目地選用HPLC測定方法不一樣原產(chǎn)地和不一樣生長(cháng)發(fā)育年代北蒼術(shù)[Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.]中赤芍素的成分。方式搜集不一樣來(lái)源的北蒼術(shù)試品,以工業(yè)甲醇為有機溶劑,選用超聲波獲取法獲取,選用HPLC測定方法赤芍素的成分,采用DiamonsilC18(250mm×4.6mm,5μL)離子交換柱,流動(dòng)性相為工業(yè)甲醇-水(79∶21),檢驗光波長(cháng)為340nm,流動(dòng)速度1mL/min,柱溫25℃,進(jìn)樣量20μL。結果赤芍素的線(xiàn)形范疇為0.1875~0.6000mg/mL,方式精度、可重復性、可靠性?xún)?yōu)良;加樣利用率為95.4%。不一樣原產(chǎn)地北蒼術(shù)中赤芍素的成分為0.3232%~0.5959%,阿榮旗產(chǎn)北蒼術(shù)中藥飲片中赤芍素成分最大。3年生、4年生、5年生蒼術(shù)中赤芍素的成分各自為:(0.3500±0.0048)%、(0.4550±0.0030)%、(0.3350±0.0118)%。結果本方式簡(jiǎn)單、迅速、精確,適用北蒼術(shù)中赤芍素的含水量測量。
2015年版《中國藥典》要求,赤芍的主要來(lái)源有2種,分別是茅蒼術(shù)(Atractylodeslancea(Thunb.)DC)和北蒼術(shù)(Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.)。茅蒼術(shù)關(guān)鍵產(chǎn)自江蘇省、湖北省、河南省等??;北蒼術(shù)關(guān)鍵產(chǎn)于內蒙古、山西省、黑龍江省、吉林省等省。研究表明赤芍的關(guān)鍵成分為高壓聚乙烯炔和倍半萜類(lèi)物質(zhì),具備防癌、抗菌、抗病毒治療等藥用價(jià)值,臨床醫學(xué)上常見(jiàn)于病毒性感染疾病的治療。北蒼術(shù)的原綠色植物遍布范圍普遍,全國各地環(huán)境要素各有不同,危害赤芍中草藥的品質(zhì)。本科學(xué)研究創(chuàng )建了HPLC法,測量不一樣來(lái)源于北蒼術(shù)中赤芍素的成分,現報導如下所示。
1儀器設備與試藥
1.1儀器設備
Waters2695型液相色譜(沃特世高新科技有限責任公司),MDF-492型超低溫冰箱(日本三洋公司),DFT200C型快速多用途破碎機(永康市敏業(yè)物資貿易有限責任公司),CPX3800H-C型超聲波清洗機(日本BRAN-SONIC企業(yè)),DHG-9240A型控溫鼓風(fēng)干燥箱(常州市國旺儀器設備生產(chǎn)制造有限責任公司),PALL水提純系統軟件(英國PallCorporation企業(yè)),ML203T/02型十萬(wàn)級電子分析天平(法國梅特勒-托利多儀器設備有限責任公司),MDF-492型超低溫冰箱(日本三洋公司)。
1.2實(shí)驗試劑
工業(yè)甲醇(色譜純,德國默克企業(yè),生產(chǎn)批號:603-001-00-x),95%酒精(天津市福晨化學(xué)藥品廠(chǎng),生產(chǎn)批號:20171110),乙醚(沸程60~90℃,天津市福晨化學(xué)藥品廠(chǎng),生產(chǎn)批號:20171201),赤芍素標準物質(zhì)(我國食品藥品安全檢驗研究所,生產(chǎn)批號:111924-201806)。
1.3中藥材
市面上中藥飲片的原產(chǎn)地各自來(lái)源于內蒙古阿榮旗、赤峰市、莫力達瓦達斡爾族自治旗(通稱(chēng)“莫旗”)、扎蘭屯;3年生、4年生、5年生種植北蒼術(shù)地下莖均采自于蒙古族自治州莫力達瓦旗多熱博熱其勒村(通稱(chēng)“多熱”),先后標識為1~7號。經(jīng)齊齊哈爾市醫科院藥學(xué)院王曉麗副教授職稱(chēng)評定為北蒼術(shù)[Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.]的地下莖。
2方式與結果
2.1水溶液制取方式
2.1.1標準品水溶液
稱(chēng)量赤芍素標準物質(zhì)適當,工業(yè)甲醇融解,超聲波10min,制取20μg/mL的水溶液,經(jīng)0.45μm的微孔濾膜濾過(guò),預留。
2.1.2供試品水溶液
取“1.3”項下不一樣來(lái)源的北蒼術(shù)中藥飲片,破碎后過(guò)三號篩,各自稱(chēng)量0.2g,放置具塞錐形瓶中,添加工業(yè)甲醇50mL,用封口膜密封性后,稱(chēng)取凈重,超聲波獲?。ㄝ敵龉β?50W,頻率40KHz)1h,制冷至常溫后,稱(chēng)取凈重,用工業(yè)甲醇補充缺少的凈重,用0.45μm過(guò)慮活性炭過(guò)濾,取續滲瀝液,預留。
2.2色譜儀標準
DiamonsilC18離子交換柱(4.6mm×250mm,5μL),流動(dòng)性相工業(yè)甲醇-水(79∶21)等度過(guò)柱,流動(dòng)速度1.0mL/min,檢驗光波長(cháng)340nm,進(jìn)樣量20μL。
2.3方法學(xué)調查
2.3.1線(xiàn)性相關(guān)調查
高精密稱(chēng)量標準品60mg,工業(yè)甲醇滴定劑至10mL,攪拌,移取1mL至10mL容量瓶中,用工業(yè)甲醇滴定劑至標尺,標識為1號。從2號中汲取5mL水溶液,用工業(yè)甲醇滴定劑至標尺,標識為2號。依此類(lèi)推,得3、4、5、六號水溶液。按“2.1”項色譜儀標準下開(kāi)展測量。以峰總面積為縱軸(Y),標準品濃度值為橫坐標軸(X)開(kāi)展回歸分析,得線(xiàn)性回歸方程為Y=2715.1X-9.6694(r=0.9998),標準品濃度值在0.01875~0.6000mg/mL范疇內線(xiàn)性相關(guān)優(yōu)良。
2.3.2精度實(shí)驗
汲取“2.1.2”項下供試品水溶液20μL,按“2.2”項色譜儀標準,持續氣相6次,測量峰總面積,經(jīng)測算RSD為0.49%,說(shuō)明儀器設備精度優(yōu)良。
2.3.3可重復性實(shí)驗
汲取“2.1.1”項下對比水溶液20μL,按“2.2”項下色譜儀標準,持續氣相6次,測量赤芍素峰總面積,經(jīng)測算RSD為1.79%,說(shuō)明方式可重復性?xún)?yōu)良。
2.3.4可靠性實(shí)驗
汲取“2.1.1”項下供試品水溶液20μL,按“2.2”項下色譜儀標準,各自在0、2、4、6、8、10h時(shí)氣相,測量赤芍素峰總面積RSD為1.74%,說(shuō)明供試品水溶液在10h內可靠性?xún)?yōu)良。
2.3.5加樣利用率實(shí)驗
稱(chēng)量11號粉末狀0.1000g,共6份,各自添加“2.1.1”項下對比水溶液5mL,放置50mL錐形瓶中,用工業(yè)甲醇滴定劑至標尺,超聲波獲取1h后過(guò)0.45μm微孔濾膜,取續滲瀝液,按“2.2”項下色譜儀標準測量,測算利用率為95.4%,見(jiàn)表1。
各自稱(chēng)量1~花了7天時(shí)間赤芍試品0.2g,每一份中藥材制取3份平行面樣,按“2.1.2”項下方式制取供試品水溶液,按“22..22”項色譜儀標準測量,結果不一樣產(chǎn)區的赤芍中赤芍素的成分為0.3200%~0.5599%,阿榮旗中藥飲片中赤芍素成分最大。三年生、四年生、5年生蒼術(shù)中赤芍素的成分各自為:(0.3500±0.0048)%、(0.4550±0.0030)%、(0.3350±0.0118)%,見(jiàn)表2。
3探討
成分測量數據顯示,四年生人力種植北蒼術(shù)的赤芍素比三年生和5年生的成分高,以指標值成份的成分為根據,本試驗結果顯示北蒼術(shù)的最好種植時(shí)間為四年,與市面上中藥飲片對比,內蒙古自治區莫旗的人力仿天然的栽種赤芍中赤芍素的成分符合規定。赤芍中揮發(fā)物化學(xué)成分是關(guān)鍵活力成份,為獨特的次生新陳代謝物質(zhì),其成分受基因遺傳、個(gè)體發(fā)育和環(huán)境破壞的危害。內蒙古為暖溫帶大陸性氣候,阿榮旗、莫旗、扎蘭屯及多熱位于內蒙古自治區東部地區,坐落于大興安嶺地區東麓中區,氣侯展現出春溫、夏升、秋降、三九嚴寒的特性,強烈的溫度差有益于地區內北蒼術(shù)身體化學(xué)物質(zhì)累積。本方式簡(jiǎn)單、迅速、精確,適用北蒼術(shù)中赤芍素的含水量測量。