為完成枙子油中關(guān)鍵活性物質(zhì)玫瑰花茶酸的精確定量分析，選擇超聲波輔助液液萃取和固相萃取2種前解決辦法開(kāi)展系統軟件討論，關(guān)鍵調研了溶油實(shí)驗試劑、料液比、提純實(shí)驗試劑類(lèi)型、提純實(shí)驗試劑濃度值、液液萃取時(shí)間、液液萃取溫度及其液液萃取頻次等要素。

在2種前解決辦法的最佳情況下，超聲波輔助液液萃取得到的玫瑰花茶酸成分高過(guò)固相萃取，且超聲波輔助液液萃取實(shí)際操作簡(jiǎn)易、用時(shí)短、耗能低。因而，最佳前解決標準明確為：超聲波輔助液液萃取，以N，N-二甲基甲酰胺（DMF）為溶油實(shí)驗試劑，料液之比0.5 g油：5 mL DMF，100%工業(yè)甲醇為提純實(shí)驗試劑，室內溫度超聲波2 min，提純1次，檢驗到的枙子油中玫瑰花茶酸成分的平均數為69.65 μg/g（RSD=4.45%）。

在這個(gè)基礎上，對食用油開(kāi)展加標回收試驗，均值加標回收率為86.61%（RSD=1.16%），展現了方式的必要性和可靠性。該試驗創(chuàng )建的辦法可用以枙子油中玫瑰花茶酸的HPLC迅速、精確定量分析檢驗。

玫瑰花茶酸化學(xué)式為C20H24O4，歸屬于胡羅卜素。玫瑰花茶酸是寶貴的藥用價(jià)值資源，在避免心腦血管疾病層面具備一定作用，根據提高脂類(lèi)和碳水化合物的代謝，預防血脂高和主動(dòng)脈粥樣硬化。除此之外，玫瑰花茶酸還有著(zhù)防止老年性癡呆病、降低肌膚損害、抗焦慮、保護肝臟、抗癌等功效。

現階段，大多數將玫瑰花茶做為獲得玫瑰花茶酸的來(lái)源于，而藏紅花價(jià)格價(jià)格昂貴，是西班牙、土爾其、沙特等地種植的一種木本植物。枙子具備各種生物活性，是除玫瑰花茶之外，唯一帶有玫瑰花茶酸的綠色植物。玫瑰花茶在中國難得少有栽種，而枙子相對性劃算、適應能力強、栽種存活率高，是產(chǎn)自于國內的關(guān)鍵草本植物資源之一。

玫瑰花茶酸成分是枙子品質(zhì)的主要評價(jià)方法之一?，F階段，有關(guān)枙子中玫瑰花茶酸成分的檢查方式已經(jīng)有一些報導，如：張永利等選用酶打法將梔子果中的玫瑰花茶素轉換為玫瑰花茶酸，并且用紫外線(xiàn)光度法開(kāi)展檢驗。陳雁等選用HPLC法檢驗梔子果中的玫瑰花茶酸和玫瑰花茶素。梔子果具備20%～25%的可食人體脂肪，可生產(chǎn)加工成枙子油，相近茶油和植物油等商品，歸屬于我國適用、提倡的大健康產(chǎn)業(yè)新式草本植物油。

CAI X等根據HPLC-DAD/ESI-MS發(fā)覺(jué)枙子油中帶有玫瑰花茶酸。植物油中的少量活力營(yíng)養元素是點(diǎn)評植物油質(zhì)量的主要指標值。而玫瑰花茶酸做為一種枙子油獨有的結構性成份，或許還可以做為點(diǎn)評枙子油營(yíng)養成分質(zhì)量的主要參照指標值。GB 509.149—2016《食品安全國家標準 食品中梔子黃的測定》中牽涉到液態(tài)中玫瑰花茶酸的統計分析方法，將生抽等液態(tài)用工業(yè)甲醇融解后立即氣相檢驗，但該法并不適合用以食用油。

因為食用油不能溶解在乙醇中，因此 燃料先要歷經(jīng)溶油實(shí)驗試劑解決，再用有機化學(xué)氣相色譜分析在其中的玫瑰花茶酸。因而，怎樣合理溶油并高效率獲取、檢驗當中的玫瑰花茶酸是方式的關(guān)鍵所屬，目前，食用油中玫瑰花茶酸的定量分析檢驗方式末見(jiàn)報導。

超聲波輔助液液萃取法是一種傳統化的試品分離出來(lái)技術(shù)性。該辦法不用不必要儀器設備，用時(shí)短、高效率，但針對試品的分離純化很有可能不足徹底。如：劉金銘等選用超聲波輔助液液萃取獲取食品類(lèi)中的活力成份。

固相萃取法針對試品的清潔功效更強，能夠減少試品栽培基質(zhì)影響，提升檢驗敏感度，但固相萃取SPE小柱價(jià)錢(qián)較高。如：黃軒等選用C18固相萃取柱對植物油凈化處理，檢驗當中的乙基麥芽酚。

文章內容系統軟件較為了2種前處置技術(shù)性，挑選獲得了枙子油中玫瑰花茶酸的最佳獲取方式，創(chuàng )建了枙子油中玫瑰花茶酸的HPLC迅速、精確定量分析檢驗方式 ，為枙子中玫瑰花茶酸的探討打下了方法學(xué)基本，對枙子身心健康作用油的開(kāi)發(fā)設計及質(zhì)量點(diǎn)評帶來(lái)了關(guān)鍵專(zhuān)用工具。

1 原材料與方式

1.1 實(shí)驗試劑與儀器設備

玫瑰花茶酸標準物質(zhì)（純凈度≥98%）；Methyl Alcohol（HPLC級）、Acetonitrile（HPLC級）；酒精、工業(yè)甲醇、等保、乙腈、甲酸、N，N-二甲基甲酰胺（DMF）、乙醚、乙醚；正己烷、吡啶；CNWBOND Diol二醇油固相萃取SPE小柱；枙子油：浙江省驕梔高新科技有限責任公司；原香食用油：金太陽(yáng)糧油食品股權有限責任公司。

BAS224S電子分析天平，DS-2510DTH超聲波清洗器，D-37520超速離心機，SHB-Ⅲ-A冷卻循環(huán)水式常用機械泵，Essentia LC-16安捷倫儀器高效率液相色譜。

1.2 實(shí)驗方法

1.2.1 規范試品貯備液的制取

玫瑰花茶酸標準物質(zhì)貯備液的制?。壕_稱(chēng)量0.60 mg（精準至0.1 mg）玫瑰花茶酸標準物質(zhì)，用吡啶融解充分后，添加工業(yè)甲醇（色譜儀級）并遷移到50 mL容量瓶中，攪拌，滴定劑，得到12 μg/mL的玫瑰花茶酸規范貯備液。

1.2.2 HPLC色譜儀標準

離子交換柱為正相反柱頭Kinetex 5u XB C18（250 mm×4.6 mm，5 μm，Phenomenex）。色譜儀標準參考GB 509.149—2016《食品安全國家標準 食品中梔子黃的測定》：流動(dòng)性相為甲酸-乙酸銨緩沖液（A）-乙腈（B）；過(guò)柱梯度方向：0.0～1.0 min，20%B；1.10～8.0 min，20%～60%B；8.0～8.1 min，60%～70%B；8.10～13.0 min，70%～98%B；13.10～15.0 min，98%～20%B；15.10～20.0 min，20% B；流動(dòng)速度為1.0 mL/min；氣相量為10 μL；柱溫為35 ℃。

1.2.3 超聲波輔助液液萃取

1.2.3.1 溶油實(shí)驗試劑類(lèi)型及料液比

稱(chēng)量0.5 g枙子油于燒瓶中，各自添加5 mL正己烷、DMF、乙醚、乙醚溶油。待液壓油所有融解后，添加10 mL 100%的工業(yè)甲醇，常溫下標準，馬上超聲波2 min。超聲波后，經(jīng)8000 r/min離心式10 min，分層次后汲取有機相，用工業(yè)甲醇滴定劑到25 mL容量瓶中。各自取2 mL樣液，經(jīng)0.45 μm尼龍66濾紙過(guò)慮后，開(kāi)展高效液相剖析。挑選好溶油實(shí)驗試劑以后，再對料液比開(kāi)展提升：即各自添加2.5、5、7.5、10、12.5 mL DMF。

1.2.3.2 提純實(shí)驗試劑類(lèi)型及濃度值

稱(chēng)量0.5 g枙子油于燒瓶中，添加5 mL DMF，待液壓油所有融解后，各自添加10 mL濃度值100%的甲酸、乙腈、工業(yè)甲醇、酒精、等保，馬上超聲波2 min，超聲波后經(jīng)8000 r/min離心式10 min，分層次后汲取有機相，工業(yè)甲醇滴定劑到25 mL的容量瓶中。各自取2 mL樣液，經(jīng)0.45 μm尼龍66濾紙過(guò)慮后，開(kāi)展高效液相剖析。挑選好提純實(shí)驗試劑以后，再對提純實(shí)驗試劑濃度值開(kāi)展提升：即各自添加濃度值70%、80%、90%、100%的工業(yè)甲醇。

1.2.3.3 溫度及時(shí)間對獲取枙子油中玫瑰花茶酸的危害

稱(chēng)量0.5 g枙子油于燒瓶中，添加5 mL DMF，待液壓油所有融解后，添加10 mL濃度值100%的工業(yè)甲醇，維持時(shí)間2 min不會(huì )改變，各自在30、60、90 ℃標準下開(kāi)展前解決，隨后經(jīng)8000 r/min離心式10 min，分層次后汲取有機相，工業(yè)甲醇滴定劑到25 mL的容量瓶中。各自取2 mL樣液，經(jīng)0.45 μm尼龍66濾紙過(guò)慮后，開(kāi)展高效液相剖析。時(shí)間標準為：30 ℃時(shí)，各自在2、12、22、32 min標準下開(kāi)展前解決。

1.2.3.4 提純頻次

明確溶油實(shí)驗試劑、料液比、提純實(shí)驗試劑類(lèi)型及濃度值、超聲波溫度和時(shí)間等要素后，對提純頻次開(kāi)展提升：稱(chēng)量0.5 g枙子油于燒瓶中，添加5 mL DMF，待油樣所有融解后，添加10 mL 100%的工業(yè)甲醇，馬上超聲波2 min，超聲波后經(jīng)8000 r/min離心式10 min，分層次后汲取有機相，工業(yè)甲醇滴定劑到50 mL的容量瓶中，得到提純1次的試品；稱(chēng)量0.5 g枙子油于燒瓶中，添加5 mL DMF，待油樣所有融解后，添加10 mL 100%的工業(yè)甲醇，馬上超聲波2 min，超聲波后經(jīng)8000 r/min離心式10 min，分層次后汲取有機相到50 mL容量瓶中。

再度往離心式后的油看中添加5 mL DMF，待油樣所有融解后，添加10 mL 100%的工業(yè)甲醇，馬上超聲波2 min，超聲波后經(jīng)8000 r/min離心式10 min，分層次后汲取第二次的有機相到置放于第一次有機相的50 mL的容量瓶中，并且用工業(yè)甲醇滴定劑。此為獲取2次的試品。同樣可獲得，獲取3次的試品。各自取2 mL樣液，經(jīng)0.45 μm尼龍66濾紙過(guò)慮后，開(kāi)展高效液相剖析。