一切正常牛乳中的尿素溶液成分約200－300mg/L，近些年，一些非法商戶(hù)為了能提升盈利室內空間，在牛奶中添加尿素溶液過(guò)高蛋白質(zhì)含量，而濃度較高的尿素溶液會(huì )導致泌尿生殖系統代謝阻礙，造成人體電解質(zhì)溶液失調，對身體產(chǎn)生危害。因而，測量牛奶中尿素溶液的成分十分關(guān)鍵。

現階段，尿素溶液成分的檢查辦法具體有二乙酰一肟酶活性測定、流動(dòng)性注入檢測儀法、電化學(xué)發(fā)光法、液相色譜儀法等，對牛奶中尿素溶液的定量分析檢驗方式較少。小編根據參照和參考游泳館水里尿素溶液成分的測量及牛奶前解決的方式 ，對牛奶中尿素溶液成分的測量開(kāi)展了研究和探尋論述，依據二乙酰一肟與尿素溶液的反映基本原理，對危害尿素溶液顯色反應的試驗標準干了挑選科學(xué)研究，最終對該辦法的正確度、利用率及檢出限進(jìn)一步認證，最后確認該辦法可使用于牛奶中尿素溶液成分的檢驗。

一、原材料與儀器設備

1.試驗原材料。

試驗用乳購于商場(chǎng)中不一樣牌子的成袋奶及農貿批發(fā)市場(chǎng)市場(chǎng)銷(xiāo)售的散稱(chēng)奶。

2.關(guān)鍵儀器設備。

SP－756P紫外線(xiàn)由此可見(jiàn)光度計（上海市光譜儀器有限責任公司），普利賽斯ES225SM－DR電子分析天平（法國普利賽斯企業(yè)）。

3.實(shí)驗試劑。

（1）尿素溶液國家標準物質(zhì)（99.8％）：精確稱(chēng)量尿素溶液純品國家標準物質(zhì)100mg，溶解0.05mol/L鹽酸中，輕輕地振搖，使尿素溶液徹底融解，并且于100mL容量瓶中滴定劑至標尺，使最后濃度值為1000mg/L，攪拌后將其轉到深棕色瓶中，于－4℃冰柜中儲存預留。

（2）尿素溶液規范應用液：汲取10.0mL的尿素溶液規范貯備液并且用純凈水稀釋液至100mL，使其含量為100mg/L。

（3）二乙酰一肟水溶液（0.5％）：稱(chēng)量5.0g二乙酰一肟并溶解水里，用容量瓶滴定劑至1000mL。

（4）三氯化鐵－氨基硫脲－鹽酸混和實(shí)驗試劑：將200mL的硫酸慢慢添加800mL水里，制冷后添加0.1g三氯化鐵和1.0g氨基硫脲，用純凈水滴定劑至1000mL。

（5）亞鐵氰化鉀水溶液（10.6％）：稱(chēng)量10.6g亞鐵氰化鉀，放水融解滴定劑至100mL。

（6）乙酸鋅水溶液（22.0％）：稱(chēng)量乙酸鋅22.0g，放水融解并添加5.0mL冰乙酸，滴定劑至100mL。

二、實(shí)驗方法

1.實(shí)驗原理。

二乙酰一肟在弱酸性情況下水解反應轉換為雙乙酰，與尿素溶液在強堿標準下縮合反應變成鮮紅色的二嗪化學(xué)物質(zhì)。該結合
物色調的深度與尿素溶液成分正相關(guān)，在光波長(cháng)525nm上有較大吸取峰。

2.測定法。

取攪拌試品10.0mL于100mL容量瓶中，添加亞鐵氰化鉀和乙酸鋅水溶液各4.0mL，用純凈水滴定劑，振搖均
勻。置放30min后，取10.0mL上清液，添加2.0mL二乙酰一肟水溶液，再添加三氯化鐵－氨基硫脲－鹽酸混和實(shí)驗試劑10.0mL，攪拌。將以上各管在開(kāi)水浴中加溫14min，置流動(dòng)性水里制冷2min，并且用純凈水稀釋液至
25mL。以純凈水作對照品，用1cm比色皿，于525nm光波長(cháng)處測量OD值值。

3.試驗標準。

（1）消化吸收光波長(cháng)的明確。加入適量標液，在480nm－560nm范疇內開(kāi)展全光波長(cháng)掃描儀，結果見(jiàn)圖1。

由圖1得知，吸光度值在480nm－525nm范疇內慢慢提升，且在525nm處做到較大，在525nm－560nm范疇內又慢慢減少，從而明確最好消化吸收光波長(cháng)為525nm。

（2）反映溫度的挑選。因為該反映在常溫狀態(tài)顯色反應開(kāi)展得比較慢，故考慮到在升溫的水浴中開(kāi)展反映，各自將恒溫水浴鍋的溫度設定為60℃、70℃、80℃、90℃、100℃，觀(guān)查其顯色反應，作出反映溫度與OD值的關(guān)系圖，詳細圖2。

由圖2能夠看得出，試品OD值受氣溫干擾很大，伴隨著(zhù)氣溫的上升而持續擴大，在溫度貼近100℃時(shí)，OD值做到最大，因此 挑選沸水浴加熱為最好的溫度標準。