氧化鈉-工業(yè)甲醇做流動(dòng)性相，空氣負離子方式收集。與其它統計分析方法對比，實(shí)際操作簡(jiǎn)易，方法檢出限低，再現性好，利用率優(yōu)良，影響小，防止甜蜜素衍化反映，清除試品基材抑制效應，適用飲品試品中3種添加物的測量。