伏苓做為一味食品藥品兼用型細菌，其味甘、性溫、深入人心、肺、胃經(jīng)，具備健脾和胃的作用，伴隨著(zhù)科學(xué)研究創(chuàng )新，其使用使用價(jià)值持續獲得開(kāi)發(fā)設計。宋克玉等科學(xué)研究伏苓對小白鼠腸菌緩沖作用的試驗中強調，高使用量組（50μg/kg）伏苓能有效的提升小白鼠腸胃內雙岐桿菌的水準。沈思等發(fā)覺(jué)茯苓皮三萜萃取液對大腸埃希菌、橙黃色鏈球菌、綠膿桿菌都是有不錯的抑制效果。但伏苓的種植周期時(shí)間約為10～12個(gè)月，且以杉木做為塑造栽培基質(zhì)，導致了松料等名貴樹(shù)木的消耗。有分析強調，伏苓菌絲以及液態(tài)發(fā)酵物質(zhì)一樣含有藥理學(xué)成份。

谷類(lèi)因具備多種多樣的營(yíng)養元素，如木薯淀粉、蛋白、營(yíng)養元素等，可提供微生物菌種成長(cháng)需要的營(yíng)養元素，是有效的發(fā)醇栽培基質(zhì)。伴隨著(zhù)藥學(xué)科學(xué)研究的深層次，大家發(fā)覺(jué)谷類(lèi)經(jīng)生物發(fā)酵后，帶有充足的碳水化合物、還原性糖、含糖量及酚類(lèi)化合物等活性物質(zhì)，能夠對雙岐桿菌和乳酸桿菌的益生菌粉具有繁衍的實(shí)際效果。李永明選用PCR-DGGE的辦法對發(fā)醇谷類(lèi)液態(tài)精飼料對斷乳豬仔的腸菌多元性的分析中強調，實(shí)驗組的有益菌多元性指數值、勻稱(chēng)度指數值和進(jìn)化速率均大于對照實(shí)驗；劉海燕等以發(fā)醇酶解豆柏替代50％的一切正常豆柏做成基本日糧喂養小白鼠，結果發(fā)覺(jué)小白鼠大腸埃希菌總數明顯減少，乳酸桿菌總數有一定的提高。

但目前并未有關(guān)于伏苓發(fā)醇谷類(lèi)對益生菌粉的繁衍實(shí)際效果的科學(xué)研究。本試驗以伏苓菌為菌苗，對麥子開(kāi)展發(fā)醇，以發(fā)醇物質(zhì)為原材料制取萃取液，科學(xué)研究該萃取液對雙岐桿菌和乳酸桿菌的身體之外繁衍實(shí)際效果，以求開(kāi)發(fā)設計伏苓固態(tài)發(fā)酵物質(zhì)的低聚果糖功效，為多功能性低聚果糖商品的研發(fā)給予新的構思。

一、原材料與方式

1、原材料與實(shí)驗試劑

青春年少雙岐桿菌，麗珠腸樂(lè )膠襄，珠海麗珠醫藥集團股權有限責任公司；立陶宛乳酸桿菌，福建農林高校微生物菌種工程項目試驗室儲存；厭氧發(fā)酵產(chǎn)氣袋，日本三菱公司；厭氧發(fā)酵塑造盒，日本三菱公司；葡萄糖水、低聚果糖、異麥芽糖低聚木糖、莫匹羅星鋰鹽、L-胱胺酸鹽酸鹽；別的實(shí)驗試劑皆為分析純實(shí)驗試劑。

2、儀器設備與機器設備

BSll0S電子分析天平，賽多利斯儀器設備（北京市）有限責任公司；LDZX-50KBS立柱式工作壓力蒸汽滅菌鍋，上海申安醫療器械廠(chǎng)；DHG-9203風(fēng)機干燥機設備，上海精宏企業(yè)；LRH-250恒溫培養箱，寧波市江南地區儀器廠(chǎng)；UVl100紫外線(xiàn)光度計，上海美譜達儀器設備有限責任公司；5804R快速冷凍離心機，法國Eppendorf企業(yè)；PBl0pH計，法國賽多利斯集團公司。

3、實(shí)驗方法

（1）培養液

麥子固體培養基：先除去殘渣與中空麥子顆粒物，用純凈水清洗2～3次，除去塵土、麩皮等殘渣，加蒸溜水至恰好浸入麥子，于40℃水浴2h后將麥子撈起來(lái)，按料液比1:1.2添加純凈水煮至麥子圓潤全熟無(wú)白心，留意麥子不可以開(kāi)裂，以防止營(yíng)養成分流失。將煮好的小麥粒散裝于種植瓶中，一瓶110g，鋪平，封口膜密封后121℃殺菌120min。

MRS改進(jìn)培養液：雙岐桿菌的活性培養液，參照張澤生等的方式配備。

LBS培養液：乳酸桿菌的活性培養液，參照孔彥卓等專(zhuān)家的方式配備。實(shí)驗培養液：在MRS改進(jìn)培養液（LBS培養液）中添加不一樣含量的伏苓麥子萃取液，做成實(shí)驗培養液。

（2）厭氧發(fā)酵塑造方式

參照魯慶的辦法開(kāi)展改進(jìn)。在厭氧罐中放進(jìn)早已注射的試管嬰兒后，放進(jìn)厭氧發(fā)酵產(chǎn)氣袋，懸緊厭氧罐，并將其用保鮮袋封住后，在37℃的防水防火式恒溫培養箱中塑造一段時(shí)間。

（3）雙岐桿菌及乳酸桿菌的活性

參照盧旭的辦法開(kāi)展改進(jìn)。在滅菌自然環(huán)境下，取麗珠腸樂(lè )雙岐桿菌膠襄1g于9mL0.9％鹽水中稀釋液，旋渦振蕩器攪拌后，按10％的接種量注射于6mL活性培養液，上封2mL液體石蠟，37℃厭氧發(fā)酵塑造48h；取生長(cháng)發(fā)育狀況比較好的菌液傳代培養2次，再度注射后塑造18h菌苗即是雙岐桿菌水解液。乳酸桿菌的活性方法同樣。

（4）伏苓固態(tài)發(fā)酵物質(zhì)萃取液制取

依照胡開(kāi)輝等的方式 ，取伏苓固態(tài)發(fā)酵25d物質(zhì)，按料液比1:4（g/mL）勻漿，在勻漿后的料液中添加0.05％～0.1％酸堿性胰蛋白酶，后放進(jìn)60℃恒溫水浴鍋開(kāi)展水浴，添加0.05％～0.1％糖化酶功效2～3h。取糖化徹底后的料液，離心式后取上清，應用凹凸棒土開(kāi)展過(guò)慮至回應就可以。將回應后的萃取液濃縮至1g/mL濃度值（即100g發(fā)醇麥子做成100mL中藥浸膏為100％濃度值），應用時(shí)加上雙蒸水配備為所需濃度值就可以。

（5）不一樣雙歧因子對雙岐桿菌繁衍的危害

在改進(jìn)MRS培養液中，各自添加2％FPE（20mg/mL）、異麥芽糖低聚木糖（IMO）和低聚果糖（FOS），對照實(shí)驗為葡萄糖水（GLU）培養液。于121℃下殺菌20min，接種量為6％，37℃厭氧發(fā)酵塑造48h，測量各培養液的雙岐桿菌的在600nm的OD值A600nm。和pH，反復測量3次。

（6）不一樣濃度值萃取液對雙岐桿菌及乳酸桿菌繁衍的危害

在改進(jìn)MRS（LBS）培養液加上發(fā)酵物，使其濃度值達1％（10mg/mL）、2.5％（25mg/mL）、5％（50mg/mL）、7.5％（75mg/mL）、10％（100mg/mL），以空缺改進(jìn)MRS（LBS）培養液為對比，121℃殺菌20min，接種量為6％，37℃厭氧發(fā)酵塑造48h，測量各培養液的雙岐桿菌及立陶宛乳酸桿菌在600nm的OD值和pH，反復測量3次。

（7）雙岐桿菌及乳酸桿菌生長(cháng)曲線(xiàn)的測量

實(shí)驗培養液為5％（50mg/mL）濃度值的FPE培養液，改進(jìn)MRS培養液為對比培養液，121℃殺菌20min，接種量為6％，37℃厭氧發(fā)酵塑造，每過(guò)4h抽樣測量雙岐桿菌及乳桿在600nm的OD值A600nm和pH，反復測量3次。以塑造時(shí)間為橫坐標軸，A600nm數值縱軸，制作二者的生長(cháng)曲線(xiàn)。

（8）實(shí)驗結果數據分析

所得的數據信息均應用SPSS20.0手機軟件開(kāi)展應用統計學(xué)剖析，并將測量的效果選用Excel制圖。

二、結果與剖析

1、不一樣雙歧因子對雙岐桿菌繁衍的危害

圖1、表1表明的是不一樣的促雙歧因子對雙岐桿菌的危害。數據顯示，FPE能夠 做為促雙歧因子推動(dòng)雙岐桿菌生長(cháng)發(fā)育，在加入了FPE以后，吸光度值可以達到3.467，是GLU基本培養液的1.3倍，加上了IMO培養液的1.09倍，加上了FOS的1.21倍，對比于葡萄糖水（GLU）對照實(shí)驗來(lái)講，差別極明顯（P＜0.01）。較為pH得轉變能夠 發(fā)覺(jué)，各加上組的pH轉變基本上在3.60～4.00中間。在其中加上FPE的pH最少，IMO其次。這可能是雙岐桿菌在成長(cháng)的環(huán)節中，糖原磷酸原溶解造成了一些有機物（如：乳酸菌、甲酸等），造成 pH差別很大。結果顯示，FPE能夠 做為一種優(yōu)良的雙歧因子，推動(dòng)其發(fā)育繁育。

申明：文中常用照片、文本來(lái)源于《中國食品添加劑》，著(zhù)作權歸原作全部。