松樹(shù)皮(Pine needle)為松科(Pinaceae)綠色植物落葉,普遍分散于全世界,一共有10個(gè)屬約230好幾個(gè)種類(lèi),我國遍布大概有10個(gè)屬約120多種多樣。松樹(shù)皮資源來(lái)源于關(guān)鍵包含黃山松、油松、紅松、云南松、大山松、流蘇樹(shù)等、白皮松小苗、底盤(pán)松、巴山松、海南省五針松、火炬松等。松樹(shù)皮桂皮醛一般以闊葉樹(shù)枝條和綠葉子做為原材料,選用水蒸氣蒸餾、超臨界萃取獲取、有機溶液等方式獲取,一般松樹(shù)皮含油率為0.4%~0.6%,多則達1%,具備除菌、除蟲(chóng)、除味、抗氧化性等多種多樣藥理學(xué)活力,廣泛運用于日用化工廠(chǎng)、藥業(yè)和食品行業(yè)等行業(yè)。
現階段,世界各國有關(guān)馬尾松、波羅的海松、加那利松、南美黑松盆景、樟子松、馬尾松、濕地松、云南松、油松等松樹(shù)種類(lèi)的桂皮醛的成份科學(xué)研究已經(jīng)有報導,但迄今末見(jiàn)烏克蘭松樹(shù)皮及其澳大利亞紅皮云杉針油成份比照科學(xué)研究報導。本試驗以烏克蘭松樹(shù)皮、澳大利亞紅皮云杉針做為研究對象,選用水蒸氣蒸餾法獲取桂皮醛,選用GC/MS對其成份開(kāi)展了剖析,經(jīng)質(zhì)譜分析查找后,匹配度融合保存指數值對其判定,不錯地辨別了同分異構體或同系物,防止了在判定全過(guò)程中發(fā)生錯判,提升判定的精確性。此外,根據對二種不一樣松樹(shù)皮單方精油揮發(fā)物成份開(kāi)展了數據分析科學(xué)研究,為其在日用化工廠(chǎng)、藥業(yè)和食品行業(yè)等各個(gè)領(lǐng)域運用帶來(lái)了具體指導。
一、原材料與方式
1、原材料與機器設備
(1)原材料與實(shí)驗試劑
烏克蘭松針葉、澳大利亞紅皮云杉葉:購于銷(xiāo)售市場(chǎng);二氯甲烷、工業(yè)甲醇、正己烷:GR級,購買(mǎi)于百靈威高新科技有限責任公司;正構乙烷C7~C30:購買(mǎi)于Sigma—Aidrich企業(yè)。
(2)儀器設備與機器設備
Agilent7890A/5975C氣象色譜儀一質(zhì)譜分析液質(zhì)儀 自動(dòng)進(jìn)樣器(英國安捷倫科技有限責任公司);萬(wàn)分之一電子分析天平(法國MettlerTloede公司);磨口桂皮醛獲取儀(北京永光輝診療儀器廠(chǎng));10mL移液器(法國Eppendorf企業(yè))。
2、方式
(1)松針葉油獲取
取新鮮針葉試品裁成0.5cm段兒,稱(chēng)量100g放置圓底燒瓶中,添加1000 mL純凈水,水蒸氣蒸餾法獲取4 h后靜放分層次3h,獲得針葉油為淡黃色油狀物質(zhì),用沒(méi)有水醫用乙醚融解并且用無(wú)水硫酸鈉開(kāi)展干躁,得到松樹(shù)皮油。
(2)松樹(shù)皮油揮發(fā)物化學(xué)成分分析
精確稱(chēng)量松樹(shù)皮油0.20g,用工業(yè)甲醇:二氯甲烷(容積比是1∶4)混和溶液稀釋到10mL,氣相前必須將試品用0.45μm有機相濾紙過(guò)慮,立即進(jìn)GC/MS剖析。色譜儀標準:RXi~5sil MS石英石毛細管柱(60m×0.25mm×0.25μm),載氣為氮氣(純凈度為99.99%),流動(dòng)速度:1.0 mL/min。提溫程序流程:原始溫度50℃,維持2min;以3℃/min的速度加熱至180℃再用10℃/min的速度加熱至230℃,維持10min。氣相口溫度:250℃,進(jìn)樣量:1.0μL,分離比:20∶1,有機溶劑延遲時(shí)間6min。質(zhì)譜分析標準:電負電子水解(EI)源;離子源溫度:230℃;四極桿溫度:150℃;水解動(dòng)能:70 eV;同軸電纜溫度:280℃;掃描儀范疇(m/z):40~450;質(zhì)譜分析查找圖片庫:NIST譜庫。
(3)判定方式
移取正構乙烷C7~C30標準物質(zhì),用正己烷水溶液將其稀釋液成質(zhì)量濃度為5%水溶液,精確稱(chēng)量松樹(shù)皮油0.20g,用工業(yè)甲醇:二氯甲烷(容積比是1∶4)混和溶液稀釋到10mL,氣相前必須將試品用0.45μm有機相濾紙過(guò)慮,立即進(jìn)GC/MS剖析。色譜儀標準:RXi~5sil MS石英石毛細管柱(60m×0.25mm×0.25μm),載氣為氮氣(純凈度為99.99%),流動(dòng)速度:1.0 mL/min。提溫程序流程:原始溫度50℃,維持2min;以3℃/min的速度加熱至180℃#再用lO℃/min的速度加熱至230℃,維持10min。氣相口溫度:250℃,進(jìn)樣量:1.0μL,分離比:20∶1,有機溶劑延遲時(shí)間6min。質(zhì)譜分析標準:電負電子水解(EI)源;離子源溫度:230℃;四極桿溫度:150℃;水解動(dòng)能:70 eV;同軸電纜溫度:280℃;掃描儀范疇(m/z):40~450;質(zhì)譜分析查找圖片庫:NIST譜庫。算出正構乙烷C7~C30保存期,為下一步測算松樹(shù)皮油中各成份保存指數值作提前準備。
依據VandenDool和Kratz的線(xiàn)形程序升溫的留存指數值基本原理,運用自創(chuàng )手機軟件求取保存指數值(KI)值:
式中:tx——被剖析成分;
tn——氧原子數;
tn 1——n和n l的正構乙烷排出峰的保存期(min)。
試品松樹(shù)皮油歷經(jīng)GC/MS剖析后,運用儀器設備內置的NIST質(zhì)譜分析庫對松樹(shù)皮油中成分開(kāi)展自動(dòng)識別,隨后根據自身研發(fā)的留存指數值手機軟件算出各成份保存指數值,將手機軟件估算的留存指數值與ESO單方精油數據庫查詢(xún)中保存指數值開(kāi)展核對(可接納偏差不超過(guò)3%),對其開(kāi)展判定。
(4)數據處理方法
試品松樹(shù)皮油歷經(jīng)GC/MS剖析后,選用色譜儀峰總面積歸-畫(huà)法測算得到各成分相對性百分比成分。
二、結果與探討
1、松樹(shù)皮油揮發(fā)物化學(xué)成分分析
松樹(shù)皮油中成份經(jīng)GC/MS檢驗所獲得總離子流色譜見(jiàn)圖1、圖2,其結果選用Nistll開(kāi)展查找后融合ESO香料保存指數值開(kāi)展比照對其判定,運用總面積歸-畫(huà)法測算得到松樹(shù)皮油中各成份相對性百分比成分,結果見(jiàn)表1所顯示。