食用添加劑是當今食品產(chǎn)業(yè)中不可以缺失的一部分，人造黑色素、甜味素和添加劑做為主要的食用添加劑被普遍使用于食品生產(chǎn)生產(chǎn)加工?？墒?，伴隨著(zhù)其在食品企業(yè)的普遍應用，違反規定及超限定應用事情經(jīng)常發(fā)生，所產(chǎn)生的食品質(zhì)量安全難題也日益突顯，安全管理難題已被納入食品衛生安全整治工作中的關(guān)鍵內容。伴隨著(zhù)我們生活水平的提升及對身心健康的關(guān)心，紅酒漸漸地替代了酒精含量較高的純糧酒，變成 了許多 酒宴和聚會(huì )的“新歡”，消耗量展現日益增加的發(fā)展趨勢，但紅酒銷(xiāo)售市場(chǎng)仍有很多違反規定應用添加物或是添加物超標準的狀況，乃至有非法商人運用香料、黑色素、乙醇、甜味素等添加物開(kāi)展勾調，生產(chǎn)制造假冒偽劣產(chǎn)品紅酒商品，攪亂紅酒銷(xiāo)售市場(chǎng)，傷害顧客身心健康。

近些年，國家相關(guān)機構在對全國各地紅酒的抽樣檢驗流程中發(fā)覺(jué)，亂用添加物狀況經(jīng)常發(fā)生，因而紅酒中違反規定運用的防腐劑也變成我國食品衛生安全監管抽樣檢驗的重點(diǎn)項目建設。伴隨著(zhù)在我國食品類(lèi)安全管理水準的提高，為提升工作效能，便捷監督機構和生產(chǎn)商對紅葡萄酒中添加劑、甜味素和色素沉著(zhù)的日常檢測，開(kāi)發(fā)設計敏感度高、適用范圍廣的高通量測序檢驗方式以合理地解決添加物在紅酒中的亂用，及其面對突發(fā)性食品類(lèi)安全事故具備關(guān)鍵的實(shí)際意義。

為確保食品衛生安全，必須 對紅葡萄酒中食用添加劑的成分開(kāi)展檢驗?，F階段，國家標準有對于紅酒中添加劑、黑色素和甜味素等的檢查方式 ，但這種規范大多數對于單一或某幾類(lèi)食用添加劑，且試品的前處理方式不盡相同，針對紅酒中多種多樣添加物則必須逐一測量，程序流程復雜，現場(chǎng)采樣長(cháng)，高效率很低，在實(shí)現大批量試品檢驗時(shí)，必須大批量的財力物力。

近些年，世界各國有關(guān)紅酒中添加劑、甜味素和黑色素檢驗辦法的文獻資料報導許多 ，關(guān)鍵選用離子色譜法、氣相色譜分析、高效率液相色譜儀、高效率液相色譜儀質(zhì)譜等，盡管有關(guān)檢驗辦法的消息許多 ，在檢驗敏感度和精確度層面均逐步提高，但經(jīng)文獻資料，大多數只對于某一類(lèi)添加物開(kāi)展檢驗，不利對紅葡萄酒中多種類(lèi)型添加物的規模性篩選。此外，包含在我國國家行業(yè)標準以?xún)?，現階段較為常見(jiàn)的研究方法為液相色譜儀法，該方式無(wú)法給予總體目標化學(xué)物質(zhì)的化學(xué)結構信息內容，抗干擾性相對來(lái)說(shuō)較差，在具體試品剖析時(shí)很容易遭受栽培基質(zhì)影響而造成陽(yáng)性狀況。

液相色譜儀與質(zhì)譜分析液質(zhì)質(zhì)技術(shù)性可以在一定水平上減少栽培基質(zhì)影響，針對必須高靈敏、寬應用領(lǐng)域的檢驗工作中來(lái)講，已變成最合適的技術(shù)手段之一，慢慢運用于添加物的檢驗。本試驗選用高效率液相色譜儀-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)性，運用高效率液相色譜儀的強分離出來(lái)工作能力和質(zhì)譜分析精確判定、高可選擇性和高靈敏的特性，在較短的時(shí)間內就可以進(jìn)行多組分的分離出來(lái)評定，創(chuàng )建了一種可一起測量并可以精確判定定量分析紅酒中添加劑、甜味素和色素沉著(zhù)的方式 。

一、原材料與方式

1、原材料、實(shí)驗試劑與儀器設備

紅酒樣：購自零售商場(chǎng)和店鋪。

實(shí)驗儀器：LCMS-8050高效率液相色譜儀-串連質(zhì)譜儀器（日本Shimadzu企業(yè)，實(shí)際配備為L(cháng)C20ADXR×2輸液泵，DGU-20A3R線(xiàn)上脫氣輪，SIL20AXR自動(dòng)進(jìn)樣器，CTO-20AC柱溫箱，CBM-20A系統軟件控制板，LCMS-8050三重四極桿質(zhì)譜儀器，LabSolutionsVer.5.91色譜工作平臺）；Milli-QReference超純水器（英國Millipore公司）；超聲波清洗器（KQ-500DE，昆山市超聲波儀器設備有限責任公司）；AcquityUPLCHSST₃柱（100mm×2.1mm,1.8µm，英國Waters企業(yè)）；0.22μm尼龍濾膜（上海安譜儀器設備有限責任公司）。

實(shí)驗試劑：工業(yè)甲醇、乙腈、甲酸、乙酸銨（HPLC級，Dikma企業(yè)）；甜蜜素（Sodiumcycamate）、安賽蜜（Acesulfame-K）、糖精鈉（Saccharinsodium）、阿斯巴甜（Aspartame）、三氯蔗糖（Sucralose）、甜菊糖苷（Stevioside）、紐甜（Neotame）、阿力甜（Alitame）；誘惑紅（Allurared）、赤蘚紅（Erythrosine）、莧菜紅（Amaranth）、檸檬黃（Carmine）、焦糖色（Tartrazine）、日落黃（Sunsetyellow）、亮藍（Brilliantblue）；脫氫乙酸（Dehydroaceticacid），英國Sigma-Aldrich企業(yè)，澳大利亞TRC企業(yè)和法國Dr.EhrenstorferGmbH企業(yè)，純凈度≥95%。

2、實(shí)驗方法

（1）規范溶液的配制
各自精確稱(chēng)量16種添加物標準物質(zhì)于10mL深棕色容量瓶中，自來(lái)水或工業(yè)甲醇融解并滴定劑，配置成濃度值為1mg/mL的單標貯備液，于-18℃下遮光儲存。用工業(yè)甲醇稀釋液并配置正中間濃度值的規范切削液，于4℃遮光儲存。依據須要用流動(dòng)性相逐步稀釋液，配置成合理含量的混和規范切削液，現配現用。

（2）試品前解決方式

取紅酒試品2.0mL于10mL容量瓶中，用超純水系統滴定劑，超聲波攪拌，過(guò)0.22μm濾紙，滲瀝液供測量。

（3）色譜儀標準

離子交換柱：AcquityUPLCHSST3柱（100mm×2.1mm,1.8µm，英國Waters企業(yè)）。流動(dòng)性相：（A）工業(yè)甲醇和（B）10mmol/L乙酸銨溶液，流動(dòng)速度0.35mL/min；梯度方向過(guò)柱程序流程為：0min，工業(yè)甲醇的摩爾分數為10%；0～3min，工業(yè)甲醇的摩爾分數從10%升到90%，并維持2.5min，5.5～5.51min；工業(yè)甲醇的摩爾分數從90%降到10%；5.51min～6.5min，工業(yè)甲醇的摩爾分數維持10%。柱溫為35℃；氣相容積：2μL。

（4）質(zhì)譜分析標準

分析儀：LCMS-8050；離子源：電噴霧器離子源（ESI）；掃描儀方法：正空氣負離子與此同時(shí)掃描儀；離子源插口工作電壓：0.5kV；做霧化氣：N23.0L/min；干躁氣：N210L/min；撞擊氣：氬氣；DL溫度：250℃；加熱器溫度：400℃；逐行掃描：多反映檢測(MRM)；停留時(shí)間：15ms；時(shí)間延遲：3ms；16種添加物標準物質(zhì)MRM主要參數見(jiàn)表1。

二、結果與探討

1、試品前解決標準的提升

與別的剖析方式不一樣，質(zhì)譜分析通常具有一定的基質(zhì)效應，當應用ESI源時(shí)，在離子化全過(guò)程中栽培基質(zhì)成分與總體目標物市場(chǎng)競爭，更易發(fā)生栽培基質(zhì)抑制效應。降低基質(zhì)效應的辦法一般有稀釋液試品水溶液、提升凈化處理流程、配置栽培基質(zhì)配對標液等。本探討選用立即氣相方法做好剖析，以防止傳統式的液液萃取、固相萃取方式利用率低、可重復性差，且會(huì )采用大量的溶液的缺點(diǎn)，但充分考慮紅酒中帶有一定占比酒精和糖原，為降低基質(zhì)效應對測量的危害，需對試品開(kāi)展稀釋液解決。稀釋液的辦法能夠減少酒精對色譜儀峰形危害，變弱基質(zhì)效應，可是會(huì )減少方式的方法檢出限。歷經(jīng)對流行知名品牌的紅酒各自稀釋液2～15倍開(kāi)展檢驗，不一樣稀釋倍數試品檢測比照，最后明確稀釋倍數為5倍。