2.5加標回收實(shí)驗

取1mg/mL混和標準物質(zhì)水溶液50、200uL、1.0mL于10mL容量瓶中，用工業(yè)甲醇各自稀釋液成5.0、20.0、100.0ug/mL三個(gè)濃度梯度的混和標準物質(zhì)水溶液。每一種栽培基質(zhì)做低、中、高三個(gè)濃度值加標：每一個(gè)梯度方向取200uL混和標準物質(zhì)水溶液各自添加膠襄、片狀和片劑空缺栽培基質(zhì)試品里將片狀、片劑和膠襄(內容物)試品細膩碾磨，獲得勻質(zhì)試品后稱(chēng)重，稱(chēng)量0.1000g上下試品于100mL容量瓶中，添加工業(yè)甲醇適當，超聲波獲取30min，制冷至室內溫度，用工業(yè)甲醇滴定劑至標尺，混勻，靜放，取上清液經(jīng)0.22μm有機濾膜過(guò)慮，取滲瀝液被測。若呈陽(yáng)性試品濃度值超過(guò)線(xiàn)形范疇則用工業(yè)甲醇按一定占比稀釋液后再測。每一個(gè)梯度方向檢驗三組平行面試品。離子交換柱：PhenomenexKjneLex-C₁₈離子交換柱，規格型號50mm×2.1mm，2.6μm；柱溫：40℃；流動(dòng)性相：A為乙腈，B為10mmol/L乙酸銨溶液；梯度方向過(guò)柱：0～7min，10％A～90％A，7～8min，90％A，8～8.1min，90％A～10％A，8.1～10min，10％A；流動(dòng)速度：250μL/min；進(jìn)樣量：1μL。離子源：TurboV電噴霧器離子源(ESI)；逐行掃描：正、空氣負離子與此同時(shí)掃描儀，按時(shí)多反映檢測→信息內容依賴(lài)感獲得→加強型子離子掃描儀(ScheduledMRM→TDA→EP)；掃描儀范疇：50～650Da；氣簾氣(CUR)：30psi；撞擊氣(CAD)：High；噴霧器工作電壓(IS)：5500V/-4500V；離子源溫度：550℃；做霧化氣(GASl)：55psi；輔助氣(GAS2)：55psi開(kāi)展加標回收率測量。30種總體目標化學(xué)物質(zhì)加標回收率及相對性相對標準偏差(RSD)，結果顯示，30種化學(xué)物質(zhì)的利用率在84.5％～104.7％中間，RSD均低于5.0％，加標回收實(shí)驗精度優(yōu)良。

2.6精度和標準物質(zhì)水溶液可靠性實(shí)驗

精準汲取50μL混和標液將30種違規加上藥品各自稱(chēng)量約10mg，放置10mL容量瓶中，11種那非類(lèi)標準物質(zhì)中添加一定量的乙腈超聲波融解后滴定劑，其他標準物質(zhì)添加一定量工業(yè)甲醇超聲波融解后滴定劑，均配置成濃度值約為1mg/mL的標準物質(zhì)貯備液，并存放于-4℃冰柜中。
混和標準物質(zhì)溶液的配制：各自精準汲取30種標準物質(zhì)貯備液適黃于一個(gè)100mL容量瓶中，用工業(yè)甲醇稀釋液攪拌后滴定劑。使濃度值為1～10μg/mL的混和標準物質(zhì)水溶液，待應用時(shí)進(jìn)一步稀釋液。于10mL容最瓶，用工業(yè)甲醇稀釋液，配置成含量為5～100ng/mL的混和標液，離子交換柱：PhenomenexKjneLex-C₁₈離子交換柱，規格型號50mm×2.1mm，2.6μm；柱溫：40℃；流動(dòng)性相：A為乙腈，B為10mmol/L乙酸銨溶液；梯度方向過(guò)柱：0～7min，10％A～90％A，7～8min，90％A，8～8.1min，90％A～10％A，8.1～10min，10％A；流動(dòng)速度：250μL/min；進(jìn)樣量：1μL。

離子源：TurboV電噴霧器離子源(ESI)；逐行掃描：正、空氣負離子與此同時(shí)掃描儀，按時(shí)多反映檢測→信息內容依賴(lài)感獲得→加強型子離子掃描儀(ScheduledMRM→TDA→EP)；掃描儀范疇：50～650Da；氣簾氣(CUR)：30psi；撞擊氣(CAD)：High；噴霧器工作電壓(IS)：5500V/-4500V；離子源溫度：550℃；做霧化氣(GASl)：55psi；輔助氣(GAS2)：55psi持續氣相6次，測量30種化學(xué)物質(zhì)定量分析正離子質(zhì)問(wèn)潛峰總面積的相對性相對標準偏差(RSD)。將濃度值為5～100ng/mL的混和標液在遮光冷凍0、1、2、4、8、12、24h后各自離子交換柱：PhenomenexKjneLex-C18色譜柱，規格型號50mm×2.1mm，2.6μm；柱溫：40℃；流動(dòng)性相：A為乙腈，B為10mmol/L乙酸銨溶液；梯度方向過(guò)柱：0～7min，10％A～90％A，7～8min，90％A，8～8.1min，90％A～10％A，8.1～10min，10％A；流動(dòng)速度：250μL/min；進(jìn)樣量：1μL。

離子源：TurboV電噴霧器離子源(ESI)；逐行掃描：正、空氣負離子與此同時(shí)掃描儀，按時(shí)多反映檢測→信息內容依賴(lài)感獲得→加強型子離子掃描儀(ScheduledMRM→TDA→EP)；掃描儀范疇：50～650Da；氣簾氣(CUR)：30psi；撞擊氣(CAD)：High；噴霧器工作電壓(IS)：5500V/-4500V；離子源溫度：550℃；做霧化氣(GASl)：55psi；輔助氣(GAS2)：55psi方式檢驗，以獲取的30種日標物定量分析離子對質(zhì)譜分析岡峰而積測算其RSD。結果顯示，本方式中30種違規加上藥品的精度(RSD)為0.8％～5.6％，均低于6％，精度優(yōu)良，且混和標準物質(zhì)水溶液在24h內平穩。

2.7試品檢驗

選用本方式對50批號消除疲勞類(lèi)和提高睡眠質(zhì)量類(lèi)保健產(chǎn)品開(kāi)展檢驗，外標法定量分析。試驗數據顯示，驗出呈陽(yáng)性試品共8批號，定量分析結果見(jiàn)表5。每批號呈陽(yáng)性試品最少與此同時(shí)驗出二種違規加上藥品，在其中驗出數最多的化學(xué)物質(zhì)是硝西泮和炯酸，各驗出5批號，次之是他達那非，共驗出3批號，氯硝西泮、文法拉辛、硫代艾地那非各驗出2批號，氯苯那敏驗出1批號。全部呈陽(yáng)性試品EPI譜圖均歷經(jīng)EPI數據庫查詢(xún)(2.3)核對確診，以Fit、RevFit和Purity三個(gè)主要參數表明查找結果，其標值反映與總體目標化學(xué)物質(zhì)的搭配水平。在其中FiL(F)意味著(zhù)正符合率，即標準物質(zhì)譜峰與試品譜峰的相似性，最高值為100，值越大表明是該化學(xué)物質(zhì)的概率越大；RevFit(R)意味著(zhù)反符合率，即試品譜圖與標準物質(zhì)譜圖的相似性；Purity(P)意味著(zhù)純凈度，是綜合性前二種結果得到的標值，即試品譜圖與數據表中的標準物質(zhì)譜圖之問(wèn)在質(zhì)量數、進(jìn)化速率等主要參數層面的相似性。EPI數據庫查詢(xún)搜庫結果中總體目標化學(xué)物質(zhì)依照P值從大到小的排列順序；一部分呈陽(yáng)性試品質(zhì)譜分析對比分析見(jiàn)圖3。

3結果

本試驗選用高效率液相色譜儀-三重四極桿復合型正離子阱質(zhì)譜分析(HPLC-QTRAP-MS)對消除疲勞類(lèi)和提高睡眠質(zhì)量類(lèi)保健產(chǎn)品中30種違規加上藥品創(chuàng )建了快速檢測方式。在8min之內完成了對30種化學(xué)物質(zhì)的檢驗。該方式采用乙腈-10mmoL/L乙酸銨水溶液做為流動(dòng)性相，PhenomenexKinetexC18(50mm×2.1mm，2.6μm)柱為離子交換柱實(shí)現分離出來(lái)；采用按時(shí)多反映檢測(SchedulenedMRM)方式下的正、負離轉換方法開(kāi)展定量分析檢測分析；采用按時(shí)多反映臨測(ScheduledMRM)-信息內容依賴(lài)感收集(IDA)-提高子離子掃捕(EPI)逐行掃描，在定性分析的與此同時(shí)得到3個(gè)工作能力等級的二級殘片正離子質(zhì)譜圖復合型而成的加強型二級殘片正離子(EPI)質(zhì)譜圖，創(chuàng )建30種化學(xué)物質(zhì)的EPI數據庫查詢(xún)，開(kāi)展判定確診。

本方式選用正空氣負離子與此同時(shí)逐行掃描，能夠一起檢驗30種違規加上藥品，加速了檢查速率；挑選ScheduledMRM收集方法，取得最好色譜儀峰開(kāi)展定性分析，提升 了檢驗敏感度和定量分析精確性；創(chuàng )建了EPI數據庫查詢(xún)用以呈陽(yáng)性確診和結構特征，保證了判定精確性；提升了搜庫核對流程，設定操作系統全自動(dòng)轉換正離子阱方式，線(xiàn)上收集EPI圖普，測算核對結果，減少剖析時(shí)問(wèn)，加速判定速率。本方式達到了一針氣相與此同時(shí)對30種違規加上藥品開(kāi)展定量分析、判定和確診，具備擴散系數大、速度更快、實(shí)際操作簡(jiǎn)單、敏感度高、精確性強能的特性，為新時(shí)期的保健品管控給予合理的服務(wù)支持。