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紫外分光光度法測定水果中維生素C含量

來(lái)源:鄭州天順食品添加劑有限公司 發(fā)布時(shí)間:2021-09-22 10:22:51 關(guān)注: 0 次
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維他命C又被稱(chēng)為L(cháng)-抗壞血酸,是人體正常生理學(xué)新陳代謝所不可缺少的一種維他命,能控制身體氧化還原反應新陳代謝反映,提高身體對外部條件的抗應激反應工作能力及其抵抗能力,新鮮水果中VC成分豐富多彩,是身體VC關(guān)鍵攝入來(lái)源于之一?,F階段,測量VC的辦法有高效液相色譜色譜法、熒光法、2,6-二氯靛酚滴定法、電化學(xué)分析法,文中選用紫外線(xiàn)-由此可見(jiàn)光度法對VC的可靠性、最好獲取標準和10種常見(jiàn)水果的VC成分開(kāi)展了調查與測量,為大家評定水果營(yíng)養使用價(jià)值及存儲方法給予一定的參照。

1原材料與方式

1.1原材料

奇異果、冰糖橙、橘子、橘子、草莓苗、油桃、紅心火龍果、菠蘿蜜、梨、iPhone均購自某農貿批發(fā)市場(chǎng);抗壞血酸標準物質(zhì)(AR);冰乙酸(AR);硫酸銨(AR);硫酸(AR);鹽酸(AR)。

1.2儀器設備

UV759CRT紫外線(xiàn)-由此可見(jiàn)光度計(上海佑科儀器設備有限責任公司);JY電子分析天平(上海市方瑞儀器設備有限責任公司);GZX-9246數顯式鼓風(fēng)干燥箱(上海博迅實(shí)業(yè)公司有限責任公司)。

1.3獲取生產(chǎn)流程

新鮮水果試品→去蒂、清理→碾磨成勻漿→稱(chēng)量試件→添加獲取劑→遮光自然環(huán)境下萃取法→4000r/min離心式解決→紫外線(xiàn)-由此可見(jiàn)光譜分析儀測量(243nm)其OD值→測算品質(zhì)

1.4實(shí)驗方法

精確稱(chēng)量5.0000g預備處理后的試品勻漿于燒瓶中,按料液比(g∶mL)1∶2的比率添加2%冰醋酸水溶液,在室內溫度(20℃)遮光自然環(huán)境中萃取法30min,將萃取法液在4000r/min標準下離心式解決10min,取頂層發(fā)酵液滴定劑至100mL容量瓶后,用紫外線(xiàn)由此可見(jiàn)光度計在較大消化吸收光波長(cháng)243nm處測量OD值。每一組樣品做七次平行面實(shí)驗,取其均值,依據維他命C標曲測算得到試品中維他命C的成分。

1.5紫外線(xiàn)消化吸收曲線(xiàn)圖的測量

為了更好地調查試品維他命C的成分,選用含量為0.08mg/mL的規范運用液和試品水溶液在紫外線(xiàn)-由此可見(jiàn)光度計上開(kāi)展光波長(cháng)掃描儀,紫外線(xiàn)消化吸收曲線(xiàn)圖見(jiàn)圖1和圖2。

由圖1及圖2能夠 看得出維他命C標準物質(zhì)的λmax=243nm,新鮮水果試品的λmax=244nm,他們的最高消化吸收光波長(cháng)基本上一致,這表明維他命C在酸性溶液中的最高消化吸收光波長(cháng)為243nm。

1.6結果測算

將待測液的OD值值帶入維他命C標曲,查出來(lái)被測試品濃度值,再依據計算公式出試樣中VC的成分。

 2結果與探討

2.1VC獲取正交試驗結果剖析

根據對料液比、冰醋酸濃度值、獲取時(shí)間、獲取溫度等單要素對VC獲取實(shí)際效果的剖析,開(kāi)展正交試驗。為了更好地明確最好獲取實(shí)際效果,以萃取液在λmax=243nm處OD值為評定指標值,對之上四個(gè)要素設計方案L9(34)正交試驗,要素水準表見(jiàn)表1,正交試驗結果見(jiàn)表2。

由表2能夠 看得出,之上四個(gè)要素對VC獲取實(shí)際效果的不良影響的層次次序先后為A>B=C>D,即:料液比>冰醋酸濃度值=獲取時(shí)間>獲取溫度。從正交和分析數據能夠 得到,維他命C的較佳獲取標準為A1B1C1D1,即:料液比1∶2(g∶mL)、冰醋酸濃度值2%、獲取時(shí)間30min及其獲取溫度20℃。

2.2維他命C標曲的制作

本試驗選用紫外線(xiàn)-由此可見(jiàn)光度法對VC的成分開(kāi)展了測量,將1mg/mL的VC規范貯備液梯度方向稀釋液為0.02,0.04,0.08,0.12,0.16,0.20mg/mL的系列產(chǎn)品水溶液各自檢驗其OD值。以濃度值為橫坐標軸,OD值為縱軸制作維他命C標曲(見(jiàn)圖3)。

由圖3能夠 看得出,維他命C在含量為0.02~0.20mg/mL中間合乎朗伯-梅爾斯基本定律,有優(yōu)良的線(xiàn)性相關(guān),所得的線(xiàn)性回歸方程為Y=3.7994X-0.0066;相關(guān)系數rR2=0.9996。

2.3試品的含量測量

選擇水果橘子、草莓苗、橘子、火龍果等10種試品測量在其中VC的成分,依據不一樣新鮮水果試品下測定的OD值,在維他命C標曲中讀取獲取濃度值,測算得到不一樣新鮮水果試品獲取品質(zhì)的柱型關(guān)系圖,如圖所示4。

由圖4能夠 得到,新鮮水果試品中維他命C成分次序為奇異果(407.58mg/100g)>冰糖橙(390.86mg/100g)>橘子(319.31mg/100g)>橘子(284.65mg/100g)>火龍果(253.32mg/100g)>草莓苗(244.76mg/100g)>油桃(201.01mg/100g)>菠蘿蜜(181.44mg/100g)>梨(170.95mg/100g)>iPhone(144.95mg/100g)。

2.4方法檢出限

各自測量實(shí)驗試劑空缺8組,其OD值值見(jiàn)表2.3,在置信度約為99%時(shí),其方法檢出限MDL=t(n-1.099)×S=0.003mg/mL。

2.5精度

試驗對10種水果試品各自制取七個(gè)平行面樣,檢驗其OD值,測算成分。測得相對性相對標準偏差(RSD)在0.09%~0.58%中間,精度不錯。

2.6加標回收率

選用試品加標底方式開(kāi)展加標回收率測量,取三份試品添加不一樣含量的標液測量其OD值,平行測定6組,加標回收率在96.6%~106.8%中間。

3結果

文中選用紫外光光度法對日常生活常見(jiàn)的水果中VC的成分開(kāi)展檢測剖析,結果顯示較低濃度的的冰醋酸在冷凍遮光的標準下對維他命C具備一定的保障功效。根據單要素研究和正交試驗得到:料液核對VC萃取法實(shí)際效果危害很大,溫度對獲取實(shí)際效果危害較小,料液比1∶2(g∶mL),濃度值2%,時(shí)間30min,溫度為20℃時(shí)是最好獲取標準。測量結果顯示:奇異果中VC成分較高,為407.58mg/100g,iPhone中的VC成分相比較低,為144.95mg/100g。該方法檢出限為0.003mg/mL,RSD<1%,利用率在96.6%~106.8%中間,本方式檢驗新鮮水果中VC的成分能夠 獲得不錯的結果。

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