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農藥殘留的酶活性抑制與免疫分析技術(shù)的免疫分析法(二)

來(lái)源:鄭州天順食品添加劑有限公司 發(fā)布時(shí)間:2021-09-12 10:12:23 關(guān)注: 0 次
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1、人免疫球蛋白的種類(lèi)與構造:人免疫球蛋白分子結構由4條多肽鏈構成,兩根挎包稱(chēng)之為輕鏈(1ight chain,L),分子質(zhì)量約為25ku。兩根長(cháng)鏈稱(chēng)之為重鏈(heavy chain,H),分子質(zhì)量為50~75 ku。輕鏈有2種:κ和λ。在同一人免疫球蛋白分子結構中,兩根輕鏈是同型(isotype)的。重鏈有5種:α、γ、δ、ε和μ。依據人免疫球蛋白重鏈的品種不一樣,可將其分成5類(lèi):IgA(α鏈)、IgD(δ鏈)、IgE(ε鏈)、IgG(γ鏈)和IgM(μ鏈)。肽鏈間根據二硫鍵(disulfide b()nd)聯(lián)接,單獨Ig分子結構呈“Y”狀構造。

人免疫球蛋白分子結構分成穩定區(constant reglon,C)和可變性區(variable region,V)兩一部分。針對不一樣的人免疫球蛋白分子結構,輕鏈N端一半和重鏈N端1/4這一地區的氨基酸序列有很大的轉變,稱(chēng)之為可變性區;一部分氨基酸序列趨向傳統,稱(chēng)之為穩定區??勺冃詤^一些位置氨基酸序列轉變 特別大,故稱(chēng)之為高變區(hyperlvariable regk)n,HvR)。高變區只占v區的20%~25%;其他75%~80%則比較傳統,稱(chēng)之為架構區(fraHlework regiorl)。輕鏈(light chain,L)和重鏈(heavy chain,H)各帶有3個(gè)高變區,其表層為抗原體相接處(antigen binding site)。因為高變區碳水化合物編碼序列與融合的抗原體產(chǎn)生了構造相輔相成的三維空間構造,因此高變區也被稱(chēng)作相輔相成決策區(complementary_determining regiorL,CDR)。γ重鏈、α重鏈和δ重鏈帶有1個(gè)非球型片段,坐落于C區的第1個(gè)(CH1)和第2個(gè)(CH2)結構域中間,氨基酸殘基數小至10個(gè)多至60個(gè)之上。該區域稱(chēng)之為門(mén)鉸鏈區(hinge regiorl)。當抗原與抗原體融合時(shí),門(mén)鉸鏈區可隨意旋轉,以滿(mǎn)足不一樣間距的抗原決定簇??乖蓱{著(zhù)門(mén)鉸鏈區的延展性與某一與眾不同抗原體的1個(gè)之上結構域融合,與越來(lái)越多的抗原體契合點(diǎn)觸碰可提升融合的抗壓強度。

2、抗原的種類(lèi):按制取方式、造成方式和特性,抗原分成多克隆抗體、單抗和基因工程技術(shù)抗原。

(1)多克隆抗體:多克隆抗體(polyclonal antibody,PcAb)就是指由多枝B體細胞形成的、對于不一樣抗原決定簇的抗原的混合物質(zhì)。其制取方式是用抗原體立即免疫力兔、羊等小動(dòng)物制取抗血清,再從抗血清中分離出來(lái)抗原。多克隆抗體與抗原體的吸引力強、可靠性好,但抗原的均一性和非特異比不上單抗,來(lái)源于中斷,存有批間差別。

(2)單抗:?jiǎn)慰?monoclonal antibody,McAb)就是指由某一個(gè)抗原決定簇刺激性單棵B體細胞所造成的抗原。單抗是根據雜交瘤技術(shù)性(又稱(chēng)之為無(wú)性繁殖體細胞技術(shù)性)制取的。單抗勻質(zhì)性好、非特異強,可在身體之外細胞培養液中持續大批量塑造,無(wú)批間差別。

(3)基因工程技術(shù)抗原基因工程技術(shù)抗原(genetic engineering antibody)是根據對抗原可變性區的遺傳基因開(kāi)展復制或一部分精彩片段更新改造,運用DNA分子資產(chǎn)重組技術(shù)性,再歷經(jīng)表述而發(fā)生的具備病毒學(xué)活力的非特異活性多肽?;蚬こ碳夹g(shù)抗原技術(shù)性的進(jìn)步使人力設計方案和制取有著(zhù)獨特特性、獨特作用的抗原變成很有可能。

(三)抗原和抗體反映

抗原體與抗原的非特異融合稱(chēng)之為抗原和抗體反映(antigen-antibody reaction)。哺乳動(dòng)物人體具備人體免疫系統,在遭受進(jìn)入體內的病菌、病毒感染、體細胞、機構、蛋白等外源化學(xué)物質(zhì)(抗原體)刺激性的情況下能產(chǎn)生防御性回復反映,造成活性的防護化學(xué)物質(zhì)(抗原)來(lái)鑒別該外源物

質(zhì)并與之緊密結合,進(jìn)而“鈍化處理”該成分以清除其影響??乖涂贵w的辨別和融合反映不但還可以在身體內開(kāi)展,還可以在身體之外適度情況下開(kāi)展,合乎品質(zhì)功效基本定律。這類(lèi)反映在身體內做為血液體液免疫的效用體制當然產(chǎn)生,在身體之外做為免疫學(xué)實(shí)驗的效果而發(fā)生。因為傳統式病毒學(xué)技術(shù)性多以人或動(dòng)植物的血清蛋白做為抗原的來(lái)源于,因此體外實(shí)驗中的抗原和抗體反映習慣性上稱(chēng)之為血清學(xué)反映(serological reaction)??墒钱斀竦目乖涂贵w反映早就達到了血清學(xué)時(shí)期的定義。

1、抗原和抗體的結合性:抗原體與抗原的融合具備極度的非特異,關(guān)鍵借助抗原體與抗原融合結構域空間布局的高精密“切合”和范德華(van der Waals)力等非共價(jià)鍵力的維持。抗原體與抗原的融合盡管是多樣性的非特異融合,但不產(chǎn)生堅固的化學(xué)鍵(化學(xué)鍵鍵能為209.2~418.4 kJ/m01),只是以繁雜的非共價(jià)鍵融合在一起,這類(lèi)較差的結合性最少包含下列4個(gè)層面。

(1)靜電引力:抗原和抗體分子結構上含有反過(guò)來(lái)正電荷的官能團中間能夠產(chǎn)生靜電引力,又稱(chēng)之為庫侖力。比如抗原分子結構上堿性氨基酸的分散羥基(一NH3 )和酸性氨基酸的分散羧基(-COO),可與抗原體分子結構上帶反過(guò)來(lái)正電荷的相匹配官能團互相吸引住。這類(lèi)吸引力的尺寸與兩正電荷間間距的平方米反比,均值鍵能約為20.9 kJ/mol。

(2)范德華力:抗原和抗體互相靠近時(shí),因為分子結構或分子的一瞬間偶極功效而發(fā)生的吸引力稱(chēng)之為范德華力,它可使相應的抗原體與抗原互相吸引住。范德華力的組成與測算較為復雜,大概與2個(gè)相互影響官能團的電極化水平的相乘正相關(guān),與他們相互間間距的7三次方反比,鍵能為4.2~12.5 kJ/mol。

(3)親水性相互作用力:2個(gè)親水性官能團在溶液中互相觸碰時(shí),因為對水分抵觸而趨于集聚的力稱(chēng)之為親水性相互作用力,亦稱(chēng)之為疏水鍵??乖涂贵w反映時(shí)可給予疏水性官能團的氨基酸殘基有亮氨酸、異亮氨酸、丙氨酸、纈氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸等??乖w與抗原因為親水性功效而凝結成一氧化氮合酶,那樣就使其與水了解的面積變小,吸水性減少。

(4)共價(jià)鍵:供氫體上的氫原子與受氫體原子間的吸引力組成共價(jià)鍵。供氫體和受氫體的分子全是電負性較強的分子。在抗原和抗體反映中,羧基、羥基和甲基是關(guān)鍵供氫體,而羧基氧、羧基碳、肽鍵氧等分子是關(guān)鍵受氫體。共價(jià)鍵具備專(zhuān)一性,因而比范德華力更具備非特異。共價(jià)鍵結合性與供氫體和受氫體中間間距的6三次方反比,鍵能約為20.9 kJ/mol。

參考文獻:農殘剖析,

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